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秋水仙素诱导杂交兰四倍体及倍性鉴定

作　者: 尹翠翠
导　师: 王广东
学　校: 南京农业大学
专　业: 园林植物与观赏园艺
关键词: 杂交兰秋水仙素四倍体制片技术
分类号: S682.31
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

兰属(Cymbidium)花卉花型优美,花色艳丽,是一类具有重要观赏价值和经济价值的花卉,在世界各地具有广阔的市场前景。国内外关于兰属花卉种间杂交培育新品种的报道较多,而多倍体育种方面研究相对较少。本研究以兰属杂交兰(大花蕙兰×墨兰)与蕙兰进一步杂交所获得的F1代杂交兰根状茎为材料,以秋水仙素为诱变剂,对杂交兰多倍体诱导和鉴定技术进行了系统的研究,旨在建立杂交兰多倍体诱导和鉴定技术体系。主要研究结果如下：1.以杂交兰根状茎为材料,分别采用浓度为0.02%、0.05%、0.10%、0.20%的秋水仙素对其无菌苗的根状茎浸泡处理24h、48h和72h诱导杂交兰四倍体,试验结果表明,以0.10%的秋水仙素处理48h诱导效果最佳,变异率为36%。变异的根状茎较未处理的根状茎膨大明显,茎段粗壮,变圆分节,着生有绒毛,生长势变缓。2.对秋水仙素诱导获得杂交兰变异材料进行倍性鉴定,成功获得了染色体加倍植株。染色体观察表明,四倍体植株染色体数为2n=4x=80,二倍体对照为2n=2x=40。加倍后的四倍体植株较二倍体植株粗壮,叶片变厚,颜色变深,茎基部粗壮,颜色深,生长势变缓,根系变粗,根状茎增粗,保卫细胞增大,叶绿体数目增多,气孔密度减小等特点,可作为新材料加以利用。3.由于杂交兰生长周期较长,生根需要较长时间,而根状茎较易获得,因此本文以杂交兰根状茎茎尖为材料,比较茎尖的不同采集时间、预处理方法、解离时间和染色方法对杂交兰根状茎茎尖染色体制片的影响。结果表明,取材时间为上午10：00-11：00,预处理方式为8-羟基喹啉处理6-7h,解离采用5mol/L HCl在25℃下30min,染色液以卡宝品红染色液染色15-20min染色体制片效果最佳。

全文目录

摘要 6-7ABSTRACT 7-9缩略词表 9-10前言 10-11第一部分文献综述 11-29 1 兰属植物概况 11 1.1 兰花的观赏性及市场价值 11 1.2 兰属植物的分类学地位 11 2 兰花育种研究进展 11-14 2.1 引种驯化育种 11-12 2.2 杂交育种 12 2.3 多倍体育种 12-13 2.4 生物技术育种 13-14 3 观赏植物多倍体育种研究进展 14-18 3.1 多倍体产生途径 14-15 3.2 诱导材料的种类 15-16 3.3 诱导方式 16-17 3.4 离体培养材料的倍性鉴定 17-18 4 植物多倍体育种中存在的问题及应用前景 18-19 5 染色体制片技术研究进展 19-23 参考文献 23-29第二部分试验研究 29-53 第一章秋水仙素诱导杂交兰四倍体 29-37 1 材料与方法 29-30 1.1 试验材料 29-30 1.2 试验方法 30 2 结果与分析 30-33 2.1 离体培养条件下秋水仙素对杂交兰根状茎的诱导效果 30-32 2.2 杂交兰多倍体植株初步鉴定 32-33 3 讨论 33-34 3.1 诱导材料的选择 33 3.2 诱导多倍体的方法 33-34 4 结论 34 参考文献 34-37 第二章杂交兰四倍体鉴定及形态特征分析 37-45 1 材料与方法 37-38 1.1 试验材料 37 1.2 试验方法 37-38 2 结果与分析 38-42 2.1 诱变杂交兰植株染色体数目鉴定 38-39 2.2 多倍体植株的表型鉴定 39-40 2.3 四倍体杂交兰的气孔特征 40-42 2.4 叶绿素含量测定结果 42 3 讨论 42-43 3.1 加倍植株鉴定的方法 42 3.2 嵌合体的分离 42-43 3.3 杂交兰多倍体育种发展前景 43 4 结论 43 参考文献 43-45 第三章杂交兰根状茎染色体鉴定方法研究 45-53 1 材料和方法 45-46 1.1 试验材料 45 1.2 方法与步骤 45-46 2 结果与分析 46-50 2.1 不同取材时间对制片效果的影响 46-47 2.2 预处理条件对制片效果的影响 47-48 2.3 解离时间对制片的影响 48 2.4 卡宝品红处理时间对制片的影响 48-50 3 讨论 50-51 4 结论 51 参考文献 51-53全文结论 53-55论文发表情况 55-57致谢 57

秋水仙素诱导杂交兰四倍体及倍性鉴定

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