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咖啡因提高了同位移植LM3肝癌的放疗敏感性
作 者: 刘忠山
导 师: 王铁君;曾昭冲
学 校: 吉林大学
专 业: 临床医学
关键词: 咖啡因 辐射敏感性 原位移植肿瘤 肝细胞癌
分类号: R735.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,绝大多数患者诊断时由于病期较晚,已经不适合外科手术,放射治疗是不可手术切除肝癌的重要治疗手段并已经取得了一定的临床疗效,辐射诱导的肝损伤是目前制约肝癌放射治疗发展的一大原因。因此,关于肝癌放疗增敏方面的放射生物学研究意义重大。先前大量的细胞学研究显示咖啡因可以提高肿瘤细胞的辐射敏感性。但是,在目前我们所查阅的文献中,很少有人采用动物模型来研究咖啡因对肿瘤的放疗增敏作用,这或许是因为在体内达到体外放疗增敏所需要的毫摩尔/升的咖啡因浓度是困难的,但是咖啡因经口服后吸收率高,当它被摄取后,能够迅速的被胃和小肠吸收,进入门静脉,然后到达肝脏,亦浓聚于肝脏肿瘤中。因此,咖啡因或许对肝癌的放疗增敏有其独特的优势。在本次研究中,我们应用了裸鼠原位移植LM3肝癌肿瘤模型,采用5Gy/f,隔日一次,共三次的照射方式,来检测咖啡因是否提高了原位移植LM3肝癌组织的辐射敏感性并探讨其可能的增敏机制。通过对裸鼠原位移植肿瘤大小在放疗前及放疗后一个月内的连续观察,我们发现咖啡因显著提高了LM3原位移植肝癌的放疗敏感性。肿瘤生长曲线显示:咖啡因+放疗组的肿瘤生长速度明显低于其他三组。与单纯放疗组相比较,咖啡因+放疗组的磷酸化细胞周期依赖性激酶CDC2-Tyr15表达明显降低,细胞周期蛋白CyclinB1表达及TUNEL染色阳性细胞率显著增高,凋亡相关蛋白caspase-3的表达情况与TUNEL染色结果相一致,这为进一步的临床应用提供了可能。
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全文目录
内容提要 4-7 英文缩写词表 7-8 第1章 前言 8-13 第2章 材料和方法 13-23 2.1 主要实验材料 13-16 2.1.1 细胞系及实验动物 13 2.1.2 主要试剂 13-14 2.1.3 主要设备 14-15 2.1.4 主要软件 15-16 2.2 实验方法 16-23 2.2.1 表达红色荧光蛋白(red fluorescent protein, RFP)的HCCLM3细胞系的建立 16 2.2.2 裸鼠原位移植LM3 肝癌模型的建立 16-17 2.2.3 裸鼠的照射 17-18 2.2.4 裸鼠肿瘤荧光面积的测定、肿瘤生长曲线的绘制及终末期肿瘤体积的测量 18 2.2.5 Western Blot 分析 18-21 2.2.6 免疫组织化学分析与TUNEL 染色 21-22 2.2.7 数据分析 22-23 第3章 实验结果 23-32 3.1 咖啡因提高了原位移植LM3 肝癌的放疗敏感性 23-26 3.2 咖啡因降低了照射后磷酸化CDC2-TYR15(CDC2-TYR15-P)蛋白的表达 26-28 3.3 咖啡因提高了照射后CYCLIN81 蛋白的表达 28-30 3.4 咖啡因提高了照射后凋亡的发生 30-32 第4章 讨论 32-37 第5章 结论 37-38 参考文献 38-44 综述 44-53 在校期间发表的论文 53-54 致谢 54-55 中文摘要 55-57 ABSTRACT 57-59
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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