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野山杏及其提取物对实验动物高脂血症的干预及其对非酒精性脂肪肝的预防作用

作　者: 张华
导　师: 王颖
学　校: 新疆农业大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 高脂血症非酒精性脂肪肝野山杏
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 78次
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内容摘要

目的①构建用于高脂血症干预研究的动物模型,模型需具备稳定、可靠、重复性好等特点。探讨野山杏果肉(flesh of wild apricot, FWA)对高脂血症小鼠血脂的影响及其对肝脏的保护作用和抗动脉粥样硬化的作用。②研究野山杏中有效成分总黄酮和有机酸的超声法最佳提取工艺,并建立其含量测定方法。③探讨野山杏提取物(WAEU)对大鼠高脂血症的预防和对非酒精性脂肪肝的保护作用及其作用机制。方法①选用健康雄性昆明种小鼠,随机分为正常对照组、高脂模型组、血脂康阳性对照组以及FWA高、中、低剂量组,以脂肪乳剂灌胃4wk建立小鼠高脂血症模型,同时每天灌胃血脂康(0.1 g·kg-1)和FWA (0.2,0.3,0.4 g·kg-1)。4wk后,所有小鼠空腹过夜后称重,眼球采血,测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)的含量,计算肝脏指数、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)的含量和动脉硬化指数(AI),并采用组织学方法观察肝脏的病理学变化来评价FWA对高脂血症小鼠肝脏的保护作用。②以总黄酮含量为考察指标,采用单因素实验确定各因素对提取工艺的影响,正交实验确定超声提取野山杏总黄酮的最佳工艺条件,用紫外分光光度法进行总黄酮含量测定；采用单因素实验/正交实验研究料液比、乙醇浓度、提取温度和提取时间4个因素对野山杏有机酸提取的影响规律,采用电位滴定法对其进行含量测定。③用脂肪乳剂灌胃的方法制作大鼠高脂血症模型,每天灌胃WAEU(0.2g·kg-1和0.4 g·kg-1)和血脂康(0.2 g-kg-1),预防给药8wk,观察不同剂量的WAEU对脂肪乳剂诱导的高脂血症大鼠血清中TC、TG、HDL-C和LDL-C等血脂水平和肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)等抗氧化能力的影响；以高脂血症大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肝脏病理学变化等水平来评价WAEU对大鼠因高血脂引起的非酒精性脂肪肝的保护作用;同时测定肝脂酶(LPL)、脂蛋白脂酶(HL)和脂肪酶(LPS)等肝脏脂类代谢酶来研究其降血脂作用的机制。结果①FWA能显著降低高脂血症小鼠血清TC、TG、LDL-C和AI水平(p<0.01),可显著升高HDL-C的含量(p<0.001),显著降低高脂血症小鼠的肝脏指数(p<0.001),以FWA高剂量作用尤其明显(p<0.001)。重要的是,通过组织形态学观察发现FWA对高脂血症小鼠的肝脏保护作用较好,能明显减轻肝组织的脂肪变性程度。②影响野山杏总黄酮超声提取效果的主次因素为：温度>料液比>乙醇浓度,最佳提取工艺为温度70℃,料液比1∶50,乙醇浓度50%,在此组合参数下,提取率为5.39%;超声提取野山杏有机酸的最佳工艺为料液比1:10 (g/mL),乙醇浓度30%,超声温度60℃,时间为40min,总有机酸平均含量为18.65%。③野山杏超声提取物(WAEU)能够显著降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C含量和ALT、AST活性,显著升高HDL-C含量;明显降低大鼠肝脏中MDA含量,提高肝脏SOD和GSH-Px的活性；减轻高血脂大鼠的肝脏脂肪变性,以WAEU高剂量效果最优,肝脏组织可基本恢复正常；WAEU可增加肝脏总脂酶(LPL和HL)的活性,抑制脂肪酶LPS的活性。结论①FWA能降低高脂血症小鼠的血脂水平,在一定程度上预防和治疗脂肪肝,可能有抗动脉粥样硬化形成的作用。②超声法提取野山杏总黄酮省时、节能、提取率高；采用电位滴定法进行有机酸含量测定方法简单、可行且精密度高。③WAEU具有十分显著地降血脂和预防非酒精性脂肪肝形成的效果,可能与提高抗氧化能力和肝脏脂蛋白代谢相关酶的活性,抑制脂肪生成等多种途径有关,其作用呈现一定的量效关系。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-9
第1章绪论  9-20
  1.1 高脂血症的分类  9-10
  1.2 高脂血症的诊断  10
  1.3 中医对高脂血症的病因及致病机理的认识  10-12
  1.4 中医对高脂血症的治疗  12-14
  1.5 高脂血症的西医治疗  14-17
  1.6 野山杏资源的研究现状  17-19
  1.7 本论文研究的目的和内容  19-20
第2章野山杏果肉对高脂血症小鼠血脂的影响及保肝作用  20-30
  2.1 实验材料  20
  2.2 实验方法  20-24
  2.3 结果  24-27
  2.4 讨论  27-30
第3章野山杏有效成分的含量测定及提取工艺研究  30-43
  3.1 材料与仪器  30
  3.2 方法与结果  30-40
  3.3 讨论  40-43
第4章野山杏超声提取物对高脂血症大鼠的血脂及非酒精性脂肪肝的影响及其机制研究  43-61
  4.1 材料与仪器  43-44
  4.2 方法  44-53
  4.3 结果  53-58
  4.4 讨论  58-61
第5章结论  61-62
参考文献  62-67
致谢  67-68
作者简介  68

野山杏及其提取物对实验动物高脂血症的干预及其对非酒精性脂肪肝的预防作用

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