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中药芪红合剂对人外周血内皮祖细胞数量及功能的影响
作 者: 武丽萍
导 师: 马华
学 校: 山西医科大学
专 业: 中西医结合临床
关键词: 中药芪红合剂 内皮祖细胞 增殖 含药血清 内皮损伤 血管新生
分类号: R285.5
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
目的:观察中药芪红合剂对体外培养的人外周血内皮祖细胞(EPCs)数量和功能的影响。方法:1、中药芪红合剂含药血清的制备将12只雄性Wistar大鼠,随机分成4组:中药芪红合剂组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)、对照组,分别以不同剂量芪红合剂水煎液和等剂量生理盐水灌胃,连续7d后,心脏采血,提取血清,制备成中药芪红合剂含药血清和空白血清。2、人外周血EPCs的培养及鉴定采用密度梯度离心法分离获得人外周血单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,M199培养液培养7d后,收集贴壁细胞。经激光共聚焦显微镜鉴定,FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞被认为是正在分化的EPCs、流式细胞仪检测其表面标志CD34、CD133进一步鉴定为EPCs。3、中药芪红合剂对EPCs数量及功能的影响取培养7天贴壁的EPCs用于研究,随机分为4组:对照组、芪红合剂低剂量干预组、芪红合剂中剂量干预组、芪红合剂高剂量干预组。用含空白血清及低、中、高剂量芪红合剂含药血清的条件培养液分别培养12h、24h、48h后,倒置相差显微镜下观察EPCs生长情况,分别采用细胞计数法、黏附能力测定实验和噻唑蓝(MTT)比色实验和观察EPCs的数量、黏附能力及增殖能力。结果:1、EPCs的培养及鉴定分离的单个核细胞培养4天后,可见细胞集落形成,7天后形成了梭形的内皮样细胞,并可见线状结构。用Dil-acLDL和FITC-UEA-I对细胞染色后,通过激光共聚焦显微镜鉴定,双染色阳性细胞被认为是正在分化的EPCs。流式细胞仪示贴壁细胞表达CD34阳性率(38.36±3.70)%,CD133阳性率为(13.91±1.47)%。2、中药芪红合剂对人外周血EPCs数量及功能的影响结果显示:与对照组比较,低、中剂量芪红合剂显著增加EPCs的数量,且显著改善EPCs黏附、增殖能力,并且其影响呈时间依赖性,低剂量芪红合剂作用后24h开始高于对照组,于72h达到高峰,中剂量芪红合剂作用后48h开始高于对照组,于72h达到高峰,高剂量芪红合剂仅于作用72h后高于对照组(P<0.05)。此外,中药芪红合剂在干预EPCs48 h、72h时,对EPCs数量及黏附、增殖能力的影响呈一定的剂量相关性,低剂量组较中、高剂量组作用显著(P<0.05)。结论:1、中药芪红合剂可以增加人外周血EPCs的数量、可以促进其黏附功能和增殖功能。中药芪红合剂对EPCs的影响呈一定的量效和时效关系,以低剂量芪红合剂作用72h时最为显著。2、中药芪红合剂可以改善EPCs的数量和功能,这可能是其防治血管内皮细胞损伤及内皮功能障碍相关性疾病的作用机制之一。
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全文目录
中文摘要 5-7 英文摘要 7-9 英文缩写词表 9-10 正文 10-23 前言 10-11 材料与方法 11-15 结果 15-17 讨论 17-20 结论 20 参考文献 20-23 附图 23-29 综述 29-36 正文 29-33 参考文献 33-36 个人简介 36-37 致谢 37
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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