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玉米—摩擦禾—四倍体多年生类玉米三元杂种及玉米—摩擦禾附加系遗传分析
作 者: 李志龙
导 师: 唐祈林
学 校: 四川农业大学
专 业: 作物遗传育种
关键词: 玉米 四倍体多年生类玉米 摩擦禾 玉米-摩擦禾附加系 原位杂交
分类号: S513
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
本研究以四倍体玉米、四倍体指状摩擦禾、四倍体多年生类玉米以及三物种杂交创制的三元杂种(MTF-1)为材料,进行了45S rDNA序列和5S rDNA序列在供试材料染色体上的位点分布研究;同时对一个玉米-摩擦禾附加系进行遗传鉴定,试验取得的主要结果如下:四倍体玉米(2n=40)、四倍体指状摩擦禾(2n=72)、四倍体多年生类玉米(2n=40)的5S rDNA序列和45S rDNA序列FISH核型分析表明,四倍体玉米染色体各有2对5S rDNA和45S rDNA位点,5S rDNA位于第2号染色体的长臂近末端,45S rDNA位于第6号染色体上的次缢痕区;四倍体多年生类玉米染色体各有2对5S rDNA和45S rDNA位点,5S rDNA位于第4、6号染色体长臂近末端,45S rDNA位于第11、13号染色体次缢痕区;四倍体摩擦禾染色体各有2对5S rDNA和45S rDNA位点,5S rDNA位于第6、12号染色体的短臂近着丝粒处,45S rDNA位于第16、32号染色体短臂次缢痕区和随体上。三元杂种MTF-1染色体5S rDNA和45S rDNA FISH核型分析表明,三元杂种染色体组存在3对45S rDNA位点和3对5S rDNA位点,染色体数目为76条,为异源六倍体,进一步推断得出三元杂种是由玉米-摩擦禾杂种F1(2n=20Mz+36Tr)未减数雌配子(n=56)与四倍体多年生类玉米正常雄配子(n=20)结合发育而成。玉米-摩擦禾附加系细胞学分析表明,附加系根尖细胞染色体数目为21,除正常配对的10对染色体外,存在1条长度短于第10号染色体且表现为近端部着丝粒的染色体(sm)。单色、双色基因组原位杂交(GISH)结果表明,该附加系为玉米-摩擦禾异源单体附加系,玉米与摩擦禾染色体之间存在片段易位。田间性状调查表明,该附加系(2n=21)形似玉米,但株高低于对应的二倍体(2n=20)。花粉母细胞分析表明,该附加系(2n=21)减数分裂终变期染色体构型主要有10IⅡ+1Ⅰ和9Ⅱ+1Ⅲ两种,染色体平均构型为0.57Ⅰ+9.58Ⅱ+0.43Ⅲ,在分裂后期常出现异常染色体、落后染色体和染色体桥等现象。花粉育性检测表明,该附加系花粉粒的可染率仅为4%,而相应的倍体植株花粉粒可染率高达98%。用普通植株授粉附加系,结实率与对应的2n=20植株无异。附加系中外缘摩擦禾染色体传递率分析结果表明,传递率最高为55.7%,最低为42.0%,平均传递率为46.44%。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-9 1 前言 9-24 1.1 玉米种质资源创新改良 9-10 1.1.1 玉米近缘野生材料的利用 9-10 1.2 玉米及其野生近缘植物 10-12 1.2.1 玉蜀黍属(Genus Zea) 10-11 1.2.2 摩擦禾属(Tripsacum L.) 11-12 1.3 远缘杂交在作物遗传育种中的重要作用 12-13 1.4 玉米与摩擦禾杂交的研究 13-18 1.4.1 利用远缘杂交将摩擦禾基因导入玉米的途径 14-16 1.4.2 向玉米导入摩擦禾无融合生殖基因研究 16-17 1.4.3 摩擦禾染色体导入玉米创制桥梁材料 17-18 1.5 远缘杂交外缘物质的鉴定与遗传研究 18-24 1.5.1 形态学标记 19 1.5.2 细胞学标记 19-20 1.5.3 生化标记 20 1.5.4 分子生物学标记 20 1.5.5 分子细胞遗传学标记——原位杂交技术 20-22 1.5.6 外缘染色体的传递特点 22-24 2 研究目的与意义 24-25 3 材料与方法 25-33 3.1 材料 25 3.2 方法 25-33 3.2.1 形态学调查 25 3.2.2 细胞学观察 25-29 3.2.3 荧光原位杂交 29-32 3.2.4 荧光原位杂交核型分析 32-33 4. 结果与分析 33-46 4.1 四倍体玉米、四倍体多年生类玉米、四倍体摩擦禾及三元杂种FISH分析 33-39 4.1.1 四倍体玉米、四倍体多年生类玉米、四倍体摩擦禾FISH分析 33-36 4.1.2 FISH核型分析三元杂种染色体遗传组成 36-38 4.1.3 不同材料FISH杂交信号及DAPI显带比较分析 38-39 4.2 玉米-摩擦禾附加系遗传分析 39-46 4.2.1 细胞学分析 39-40 4.2.2 基因组原位杂交 40-42 4.2.3 形态学分析 42-43 4.2.4 花粉母细胞减数分裂观察及花粉育性 43-45 4.2.5 摩擦禾染色体传递率 45-46 5. 讨论 46-51 5.1 三元杂种的研究利用价值 46 5.2 核糖体rDNA的研究意义 46-47 5.3 玉米-摩擦禾异源单体附加系的遗传鉴定 47-48 5.4 玉米-摩擦禾异源单体附加系的利用价值探讨 48-49 5.4.1 玉米-摩擦禾易位系的获得与利用 48-49 5.4.2 外缘染色体传递规律研究 49 5.5 荧光原位杂交的应用 49-51 参考文献 51-57 附录 57-60 致谢 60
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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 玉米(玉蜀黍)
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