|
猫泛白细胞减少症是由猫泛白细胞减少症病毒(FPV)引起的一种急性高度接触性传染病。在自然状态下,FPV能感染几乎所有的猫科、鼬科及浣熊科动物,引起猫、水貂、浣熊等动物很高的死亡率,尤其是近些年来该病严重影响着我国圈养大型野生猫科动物的健康。目前,控制该病的主要手段是进行免疫接种。为了有效地控制该病在我国大型野生猫科动物中的发生和流行,迫切需要掌握FPV在虎群中的感染和流行毒株的遗传变异情况,积极研制安全有效的疫苗。本研究分别利用微量血凝抑制试验和PCR方法对92份虎血清和143份虎粪便进行检测,并对疑似FPV感染的虎粪便进行了病毒的分离鉴定,同时对分离株FPV-HLJ的VP1、VP2和NS1基因进行了克隆、测序和遗传进化分析。在此基础上,以分离的毒株FPV-HLJ为种毒,采用同步接毒的方法接种于F81细胞进行疫苗毒的复制,经甲醛灭活后加入佐剂氢氧化铝胶,制备成细胞灭活疫苗。皮下接种2月龄非免疫家猫,抗体检测及攻毒实验表明能产生较理想的效果后,将该疫苗接种2月龄左右幼虎。结果,在调查的92份血清中FPV HI抗体阳性率为55.4%,并且至少在11月至次年2月的几个月内不断地有病毒排出,造成环境的严重污染。并用F81成功分离出强毒株FPV-HLJ,序列测定结果表明,FPV-HLJ VP1基因全长2256个核苷酸,编码727个氨基酸,VP2全长1755个核苷酸,编码584个氨基酸,NS1全长2007个核苷酸,编码668个氨基酸,与FPV标准毒株CU-4各个基因片段大小相同。基于FPV基因的系统发生表明,FPV-HLJ与国内分离株XJ-1株关系较近,与标准毒CU-4关系较远,且比CU-4有较好的抗原优势,适合用于疫苗的研制。以FPV-HLJ为种毒制备的灭活苗接种非免疫健康猫,实验组免疫猫FPV HI抗体水平随免疫次数的增加而呈上升趋势,三免后FPV HI抗体效价为1:1024～1:2048,且免疫猫能抵抗FPV强毒攻击,具有100%的存活率。将此疫苗回归本动物,HI和ELISA实验结果表明,免疫后能有效的刺激机体产生针对FPV的免疫效应,三免后HI抗体效价多数能达到1:1024。这为有效地预防该病的发生、以及对圈养大型猫科动物的保护具有重要的理论和实践意义。
|