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α-生育酚对颅脑损伤大鼠脑组织Nogo-A、NgR蛋白表达影响的实验研究

作　者: 韩永丰
导　师: 廖达光
学　校: 中南大学
专　业: 外科学
关键词: α-生育酚脑外伤 Nogo-A NgR 免疫组化染色神经再生
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：研究α-生育酚对颅脑损伤大鼠脑组织中神经生长抑制因子Nogo-A、NgR蛋白表达的影响,并探讨其在神经再生中的作用机制。方法：将体重250-300g的健康SD大鼠120只,随机分为假手术组、脑外伤组和α-生育酚组,每组分为1天、3天、7天,14天和21天共5个时间点,每个时间点的大鼠数目为8只。脑外伤组与α-生育酚组采用改进的Feeney’S自由落体模型造成大鼠中度脑挫裂伤,假手术组仅开头皮和骨窗,不做打击。α-生育酚组于伤后6小时给药,以后每日腹腔注射α-生育酚200mg/kg,连续注射21d,脑外伤组、假手术组在相同时间内注射相应剂量的生理盐水。根据mNSS评分表,对3组大鼠在术后相应时间点进行神经功能评分。利用HE染色观察大鼠脑组织神经细胞形态病理改变和免疫组化染色检测神经细胞内Nogo-A及NgR蛋白表达的变化,并进行比较分析。结果：1.组织病理学变化：HE染色显示假手术组大鼠脑组织结构清晰,均匀致密。脑外伤组则出现局部出血、水肿,大量炎细胞浸润,胞核固缩溶解、坏死,后逐渐出现胶质细胞和纤维组织增生。而注射а-生育酚组则较脑外伤组有一定程度的减轻。2.与假手术组相比,脑外伤组大鼠脑组织Nogo-A蛋白的表达在各时间点均高于假手术组(P<0.01),14天时达峰值；与脑外伤组相比,α-生育酚组大鼠脑组织Nogo-A蛋白的表达在各时间点均降低(P<0.05),有统计学意义。3.与假手术组相比,脑外伤组大鼠脑组织NgR在第一天就有降低,3天时降至最低(P<0.01),后又逐渐升高,7天时与假手术组表达基本相同,14天、21天均较假手术组升高(P<0.01)；治疗组NgR蛋白表达趋势与脑外伤组基本相同,在3天时降至最低(P<0.05),7天时与假手术组表达基本相同,在14天、21天较脑外伤组有明显降低(P<0.01),有统计学意义。结论：1.α-生育酚能有效降低脑外伤后脑组织Nogo-A、NgR的表达,促进神经轴突再生。2.α-生育酚可以显著减轻脑外伤大鼠的损伤程度,起到脑保护作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
中英文对照表  8-11
第一章前言  11-13
第二章实验方法  13-18
  2.1 实验材料  13-14
    2.1.1 实验动物  13
    2.1.2 主要试剂  13
    2.1.3 辅助试剂  13
    2.1.4 主要仪器  13-14
  2.2 实验方法  14-18
    2.2.1 实验动物分组及处理  14
    2.2.2 脑损伤模型的建立  14
    2.2.3 伤后神经症状评分  14-16
    2.2.4 标本的收集与处理  16
    2.2.5 苏木素—伊红(HE)染色  16
    2.2.6 Nogo-A与NgR的免疫组织化学方法检测  16-17
    2.2.7 数据收集  17
    2.2.8 统计分析  17-18
第三章结果  18-26
  3.1 神经功能评分结果  18
  3.2 HE染色结果  18-20
    3.2.1 大体观察  18
    3.2.2 组织学改变  18-20
  3.3 免疫组化结果  20-24
    3.3.1 Nogo-A在脑外伤大鼠脑组织中的表达变化  20-23
    3.3.2 NgR在脑外伤大鼠脑组织中的表达变化  23-24
  附图  24-26
第四章讨论  26-31
  4.1 关于脑外伤动物模型  26
  4.2 α-生育酚的作用  26-27
  4.3 脑外伤后大鼠神经行为学的变化及α-生育酚对其影响  27-28
  4.4 Nogo-A、NgR的生物学特性及在脑外伤中的表达变化和意义  28-29
  4.5 大鼠脑外伤后α-生育酚干预对脑组织Nogo-A蛋白的影响和意义  29-30
  4.6 大鼠脑外伤后α-生育酚干预对NgR的影响及意义  30-31
第五章结论  31-32
参考文献  32-35
综述  35-44
  参考文献  41-44
攻读学位期间的研究成果及获奖情况  44-45
致谢  45

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