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小麦根际产荧光假单胞细菌拮抗纹枯病菌机理研究

作　者: 张美云
导　师: 鲁国东；陈怀谷
学　校: 福建农林大学
专　业: 农药学
关键词: 拮抗细菌 小麦纹枯病 鉴定 拮抗机理 根部定殖
分类号: S435.121
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


由禾谷丝核菌(Rhizoctonia cerealis Vander Hoeven)侵染引起的小麦纹枯病是长江中下游麦区重要的土传病害。大量研究表明,假单胞菌是小麦根际的重要习居菌,它们对多种土传植物病害都具有一定的抑制作用。本文对从江苏省姜堰市稻秸秆覆盖及非秸秆覆盖小麦根围分离得到的37株假单胞细菌进行筛选,平板拮抗测定获得10株(T4、T8、T19、T22、T23、Ct10、Ct14、Ct22、Ct26、Ct28)对小麦纹枯病菌拮抗效果明显的菌株。采用部分生理生化特性及分子系统学分析的方法对10株拮抗菌进行了分类学鉴定,发现它们皆为产荧光假单胞细菌,其中T4、T8、T19、T22、Ct10、Ct22、Ct28、Ct14为Pseudomonas migulae,T23为P. poae,Ct26为P. putida。产荧光假单胞菌能够抑制多种土传植物病害,最主要的原因是它们能产生多种抗生素,包括2, 4-二乙酰基间苯三酚、1-羧基-吩嗪、吡咯菌素、藤黄绿脓素等。本研究通过化学和分子生物学的方法分析了10株产荧光假单胞菌所产拮抗物质的情况。基因检测和次生代谢物分析的结果表明:10个菌株都产生嗜铁素及蛋白酶,不产生吡咯菌素和藤黄绿脓素,菌株T4、T22、T23、Ct26、Ct28产生2,4-二乙酰基间苯三酚,T4、T8和Ct28产生吩嗪,T22、T23产生氢氰酸,除T8、T23、Ct10、Ct26外其余6株均产生几丁质酶。明确产荧光假单胞拮抗菌对小麦纹枯病的控病效果以及它们在小麦根际的定殖情况,有利于进一步评估拮抗菌株的应用价值。在温室条件下进行了种子处理防治小麦纹枯病效果试验,10个菌株对小麦纹枯病都有一定的控制作用,其中菌株Ct26的控病作用最好,其防病效果达47%。定殖试验的结果表明这10个菌株均能在小麦根部定殖,定殖时间最长的达45d之久。

全文目录


摘要  7-8
ABSTRACT  8-10
引言  10-11
第一章 文献综述  11-24
  1 小麦纹枯病的研究概况  11-13
    1.1 病原  11
    1.2 侵染与发病症状  11-12
    1.3 影响发病的因素  12
    1.4 小麦纹枯病的防治方法  12-13
  2 生防细菌研究概况  13-15
    2.1 生防细菌在生物防治中的应用  13-14
    2.2 根际促生细菌（PGPR）  14-15
  3 产荧光假单胞细菌与生物防治  15-24
    3.1 产荧光假单胞细菌的种类及生物学特性  15-17
    3.2 产荧光假单胞菌生防作用机理  17-20
    3.3 产荧光假单胞菌的根部定殖  20-21
    3.4 产荧光假单胞菌的遗传改良  21-24
第二章 小麦纹枯病菌禾谷丝核菌拮抗细菌的筛选和鉴定  24-34
  1 材料与方法  24-29
    1.1 供试材料  24
    1.2 常用培养基  24-25
    1.3 拮抗菌的活化  25
    1.4 供试菌株拮抗能力测定  25
    1.5 拮抗菌的鉴定  25-29
  2 结果与分析  29-32
    2.1 供试菌株的平板拮抗特性  29-30
    2.2 供试菌株的鉴定  30-32
  3 讨论  32-34
第三章 产荧光假单胞菌的生防作用与定殖能力的测定  34-40
  1 材料与方法  34-36
    1.1 供试材料  34
    1.2 温室中拮抗菌的控病效果测定  34-35
    1.3 利福平抗性标记菌株的筛选  35
    1.4 利福平抗性菌株对小麦纹枯菌的拮抗作用  35
    1.5 10 株拮抗菌株的定殖情况测定  35-36
  2 结果与分析  36-38
    2.1 温室条件下拮抗菌的控病效果  36-37
    2.2 利福平抗性标记的筛选  37
    2.3 利福平抗性菌株对禾谷丝核菌的拮抗作用  37-38
    2.4 拮抗菌在小麦根部的定殖情况  38
  3 讨论  38-40
第四章 产荧光假单胞杆菌的拮抗机理研究  40-49
  1 材料与方法  41-44
    1.1 供试材料  41
    1.2 PCR 引物  41
    1.3 PCR 及平板检测产荧光假单胞类拮抗菌拮抗物质  41-43
    1.4 HPLC 检测2，4-DAPG 的产生情况  43
    1.5 利用转座子 Put/mini-Tn5 诱变产荧光假单胞菌  43-44
  2 结果与分析  44-47
    2.1 PCR 及其平板检测拮抗菌拮抗物质产生情况  44-46
    2.2 HPLC 检测2，4-DAPG 产生情况  46-47
    2.3 利用转座子Put/mini-Tn5 诱变产荧光假单胞菌  47
  3 讨论  47-49
全文结论  49-50
参考文献  50-61
致谢  61

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中图分类: > 农业科学 > 植物保护 > 病虫害及其防治 > 农作物病虫害及其防治 > 禾谷类作物病虫害 > 麦类病虫害 > 病害
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