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ERAD相关因子在糖尿病鼠视网膜中的表达变化

作　者: 闫淑
导　师: 孙旭芳
学　校: 华中科技大学
专　业: 眼科
关键词: 内质网相关降解糖尿病视网膜病变 Herp 糖尿病鼠
分类号: R774.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的:内质网相关降解(ER-associated degradation, ERAD)是内质网中重要的蛋白质质量监控系统,能够降解错误折叠的蛋白,避免细胞发生内质网应激,内质网应激与糖尿病视网膜病变的发生、发展有密切关系。本研究通过建立SD大鼠糖尿病模型,检测ERAD作用途径相关因子在糖尿病鼠视网膜中的表达变化,从而探讨ERAD相关因子在糖尿病视网膜病变的早期阶段的发生和发展中可能存在的作用。方法:用大剂量链链脲佐菌素(Streptozotocin ,STZ)一次性腹腔注射造成糖尿病SD大鼠模型,以同龄SD大鼠腹腔注射等量的柠檬酸钠缓冲液为对照组。自行设计实时定量PCR芯片检测内质网应激相关因子在一月糖尿病鼠视网膜中的表达变化,Western blot、免疫组化检测一月糖尿病鼠视网膜中ERAD相关因子Herp蛋白的表达变化。体外培养人视网膜微血管内皮细胞,高糖干预后,免疫荧光检测Herp蛋白的表达变化。结果:实时定量PCR芯片结果显示:一月糖尿病鼠视网膜中有13个内质网应激相关因子的mRNA水平明显下调(P<0.05),涵盖内质网应激中了8个作用途径,其中ERAD相关因子Herp, NUC, Os9, ADO15的表达明显下调(P<0.05)。Western blot与免疫荧光提示,Herp蛋白在一月糖尿病模型鼠视网膜中的表达明显下调(P<0.05);体外培养人视网膜微血管内皮细胞在高糖干预后,免疫荧光显示Herp在蛋白水平的表达明显下调(P<0.05)。结论:内质网应激与糖尿病视网膜病变的发生与发展有密切的关系, ERAD作用途径参与了糖尿病视网膜病变的发生和发展,Herp在该过程中发挥了重要的的作用。

全文目录

英文缩略词表  5-6
中文摘要  6-7
英文摘要  7-9
引言  9-12
  参考文献  11-12
第一部分内质网应激相关因子在糖尿病鼠视网膜中的表达变化  12-24
  材料与方法  13-20
  结果  20-21
  讨论  21-22
  小结  22-23
  参考文献  23-24
第二部分 Herp在糖尿病鼠视网膜中的表达变化  24-38
  材料与方法  26-33
  结果  33-34
  讨论  34-35
  小结  35-36
  参考文献  36-38
总结  38-39
附图  39-42
综述  42-54
  参考文献  49-54
致谢  54-55
攻读学位期间发表的学术论文与参加的学术会议  55

ERAD相关因子在糖尿病鼠视网膜中的表达变化

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