学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

辛伐他汀对人脐静脉内皮细胞分泌炎症介质的影响

作　者: 季冉
导　师: 张立平
学　校: 山东大学
专　业: 人体解剖与组织胚学
关键词: 辛伐他汀 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 脂多糖(LPS) 炎症介质
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
下　载: 128次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的他汀类(Statins)药物属于3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)抑制剂,可以降低血清胆固醇的含量,是治疗高脂血症和动脉粥样硬化的药物中最有效的一类。越来越多的研究表明,他汀类药物降低心血管疾病的发病率和死亡率不仅仅依靠其降脂作用,除此以外还有多种药理作用,如改善血管内皮、促进纤溶、抗血栓形成等等。近年来,有关他汀类药物抗炎作用的研究日渐增多,其抗炎作用的发现表明,在临床中应用他汀类药物治疗动脉粥样硬化除依靠降脂作用外还有其他的益处,但是目前具体的抗炎机制尚不明确。白细胞介素6、8(interleukine6,8 IL-6,IL-8)、肿瘤坏死因子α(tumornecrosis factorαTNFα)、尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(urokinaseplasminogen activator/urokinase plasminogen activator receptor,uPA/uPAR)均可由内皮细胞分泌和表达,在炎症反应中,血管内皮细胞受刺激或损伤后可以导致这几种炎症介质的表达和释放增多,从而激活和趋化白细胞、介导白细胞和内皮细胞的黏附、促进白细胞的迁移等,因此,IL-6、TL-8、TNFα、uPA/uPAR在炎症的发生发展过程中扮演重要的角色。本次实验利用炎症刺激因子—脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)炎症介质IL-6、IL-8、TNFα、uPA/uPAR的分泌和表达,并观察辛伐他汀对几种炎症介质表达的影响,从而为进一步研究他汀类药物的抗炎作用机制提供理论依据。方法1.细胞培养:取新鲜脐带,分离人脐静脉内皮细胞,培养,鉴定,传代,第2-3代的细胞用来实验。2.细胞分组:将细胞随机分成4组:①对照组;②LPS组(100ng/ml);③辛伐他汀组(5μg/ml);④LPS+辛伐他汀组。细胞分别处理1h、12h、24h后,取细胞上清液做ELISA检测,同时将细胞冻存留做荧光实时定量PCR检测。3.取细胞上清液,分别做IL-6、IL-8、TNF-α的ELISA检测,纪录结果。4.收集细胞,分别抽取mRNA,反转录cDNA,进行荧光实时定量PCR检测IL-6、IL-8、TNF-α以及uPA/uPAR的mRNA表达,纪录结果。5.上述实验重复3次,并用统计学分析软件进行统计分析。结果1.人脐静脉内皮细胞鉴定结果:形态学鉴定,相差显微镜下,内皮细胞分布均匀,单层生长,形态为多角形,鹅卵石状镶嵌排列;内皮细胞Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测鉴定,荧光显微镜下,内皮细胞胞浆中可见大量黄绿色荧光。鉴定结果为人脐静脉内皮细胞。2.ELISA结果:对照组细胞,在不施加任何刺激的情况下可以少量分泌IL-6、IL-8、TNF-α;LPS刺激组(100ng/ml)细胞,IL-6、IL-8、TNF-α的分泌量比对照组明显增加,且有显著性差异(p＜0.01);辛伐他汀与LPS共孵育组IL-6、IL-8、TNF-α分泌量明显比LPS刺激组减少,且有显著性差异(p＜0.01)。3.实时定量PCR结果:LPS刺激组(100ng/ml)细胞,IL-6、IL-8、TNF-α以及uPA/uPAR的mRNA表达比对照组明显增强,且有显著性差异(p＜0.05);辛伐他汀与LPS共孵育组IL-6、IL-8、TNF-α以及uPA/uPAR的mRNA表达明显比LPS刺激组减少,且有显著性差异(p＜0.05)。结论1.LPS可以诱导人脐静脉内皮细胞IL-6、IL-8、TNF-α、uPA/uPAR mRNA表达增多。2.辛伐他汀可以有效抑制由LPS诱导的人脐静脉内皮细胞IL-6、IL-8、TNF-α、uPA/uPAR mRNA表达。

全文目录


中文摘要  5-8
英文摘要  8-11
符号说明  11-12
前言  12-19
  一. 他汀类药物抗炎作用研究进展  12-13
  二. 尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA/uPAR)研究进展  13-16
  参考文献  16-19
实验材料  19-22
  1. 主要实验试剂与耗材  19-20
  2. 基本仪器  20
  3. 主要溶液的配制  20-22
实验方法  22-26
  1. 人脐静脉内皮细胞的分离和培养  22
  2. 人脐静脉内皮细胞鉴定  22-23
  3. LPS和辛伐他汀干预细胞  23
  4. ELISA检测  23
  5. 实时荧光定量PCR  23-25
  6. 统计分析  25-26
实验结果  26-33
  1. 人脐静脉内皮细胞鉴定结果  26-27
  2. ELISA结果  27-29
  3. 实时荧光定量PCR结果  29-33
讨论  33-40
  一. 脂多糖(LPS)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达炎症介质  33-37
  二. 辛伐他汀抑制由LPS诱导的HUVEC炎症介质的表达  37-40
结论  40-41
参考文献  41-46
发表论文  46-53
致谢  53-54
攻读学位期间发表的学术论文目录  54-55
学位论文评阅及答辩情况表  55

相似论文

  1. 辛伐他汀对伴高脂血症的阿尔茨海默病双转基因小鼠作用研究,R589.2
  2. 辛伐他汀对急性髓系白血病细胞WT1/hDMP1基因表达的影响,R733.71
  3. PARP-1对RAW264.7细胞内HMGB1的定位和分泌的影响,R576
  4. 酪蛋白固体自乳化给药系统的研制及提高口服生物利用度的研究,R96
  5. LPS、肿瘤细胞坏死释放物质对小鼠黑色素瘤B16细胞侵袭、转移能力的影响,R739.5
  6. 甲氨蝶呤、辛伐他汀对类风湿关节炎外周血单个核细胞Th17/IL-17的作用及机制研究,R593.22
  7. 小剂量糖皮质激素治疗重症急性胰腺炎的临床观察,R576
  8. TLR信号途径对肿瘤细胞增殖的影响,R730.2
  9. 辛伐他汀联合皮质类固醇治疗多发性硬化疗效观察及对血清IL-6水平的影响,R744.51
  10. 内毒素与sTREM-1对于细菌性胸腔积液诊断价值的初步研究,R561.3
  11. 辛伐他汀影响兔桡骨骨折愈合的实验研究,R683
  12. 大鼠脓毒症预后判断指标集及预测模型的初步研究,R459.7
  13. 脓毒症大鼠早期蛋白的动态变化及其机制探讨,R459.7
  14. 血管紧张素Ⅱ1型受体在RAW264.7巨噬细胞中的表达及其在炎症介质产生中的作用,R363
  15. 胸导管引流对失血性休克大鼠并发肺损伤影响的实验研究,R459.7
  16. 20mg阿托伐他汀钙对颈动脉斑块患者P-选择素及血脂影响的研究,R743.3
  17. 辛伐他汀对激素性股骨头坏死兔的脂代谢影响,R681.8
  18. Notch信号在牙髓损伤修复中的作用研究,R781.3
  19. 多不饱和脂肪酸对LPS诱导的多巴胺能神经元损伤的作用及机理研究,R742.5
  20. 辛伐他汀对雷帕霉素作用下的大鼠心肌微血管内皮细胞的影响,R541.4
  21. 氯沙坦钾和辛伐他汀对I型糖尿病大鼠心肌CTGF和TGF-β1表达的影响,R965

中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学
© 2012 www.xueweilunwen.com