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草莓小孢子培养与离体诱导染色体加倍研究

作　者: 王萌
导　师: 乔玉山；章镇
学　校: 南京农业大学
专　业: 果树学
关键词: 草莓小孢子培养秋水仙素染色体加倍
分类号: S668.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

草莓属于蔷薇科(Rosaceae)草莓属(Fragaria)多年生草本植物,是一种重要的浆果类果树,在世界范围内广泛种植,具有较高的食用价值和经济价值。本研究通过草莓游离小孢子培养方法得到了单倍体,初步对培养诱导体系进行探讨,同时对栽培草莓离体诱导染色体加倍的方法做了探讨,利用秋水仙素诱导离体叶片与秋水仙素诱导茎尖生长点两种方法得到了染色体加倍株系,为草莓倍性育种奠定了基础。以6个栽培草莓品种为实验材料,研究了草莓小孢子细胞学发育时期与花器形态相关性,明确了小孢子具有胚发生能力的花器形态。通过对小孢子不同发育时期的观察发现小孢子发育时期与花蕾直径长度密切相关,同时也与萼片长度、花瓣颜色有一定的相关性。花蕾直径处于0.50-0.90cm时小孢子处于单核靠边期的比例较高,不同品种略有差异。在野生草莓游离小孢子培养研究中,以东北草莓(F. mandschurica Staudt)和绿色草莓(F. viridis Duch.)为试验材料,研究了影响小孢子培养的相关因素,首次对草莓小孢子培养体系进行了探索。在东北草莓上获得了1个小孢子发育而来的胚状体,不同基因型之间成胚率有显著差异。培养基中添加0.25%椰汁或1.0 mg/L的2,4-D能促进野生草莓小孢子胚状体的发育,添加NAA、6-BA没有效果；低温处理对小孢子胚状体的发育起到积极作用,适宜的处理时间为1天；小孢子培养基中添加0.1g/L活性炭能促进胚状体的发育,减轻培养过程中的褐化。以‘雪蜜’和‘红颊’草莓为试材,分别采用秋水仙素诱导茎尖生长点与秋水仙素诱导离体叶片两种方法探讨了栽培草莓染色体加倍的技术方法,获得染色体数目变异植株,包括9×、10×、11×、12×、14×、16×,并对‘雪蜜’加倍植株的田间表现进行了观察。试验结果表明诱导茎尖生长点的方法中利用0.2%秋水仙素离体处理草莓生长点20min效果最好,成活率为70.3%,变异率为83.3%,得到了9x-16×的加倍株系；诱导离体叶片方法中0.3%秋水仙素处理4d效果最佳,草莓叶片的再生率为40.5%,变异率100%,该处理诱导产生了16×的株系。

全文目录

摘要 6-7ABSTRACT 7-9缩略语 9-10前言 10-11第一章文献综述 11-25 1 游离小孢子培养研究进展 11-20 1.1 草莓 11-12 1.2 小孢子培养的意义 12-13 1.3 小孢子培养的研究概况 13-14 1.4 影响游离小孢子培养胚发生的因素 14-18 1.5 胚状体发育及植株再生 18-20 1.6 游离小孢子培养存在的问题 20 2 多倍体的诱导 20-22 2.1 物理方法诱导 21 2.2 化学方法诱导 21-22 2.3 其他诱导方法 22 3 再生植株的倍性鉴定 22-25 3.1 直接鉴定法 22-23 3.2 间接鉴定法 23-25第二章草莓小孢子细胞学发育时期与花器形态相关性研究 25-35 1 材料与方法 25-26 1.1 材料 25-26 1.2 方法 26 2 结果与分析 26-33 2.1 小孢子发育的细胞学特征 26-27 2.2 小孢子细胞学发育时期的花蕾形态 27-28 2.3 小孢子细胞学发育时期的花蕾直径 28-29 2.4 小孢子细胞学发育时期的萼片特征 29-30 2.5 小孢子细胞学发育时期的花瓣特征 30 2.6 小孢子细胞学发育时期的花药特征 30-31 2.7 同一花序不同序位花蕾发育时期的不同步性 31 2.8 其他5个品种小孢子细胞学发育时期的花蕾直径 31-33 3 讨论 33-35第三章东北草莓和绿色草莓游离小孢子培养的初步研究 35-41 1 试验材料与方法 36-37 1.1 试验材料 36 1.2 试验设备 36 1.3 试验方法 36-37 2 结果与分析 37-39 2.1 蔗糖浓度对小孢子离体发育的影响 37-38 2.2 激素配比对小孢子离体发育的影响 38 2.3 有机添加物对胚诱导率的影响 38 2.4 活性炭对小孢子离体发育的影响 38 2.5 低温预处理对小孢子离体发育的影响 38 2.6 振荡培养对小孢子离体发育的影响 38-39 2.7 不同种胚诱导率的差异 39 3 讨论 39-41第四章栽培草莓离体诱导染色体数目变异的研究 41-51 1 材料与方法 41-43 1.1 材料 41-42 1.2 方法 42 1.3 倍性鉴定 42-43 1.4 加倍株系‘雪蜜’田间性状观察 43 2 结果与分析 43-48 2.1 秋水仙素对‘红颊’草莓茎尖的成活率及染色体变异的影响 43-44 2.2 秋水仙素对‘雪蜜’离体叶片再生以及染色体加倍的影响 44-45 2.3 倍性分析 45-47 2.4 ‘雪蜜’染色体变异株系田间性状观察 47-48 3 讨论 48-51全文结论 51-53附录 53-55参考文献 55-61致谢 61

草莓小孢子培养与离体诱导染色体加倍研究

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