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三种山核桃属植物组织培养技术研究

作　者: 纪小楠
导　师: 吕芳德
学　校: 中南林业科技大学
专　业: 森林培育
关键词: 山核桃组织培养叶片茎段褐化防治
分类号: S664.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本文选用美国山核桃、浙江山核桃、湖南山核桃实生苗和成年树的叶片和带芽茎段为试验材料。文中对最佳培养基筛选、外植体选择、茎段培养、叶片培养及褐化等问题做了较全面系统的试验研究。主要结果如下：1.美国山核桃组织培养中以叶片为试材进行培养时,应选择幼龄叶；叶片培养的最佳培养基为DKW;叶片培养褐化最低激素组合为2,4-D 1.0mg/L+IB A2.0mg/ L+6-BA0.02mg/L。2.美国山核桃组织培养预处理试材防治褐化试验中,采用2%的Na2S2O3溶液浸泡试材20-30min常规灭菌后,再将试材浸泡在经高压灭菌后的0.2%Na2S2O3溶液中,接种时直接取出防治褐化效果最佳;用浓度为300mg/L的PVP预处理试材5min,试材褐化率最低。3.美国山核桃叶片培养抑制褐变反应试验中,将接种后的培养基放入4℃的冰箱中冷藏7d,然后拿到培养室中继续培养,防治褐化效果最好;在培养基中添加5.0mg/LNa2S2O3或浓度为60mg/L以上的PVP,试材褐化率最低。4.在防治污染试验中,用青霉素预处理美国山核桃叶片并且在培养基中添加4g/L多菌灵,可以有效的控制试材的污染率。5.浙江山核桃茎段培养中,最佳芽生长分化和愈伤组织诱导的培养基及激素组合为DKW+IBA2.0mg/L+KT8.Omg/L;叶片培养的最佳培养基及激素组合为WPM+NAA 2.0mg/L+6-BA1.0mg/L。湖南山核桃茎段芽生长分化最佳培养基及激素组合为：DKW+IBA0.5mg/L+KT2.0mg/L;茎段愈伤组织诱导最佳激素组合为：IBA2.0mg/L+KT8.0mg/L;叶片培养的最佳培养基及激素组合为：WPM+NAA 1.5mg/L+6-BA3.0mg/L。两种山核桃组织培养时培养基中添加的最适蔗糖浓度均为30g/L。6.茎尖培养褐化防治试验表明：对于浙江山核桃和湖南山核桃来说,5.0mg/LNa2S2O3添加到培养基中均可有效抑制茎尖褐化。7.在浙江山核桃和湖南山核桃叶片组织培养褐化防治中,在培养基中添加的最佳抗氧化剂及其浓度为：Na2S2O32.0mg/L。在PVP预处理控制褐化试验中,浓度为200mg/L以上的PVP浸泡浙江山核桃叶片组织培养抑制褐变反映效果最佳；浓度为300mg/L以上的PVP浸泡湖南山核桃叶片抑制褐化效果最好。8.继代培养中,适合浙江山核桃和湖南山核桃的培养基为DKW；最佳继代激素组合,浙江山核桃为IBA1.0mg/L+6-B AO.2mg/L,湖南山核桃为IBA2.0mg/L;两种山核桃继代培养培养基的最佳pH为5.8。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-11
1 绪论  11-19
  1.1 核桃组织培养技术研究  12-18
    1.1.1 核桃组织培养概况  12-13
    1.1.2 外植体选择  13
    1.1.3 外植体消毒  13-14
    1.1.4 外植体褐化问题  14-16
    1.1.5 两种主要外植体的诱导技术  16-17
    1.1.6 核桃组织培养苗生根技术研究  17-18
  1.2 研究的目的意义  18-19
2 美国山核桃组织培养褐化研究  19-23
  2.1 试验材料  19
  2.2 试验方法  19-23
    2.2.1 接种室环境  19
    2.2.2 试验材料的清洗与消毒  19
    2.2.3 基本培养基的筛选  19-20
    2.2.4 不同树龄材料褐化程度的对比试验  20
    2.2.5 不同激素及其配比对褐化率影响的对比试验  20-21
    2.2.6 不同预处理对叶片褐化率影响对比试验  21
    2.2.7 冷藏处理外植体对褐化率的影响试验  21
    2.2.8 不同的抗氧化剂或吸附剂对褐化率的影响对比试验  21-22
    2.2.9 青霉素和多菌灵对污染率的影响试验  22
    2.2.10 利用PVP防止试材褐变试验  22-23
3 浙江山核桃与湖南山核桃组织培养技术研究  23-27
  3.1 试验材料  23
  3.2 试验方法  23-27
    3.2.1 接种室环境  23
    3.2.2 试验材料的清洗与消毒  23
    3.2.3 茎段初代培养  23-24
    3.2.4 叶片初代培养  24-26
    3.2.5 继代培养  26-27
4 结果与分析  27-61
  4.1 美国山核桃组织培养研究  27-38
    4.1.1 基本培养基的筛选  27
    4.1.2 不同树龄材料褐化程度的对比  27-28
    4.1.3 不同激素及其配比对褐化率的影响  28-31
    4.1.4 不同预处理对叶片褐化率的影响  31-32
    4.1.5 冷藏处理外植体对褐化率的影响  32-34
    4.1.6 不同的抗氧化剂或吸附剂对褐化率的影响  34
    4.1.7 青霉素和多菌灵对山核桃污染率的影响  34-35
    4.1.8 不同的PVP浓度浸泡控制试材对褐化的影响  35-37
    4.1.9 培养中添加不同浓度的PVP对外植体褐化率的影响  37-38
  4.2 浙江山核桃与湖南山核桃组织培养技术研究  38-61
    4.2.1 茎段初代培养  38-44
    4.2.2 叶片初代培养  44-56
    4.2.3 继代培养  56-61
5 结论与讨论  61-65
  5.1 结论  61-63
  5.2 讨论  63-65
6 创新点  65-67
参考文献  67-73
附录A  73-74
附录B  74-75
附录C  75-79
附录D:攻读学位期间的主要学术成果  79-80
致谢  80

三种山核桃属植物组织培养技术研究

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