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细胞因子在应激所致抑郁中的病理作用研究

作　者: 骆春梅
导　师: 游自立
学　校: 电子科技大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 抑郁促炎症细胞因子抗炎症细胞因子慢性温和应激神经生成
分类号: R749.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

大量的研究报道了促炎症细胞因子和抑郁之间的联系,然而,对于炎症如何影响情绪的机理我们仍然知之甚少。在本文的研究中,我们通过慢性不可预见的温和刺激建立动物的抑郁模型,在四周的慢性温和应激过程中,动物表现出一系列抑郁样的行为,包括对糖水偏爱的降低,自主活动的减少,体重增加速度的减缓。运用实时定量PCR来分析促炎症细胞因子(IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-18)和抗炎症细胞因子(TGF-β,IL-10,IL-4)在海马,皮层,下丘脑和脾脏的表达变化。结果表明了促炎症细胞因子IL-1β, TNF-α和IL-6在模型组的表达显著高于对照组,而抗炎症细胞因子TGF-β和IL-10在模型组的表达则明显的低于对照组,另外TNF-α/IL-10和IL-6/IL-10的比率也是在模型组显著高于对照组。同时脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA在模型组动物海马和下丘脑的表达也显著的低于对照组。免疫荧光的结果显示在模型组动物海马的齿状回中BrdU阳性细胞的数目明显的少于对照组。这些数据表明了促炎症细胞因子和抗炎症细胞因子表达的失衡对于由慢性温和应激所致的抑郁中扮演着关键的角色,其中一条可能的途径是影响了神经生成。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-9
第一章绪论  9-16
  1.1 研究背景和意义  9-11
    1.1.1 抑郁与炎症  9-10
    1.1.2 细胞因子在中枢神经系统的表达  10-11
    1.1.3 抑郁的动物模型  11
  1.2 国内外的研究现状  11-14
  1.3 本课题的研究内容  14-15
  1.4 本课题所采用的技术路线  15-16
第二章抑郁动物模型的建立  16-23
  2.1 前言  16
  2.2 实验材料  16-17
    2.2.1 实验动物  16-17
    2.2.2 主要实验仪器  17
  2.3 实验操作  17-18
    2.3.1 确定糖水摄入的基线  17
    2.3.2 慢性温和应激程序  17
    2.3.3 糖水偏爱实验  17-18
    2.3.4 自主活动及体重测定  18
  2.4 实验结果  18-21
    2.4.1 在4 周的慢性温和应激期间动物对糖水偏爱的变化  18-20
    2.4.2 在4 周的慢性温和应激期间动物自主活动的变化  20-21
    2.4.3 在4 周的慢性温和应激期间动物体重的变化  21
  2.5 讨论  21-23
第三章细胞因子的检测  23-39
  3.1 前言  23
  3.2 实验材料  23-24
    3.2.1 动物组织  23
    3.2.2 主要实验仪器和设备  23-24
    3.2.3 实验试剂  24
  3.3 实验操作  24-28
    3.3.1 实验准备  24
    3.3.2 引物设计  24-26
    3.3.3 总RNA 的提取  26
    3.3.4 反转录合成cDNA 模板  26
    3.3.5 qPCR 检测细胞因子在各个脑区及脾脏的表达  26-28
  3.4 实验结果  28-37
    3.4.1 RNA 的质量  28-29
    3.4.2 溶解曲线  29-30
    3.4.3 标准曲线  30-34
    3.4.4 定量检测结果  34-37
  3.5 讨论  37-39
第四章海马神经元增殖的检测  39-47
  4.1 前言  39
  4.2 实验材料  39-40
    4.2.1 主要实验仪器和设备  39
    4.2.2 实验试剂  39
    4.2.3 试剂配制  39-40
  4.3 实验方法与操作  40-43
    4.3.1 灌注与取材  40
    4.3.2 组织包埋与切片  40-41
      4.3.2.1 脱水  40-41
      4.3.2.2 透明  41
      4.3.2.3 浸蜡  41
      4.3.2.4 切片  41
      4.3.2.5 捞组织  41
    4.3.3 HE 染色  41
    4.3.4 免疫荧光组织化学  41-43
    4.3.5 数据分析  43
  4.4 实验结果  43-45
  4.5 讨论  45-47
第五章总结  47-50
致谢  50-51
参考文献  51-56
攻硕期间取得的研究成果  56-57

细胞因子在应激所致抑郁中的病理作用研究

内容摘要

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