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cGMP依赖性蛋白激酶II在人体消化道正常组织及其相应消化道原发性恶性肿瘤组织中的表达

作 者: 翟健华
导 师: 陈永昌
学 校: 江苏大学
专 业: 人体解剖与组织胚胎学
关键词: cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ 免疫组化 半定量PCR 胃癌 食道癌
分类号: R735.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
下 载: 35次
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内容摘要


研究目的:检测cGMP依赖性蛋白激酶Ⅱ(cGMP dependent Protein KinaseⅡ,PKGⅡ)在人体消化道正常组织及其相应消化道原发性恶性肿瘤组织中表达的情况,探讨PKGⅡ在肿瘤发生发展中所起的作用以及临床意义。研究方法:(1)本研究利用免疫组化SP法检测PKGⅡ在220例人体正常消化道组织及其相应恶性肿瘤组织中的表达。(2)本研究应用逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)法检测PKGⅡ在50例人体正常胃组织及50例原发性胃癌组织中的表达;应用逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)法检测PKGⅡ在30例人体正常食道组织及30例原发性食道癌组织中的表达。(3)对临床资料与实验结果之间的关系进行了分析。研究结果:(1)免疫组化实验结果:①110例消化道癌组织PKGⅡ表达阴性率为72.73%(80/110),110例相应消化道正常组织PKGⅡ表达阴性率为10.00%(11/110)。②其中50例胃癌组织PKGⅡ表达阴性率为80.00%(40/50),50例正常胃组织PKGⅡ阴性表达率为6.00%(3/50);30例食道癌组织PKGⅡ表达阴性率为56.67%(17/30),30例正常食道组织PKGⅡ阴性表达率为3.33%(1/30);18例结肠癌组织PKGⅡ表达阴性率为72.22%(13/18),18例正常结肠组织PKGⅡ阴性表达率为22.22%(4/18);12例直肠癌组织PKGⅡ表达阴性率为83.33%(10/12),12例正常直肠组织PKGⅡ阴性表达率为25.00%(3/12)。③其中10例高分化胃癌PKGⅡ表达阴性率为40.00%(4/10),16例中分化胃癌PKGⅡ表达阴性率为81.25%(13/16),24例低分化胃癌PKGⅡ表达阴性率为95.83%(23/24),不同分化程度的胃癌之间,PKGⅡ阴性表达率有显著差异(P<0.05);其中11例高分化食道癌PKGⅡ表达阴性率为27.27%(3/11),9例中分化食道癌PKGⅡ表达阴性率为66.67%(6/9),10例低分化食道癌PKGⅡ表达阴性率为80.00%(8/10)。不同分化程度的食道癌之间,PKGⅡ阴性表达率有显著差异(P<0.05)。④其中21例早期胃癌PKGⅡ表达阴性率为71.43%(15/21),29例进展期胃癌PKGⅡ表达阴性率为86.21%(25/29),不同临床分期的胃癌之间,PKGⅡ阴性表达率没有显著差异(P>0.05)。16例早期食道癌PKGⅡ表达阴性率为50.00%(8/16),14例进展期食道癌PKGⅡ表达阴性率为64.29%(9/14),不同临床分期的胃癌之间,PKGⅡ阴性表达率没有显著差异(P>0.05)。(2)逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)检测结果:①正常胃组织组PKGⅡ/GAPDH((?)±S)为1.532±0.285,原发性胃癌组为PKGⅡ/GAPDH((?)±S)0.456±0.239,(P<0.01),有显著差异;正常食道组织组PKGⅡ/GAPDH((?)±S)为1.841±0.314,原发性食道癌组为0.392±0.212((?)±S),(P<0.01),有显著差异。结论:原发性消化道恶性肿瘤组织中PKGⅡ的表达均低于正常消化道组织。原发性胃癌中,PKGⅡ的表达与肿瘤的分化程度相关,分化程度越低,PKGⅡ的表达就越低:但其表达与年龄、性别、临床分期、有无淋巴结转移无关。原发性食道癌中,PKGⅡ的表达与肿瘤的分化程度相关,分化程度越低,PKGⅡ的表达就越低:原发性食道癌中,PKGⅡ的表达与有无淋巴结转移有关,有淋巴结转移组,PKGⅡ的表达低,但其表达与年龄、性别、临床分期无关。PKGⅡ的减少、缺失可能是原发性消化道恶性肿瘤发生发展的重要因素之一,是胃癌和食道癌恶化的标志。

全文目录


摘要  6-9
ABSTRACT  9-16
第一章 绪论  16-24
  1.1.PKG的研究背景  16-21
    1.1.1 PKG的分类,分布  16
    1.1.2 PKG的结构  16-18
    1.1.3 PKG的活性调节  18
    1.1.4 PKG Ⅱ的主要功能及其与肿瘤的联系  18-21
  1.2 本论文研究的目的、意义、方法、实验方案的设计  21-24
    1.2.1 研究目的  21
    1.2.2 研究内容  21-22
    1.2.3 研究意义  22
    1.2.4 研究方法及技术  22
    1.2.5 实验方案的设计  22-24
第二章 PKGⅡ蛋白在人体正常消化道组织和相应的恶性肿瘤组织中的表达  24-38
  2.1 PKG Ⅱ在本实验室的研究进展  24-26
  2.2 材料和方法  26-32
    2.2.1 标本  26-27
    2.2.2 试剂  27
    2.2.3 主要仪器  27-29
    2.2.4 实验原理  29
    2.2.5 步骤  29-32
    2.2.6 结果判断  32
    2.2.7 统计学处理  32
  2.3 结果  32-35
    2.3.1 PKG Ⅱ在正常胃组织、胃癌、正常食道组织、食道癌、正常直肠组织、直肠癌、正常结肠组织、结肠癌中的表达  32-33
    2.3.2 PKG Ⅱ在人体胃癌组织中的表达与临床病理参数的关系  33-34
    2.3.3 PKG Ⅱ在人体食道癌组织中的表达与临床病理参数的关系  34-35
  2.4.讨论  35-38
第三章 PKG Ⅱ mRNA在人体正常胃组织、原发性胃癌组织及人体正常食道组织、原发性食道癌组织中的表达  38-53
  3.1 材料和方法  38-44
    3.1.1 标本  38
    3.1.2 试剂  38-39
    3.1.3 主要仪器  39
    3.1.4 引物设计和合成  39
    3.1.5 实验原理  39-41
    3.1.6 RT-PCR实验步骤  41-44
  3.2 结果  44-53
    3.2.1 PKG Ⅱ mRNA在正常胃组织、胃癌组织中的表达  44-46
    3.2.2 PKG Ⅱ mRNA在正常食道组织、食道癌组织中的表达  46-48
    3.2.3 讨论  48-53
第四章 主要结论和展望  53-56
  4.1 主要结论  53
  4.2 展望  53-56
参考文献  56-61
英文缩写索引  61-62
附录  62-70
致谢  70-71
攻读硕士学位期间发表的文章  71

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 胃肿瘤
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