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花烛属亲缘关系分析与细菌性枯萎病的检测

作　者: 孟鹤
导　师: 刘春
学　校: 中国农业科学院
专　业: 观赏园艺
关键词: 花烛属形态学特征 SRAP标记 DNA指纹图谱细菌性枯萎病
分类号: S682.14
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 24次
引　用: 1次
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内容摘要

花烛属植物(Anthurium)是天南星科重要的观赏植物,品种的鉴别、亲本的选择、优良杂交组合选配对于花烛属植物新品种的选育起着至关重要的作用。本研究从田间形态学和SRAP分子标记技术两个方面对花烛属88个品种进行了亲缘关系的分析,并筛选出2对多态性较高的SRAP引物,构建现有花烛属88个品种的指纹图谱。另外,根据基因库中已发表的花烛属细菌性枯萎病致病菌粉黛单黄胞杆菌基因序列设计引物,通过对扩增条件进行优化,建立了花烛属细菌性枯萎病的Nested-PCR检测方法,利用该方法对组培苗和成品植株进行检测,对于今后筛选亲本、进行抗病性育种的工作具有深远意义。主要结果如下:1.对花烛属88个品种的54个形态学性状进行鉴定和分析,其平均变异系数0.36,佛焰苞复色方式的变异系数最高,为1.50,花瓣异化的变异系数最小,为0.05。基于形态数据的聚类分析,花烛属88个品种被分为7大类群。2.利用21对SRAP引物对花烛属88个品种进行扩增,共扩增293条多态性条带,平均多态带百分率为99%,平均多态性条带为13.95。3.本研究选择2对扩增谱带稳定性好、分辨率高的引物,把88个品种区别开来,构建了供试花烛属88个品种SRAP指纹图谱。2对引物共获得31个等位位点,记录了2728个条带。4.基于SRAP分析的聚类结果显示,本试验供试花烛属品种遗传距离为0.08-0.82,各供试材料在聚类分析图中的位置与佛焰苞颜色、佛焰苞大小和植株高度相关,88份材料被分为3个类群,同一公司培育的品种基本上聚在一类。5.试验所用Nested-PCR方法可以直接从感染细菌性枯萎病的花烛属组织DNA中扩增出1条343 bp的特异性条带,该条带与GenBank登录的Xanthomonas.campestris pv.dieffenbachiae序列X70380.1同源性在99%以上。在整个植株中都检测到了X.campestris pv.dieffenbachiae的特异性条带,其中老叶的叶柄DNA扩增强度最高,根茎连接处、老叶、嫩叶柄、嫩叶、佛焰苞柄扩增强度次之,在根、佛焰苞和花序中扩增最弱。

全文目录

摘要  6-7
Abstract  7-10
英文缩略表  10-11
第一章引言  11-23
  1.1 花烛属概述  11-14
    1.1.1 生物学特性  11
    1.1.2 生长环境及地理分布  11
    1.1.3 主要品种  11-12
    1.1.4 花烛属栽培繁殖和育种方面的研究进展  12-14
  1.2 观赏植物亲缘关系的研究  14-20
    1.2.1 观赏植物亲缘关系研究的概念和意义  14-15
    1.2.2 观赏植物亲缘关系研究中的方法与应用  15-20
  1.3 花烛属细菌性枯萎病的研究  20-21
    1.3.1 致病菌生物学研究  20-21
    1.3.2 细菌性枯萎病对花烛属植物的危害  21
    1.3.3 花烛属细菌性枯萎病检测的研究进展  21
  1.4 本论文的研究目的意义、研究内容及拟解决的关键问题  21-23
第二章花烛属若干品种形态学多样性研究  23-37
  2.1 材料和方法  23-27
    2.1.1 试验材料  23-26
    2.1.2 试验方法  26-27
  2.2 结果和分析  27-34
    2.2.1 花烛属部分品种形态学性状的统计分析  27-30
    2.2.2 基于形态学数据的聚类分析  30-34
  2.3 讨论  34-37
    2.3.1 花烛属种质亲缘关系分析  34-35
    2.3.2 形态学标记的效率性分析  35-37
第三章花烛属若干品种亲缘关系SRAP 分析与指纹图谱构建  37-54
  3.1 材料和方法  37-40
    3.1.1 材料  37
    3.1.2 方法  37-40
  3.2 结果与分析  40-51
    3.2.1 DNA 检测  40-41
    3.2.2 多态性SRAP 引物的筛选  41-43
    3.2.3 SRAP 扩增产物多态性分析  43-45
    3.2.4 聚类分析  45-49
    3.2.5 指纹图谱的构建  49-51
  3.3 讨论  51-54
    3.3.1 SRAP 的多态性  51
    3.3.2 SRAP 标记与花烛属指纹图谱的构建  51-52
    3.3.3 分子标记技术对花烛属种质亲缘关系分析  52
    3.3.4 形态学鉴定与SRAP 聚类结果的比较  52-54
第四章花烛属细菌性枯萎病的NESTED-PCR 检测  54-61
  4.1 材料与方法  54-56
    4.1.1 试验材料  54
    4.1.2 试验方法  54-56
  4.2 结果与分析  56-59
    4.2.1 Nested-PCR 的特异性  56-57
    4.2.2 对Nested-PCR 产物克隆测序结果  57
    4.2.3 Nested-PCR 体系对不同取样部位的X.campestris pv.dieffenbachiae 检测  57-58
    4.2.4 Nested-PCR 检测花烛属组培苗  58-59
  4.3 讨论  59-61
第五章全文结论  61-62
参考文献  62-69
致谢  69-70
作者简历  70

花烛属亲缘关系分析与细菌性枯萎病的检测

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