学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

超声微泡造影剂联合脂质体介导pNogo-R shRNA转染神经干细胞的体外实验研究

作　者: 叶维霞
导　师: 曹友德
学　校: 重庆医科大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 超声微泡造影剂 NSCs 基因转染超声微泡造影剂脂质体 Nogo-R
分类号: R363
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 18次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨超声微泡介导pGPU6/Neo质粒转染大鼠NSCs的最优参数。方法:以一定能量的超声介导质粒转染大鼠NSCs,分为:空白组、pGPU6/Neo质粒组、pGPU6/Neo质粒+微泡组、pGPU6/Neo质粒+超声组、pGPU6/Neo质粒+微泡+超声组,并按不同转染条件分为亚组。转染48 h后荧光显微镜观察转染效率,台盼蓝染色法检测细胞活性。结果:最优参数为声强1.0 W/cm~2,辐照时间30 s时,超声微泡介导质粒转染率最高,且对细胞活性无明显影响。超声微泡介导质粒对NSCs的转染效率,明显高于其他实验组(P<0.05)。结论:在超声声强为1.0 W/cm~2,辐照时间30 s的条件下,超声微泡造影剂能够安全、有效地介导基因转染NSCs。目的:探讨超声微泡介导pNogo-R shRNA转染大鼠NSCs的有效率及可行性,同时评估UMMD联合脂质体提高基因转染效率的协同作用。方法:NSCs自清洁级SD新生大鼠分离获得,以不同的方式转染培养至第三代的NSCs,分为:A.空白组、B.阴性质粒+超声微泡组、C. pNogo-R shRNA质粒+超声微泡组、D. pNogo-R shRNA质粒+脂质体组、E. pNogo-R shRNA质粒+超声微泡+脂质体组。结果:荧光显微镜观测结果显示,E组转染效率明显高于其他实验组,而C组与D组间无显著差异;同时,台盼蓝染色法显示,与其他组相比较,超声微泡联合脂质体组对细胞活性影响无显著差异;转染24小时后,E组Nogo-R的蛋白及mRNA表达水平明显低于其他组别(P<0.05),差异具有统计学意义。结论:本研究结果表明,超声微泡联合脂质体的基因转染为一非侵袭性转染方法,对细胞活性影响小,具有一定可行性。超声微泡和脂质体的联合作用能增强pNogo-R shRNA质粒转染NSCs,这种联合转染方式为NSCs转基因治疗提供了一种新方法。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
摘要  6-8
ABSTRACT  8-11
前言  11-13
第一部分:超声微泡介导 pGPU6/Neo 质粒转染神经干细胞参数优化的实验研究  13-23
  1 材料和方法  13-19
  2 结果  19-21
  3 讨论  21-22
  4 本部分小结  22-23
第二部分：超声微泡造影剂联合脂质体介导pNogo-R shRNA 转染神经干细胞的实验研究  23-37
  1 材料和方法  23-34
  2 结果  34-35
  3 讨论  35-36
  4 本部分小结  36-37
全文总结  37-38
附图  38-43
参考文献  43-46
文献综述  46-52
  参考文献  49-52
致谢  52-53
硕士期间发表的文章  53

超声微泡造影剂联合脂质体介导pNogo-R shRNA转染神经干细胞的体外实验研究

内容摘要

全文目录

相似论文