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胃癌组织中ZAC与生长抑素及生长抑素受体的表达

作　者: 刘键
导　师: 丁一
学　校: 郑州大学
专　业: 人体解剖学与组织胚胎学
关键词: 胃癌生长抑素生长抑素受体 ZAC
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

胃肠道D细胞可分泌生长抑素(somatostatin,SST),SST是一种循环的小肽,它有两种生物活性形式:14个氨基酸构成的SST-14和28个氨基酸构成的SST-28。SST由较大的前体分子前原SST和原SST水解形成。SST抑制胃肠道一系列的生理功能如胃肠运动、胃酸产生、胰酶分泌和胆汁分泌。SST还抑制胰和肠道激素如胰岛素、胰高血糖素、分泌素和血管活性肠肽的分泌。除在神经传递和分泌的重要调节功能,SST还可调控正常组织和肿瘤的细胞增殖。SST通过与生长抑素受体(somatostatin receptor,SSTR)结合发挥其生理功能。SSTR属于G蛋白耦联受体(G protein-coupled receptor,GPCR),共有5种亚型,分别称为SSTR1、SSTR2、SSTR3、SSTR4和SSTR5。编码5种SSTR亚型的基因分别位于不同的染色体。SSTR2 mRNA通过选择性剪接可产生两种不同的SSTR2:SSTR2A和SSTR2B。SSTR与胃癌发生的关系缺乏系统的研究,仅见单个SSTR亚型与胃癌的研究报道。介导SST抗增殖效应的转录因子和靶基因的研究很少。ZAC(zinc fingerprotein which regulates apoptosis and cell cycle arrest)为一种具有锌指(zinc finger)结构的转录因子,具有DNA结合和转录活化活性,可抑制肿瘤细胞生长,诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞。本研究应用免疫组织化学技术比较观察胃癌组织、癌旁组织和相应的正常胃黏膜组织中SST和ZAC的表达;应用RT-PCR技术比较显示胃癌组织、癌旁组织和相应的正常胃黏膜组织中SSTR亚型的表达谱;分析胃癌组织中SST、SSTR与ZAC的表达的相关性及其与胃癌临床病理学特征的相关性。材料与方法1.材料胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织标本各30例。标本分为2部分,液氮冻存用于RT-PCR,石蜡包埋用于免疫组织化学。2.免疫组织化学采用SABC免疫组织化学方法,按试剂盒(BOSTER公司)说明书操作。ZAC免疫反应信号采用链霉亲和素-过氧化物酶-DAB显示;SST免疫反应信号采用链霉亲和素-过氧化物酶-AEC显示。以PBS替代一抗为阴性对照。苏木素复染胞核。3.RT-PCR SSTR1:上游,AGCCGGTTGACTATTACGCC,下游,GCTCTCACTTCTACCATTGTC;SSTR2:上游,GGTGAAGTCCTCTGGAATCC,下游,CCATTGCCAGTAGACAGAGC;SSTR3:上游,TCATCTGCCTCTGCTACCTG,下游,GAGCCCAAAGAAGGCAGGCT;SSTR4:上游,CGGCAGTCTTCGT GGTCTAC,下游,GCATCAAGGCTGGTCACGAC;SSTR5:上游,AACACGCTGGTCATCTACGTGGT,下游,AGACACTGGTGAACTGGTTGAC。采用一步法进行RT-PCR反应。50℃,30 min;94℃,2 min;94℃,30s;60℃,30s:72℃,30s;10个循环。94℃,30s;55℃,30s;72℃,40s;25个循环。72℃,2 min。1.5%琼脂糖凝胶电泳观察结果。4.统计学处理应用SPSS10.0统计软件对数据进行统计学处理,以P＜0.05为检验水准。结果1.胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织SST阳性表达率分别为36.7%(11/30)、53.3%(16/30)和73.3%(22/30)。胃癌组织中SST的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织(P＜0.05)。2.胃癌组织中5种SSTR亚型均有表达,但其表达频率不同,分别为SSTR1(40.0%,12/30)、SSTR2(73.3%,22/30)、SSTR3(33.3%,10/30)、SSTR4(53.3%,16/30)和SSTR5(56.7%,17/30),以SSTR2的阳性率最高,SSTR3的阳性率最低。3.胃癌组织中SSTR3的阳性表达率明显低于正常胃黏膜组织;而SSTR2和SSTR5的阳性表达率则显著高于正常胃黏膜组织,SSTR1和SSTR4的阳性率无显著性差异。高分化胃癌组织SSTR3的阳性率显著高于低分化胃癌组织。4.胃癌组织、癌旁组织和正常胃黏膜组织均有ZAC的表达,其阳性率分别为33.3%(10/30)、73.3%(22/30)和66.7%(20/30),胃癌组织中ZAC的阳性表达率显著低于正常胃黏膜组织。高中分化胃癌组织中,ZAC的表达明显高于低分化胃癌组织;浸润未侵犯浆膜者明显高于侵犯浆膜者。ZAC的表达与淋巴结转移无明显关系。5.胃癌组织中,ZAC与SST的表达呈明显正相关。高中分化胃癌组织中,ZAC与SST的共表达明显高于低分化胃癌组织,浸润未侵犯浆膜者明显高于侵犯浆膜者;ZAC与SST的共表达与淋巴结转移无明显关系。结论1.胃癌组织中5种SSTR亚型均有表达,SSTR2的阳性率最高,SSTR3的阳性率最低。2.胃癌组织中,ZAC与SST的表达均明显低于正常胃黏膜组织;ZAC与SST的表达呈明显正相关。3.SST可能通过与其受体结合,影响ZAC的表达,调节胃癌细胞的生长和分化。

全文目录

摘要  3-6
Abstract  6-11
论文部分  11-44
  胃癌组织中zAC与生长抑素及生长抑素受体的表达  11-44
    前言  11-14
    材料与方法  14-20
    结果  20-27
    附图  27-30
    讨论  30-37
    参考文献  37-44
综述部分  44-70
  生长抑素受体与肿瘤发生  44-59
  参考文献  59-70
英文缩略词  70-71
在读硕士期间发表的文章  71-72
致谢  72

胃癌组织中ZAC与生长抑素及生长抑素受体的表达

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