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白附子对荷瘤小鼠基因表达的影响及对环磷酰胺增效减毒作用的研究

作　者: 梅蕾
导　师: 于晓红
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中西医结合基础
关键词: 白附子 增效 减毒 p53 PCNA
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 129次
引　用: 4次
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内容摘要


目的:探讨白附子在小鼠体内引起H22肿瘤细胞死亡的类型与机制、对环磷酰胺的增效减毒作用及对荷瘤小鼠生存质量的影响。方法:建立H22荷瘤小鼠动物模型,随机分为五组。经给药十天后,次日处死,称小鼠体重,取瘤体、胸腺、脾,计算抑瘤率与q值,并计算免疫器官指数;摘眼球取血,测定外周血白细胞数量、BUN、Scr、GPT和GOT;取小鼠股骨,测定骨髓微核率;观察小鼠的生存状况和生存天数,测定荷瘤小鼠的生存质量和生存期应用光镜和电镜技术观察SGTR引起肿瘤细胞形态的改变;采用免疫组织化学方法测定H22肿瘤组织中突变型p53和PCNA蛋白的表达情况。结果:①SGTR引起肿瘤细胞死亡为细胞凋亡类型。②SGTR可下调突变型p53基因和PCNA基因的表达。③SGTR的抑瘤率为36.80%。SGTR与CTX合用抗肿瘤有相加作用（q=0.8619）。④SGTR未能改善化疗后荷瘤小鼠骨髓微核率的升高、外周血白细胞数量的降低。⑤SGTR能升高肿瘤所致的胸腺指数降低。⑥SGTR未降低肿瘤对小鼠造成的GPT和GOT的升高。⑦SGTR和肿瘤对小鼠的BUN和Scr未造成影响。⑧SGTR使荷瘤小鼠体重正常增长。⑨SGTR可以延长荷瘤小鼠的生存期,生命延长率达63.82%。结论:白附子混悬液可以通过调节肿瘤组织中突变型p53和PCNA基因的表达,从而引起肿瘤细胞凋亡,起到抗肿瘤的作用。SGTR和CTX联合用药有相加作用。SGTR对应用化疗药物环磷酰胺治疗后的荷瘤小鼠没有减毒作用。SGTR延长了荷瘤小鼠的生存期,改善了荷瘤小鼠的生存质量。

全文目录


缩略语表  5-6
中文摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
前言  9-10
综述  10-27
  1、肿瘤病因病机的研究  10-11
    1.1 祖国医学对肿瘤病因病机的认识  10-11
    1.2 现代医学对肿瘤病因病机的认识  11
  2、肿瘤治疗方法的演变  11-13
  3、抗肿瘤中医中药的研究概况  13-18
    3.1 中医治法治则  13
    3.2 抗肿瘤中药的分类  13-15
    3.3 中药抗肿瘤的作用机制  15-18
  4、机体免疫抑制状态与肿瘤的关系  18-19
    4.1 胸腺、脾脏的免疫抑制状态  18
    4.2 外周血细胞的免疫抑制状态  18-19
  5、细胞凋亡与肿瘤的关系  19-22
    5.1 p53基因与肿瘤的关系  19-21
    5.2 PCNA基因与肿瘤的关系  21-22
  6、中药对环磷酰胺化疗后的增效减毒作用研究  22-23
  7、中医药疗效评价的认识  23-24
    7.1 医学模式转变  23
    7.2 生存质量测评在中医药抗肿瘤疗效评价中的应用  23-24
    7.3 中医药治疗肿瘤的疗效标准  24
  8、白附子的研究概况  24-25
    8.1 国内外对白附子的化学成分的实验研究  24-25
    8.2 药效学研究  25
    8.3 毒性研究  25
  9、课题研究目的  25-27
材料与方法  27-33
  1、材料  27-28
    1.1 动物  27
    1.2 药物  27
    1.3 瘤株  27
    1.4 主要仪器  27-28
    1.5 主要试剂  28
    1.6 常用溶液配制  28
  2、方法  28-33
    2.1 动物模型的制备  28
    2.2 给药方法和剂量:  28-29
    2.3 小鼠体内抑瘤实验  29
    2.4 胸腺指数和脾指数的测定  29
    2.5 白细胞计数的测定  29-30
    2.6 骨髓微核率的测定  30
    2.7 p53和PCNA蛋白病理染色、免疫组化检测及图像分析  30-31
    2.8 GPT、GOT、BUN和Scr的检测  31
    2.9 肿瘤组织超微结构的观察  31-32
    2.10 观察指标  32
    2.11 统计学处理  32-33
结果  33-43
  1、抑瘤率及q值  33-34
  2、p53蛋白及PCNA蛋白表达实验结果  34-35
  3、SGTR对环磷酰胺化疗后H22荷瘤小鼠白细胞计数的影响  35-36
  4、SGTR对环磷酰胺化疗后H22荷瘤小鼠骨髓微核率的影响  36-37
  5、SGTR对环磷酰胺化疗后荷瘤小鼠体重的影响:小鼠H22瘤剥离后称重 ，实验结果如下  37-38
  6、SGTR对环磷酰胺化疗后荷瘤小鼠脏器指数的影响  38-39
  7、GPT和GOT实验结果  39-40
  8、BUN和Scr实验结果  40-41
  9、生存期实验结果  41
  10、荷瘤小鼠的一般状况观察  41-42
  11、H22荷瘤小鼠的组织形态学观察  42-43
    11.1 HE染色后光镜观察结果  42
    11.2 电镜下观察H22细胞形态  42-43
讨论  43-48
  1、白附子抗肿瘤的作用机制  43-46
    1.1 对免疫器官的影响  43-44
    1.2 对p53的影响  44
    1.3 对PCNA的影响  44-45
    1.4 对H22所致实体瘤的细胞形态和超微结构的影响  45-46
  2、白附子对环磷酰胺引起荷瘤小鼠毒副反应的拮抗作用  46
  3、白附子对H22实体瘤的疗效评价  46-48
结论  48-49
致谢  49-50
参考文献  50-56
附图  56-60
个人简历  60

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