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黄芪含药血清对H_2O_2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响

作　者: 张继江
导　师: 周亚滨
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 黄芪不稳定心绞痛内皮细胞增殖率 MTT
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的：本研究通过拆方观察养心汤方中单味中药黄芪不同浓度含药血清对H₂O₂诱导HUVEC（人脐静脉内皮细胞）氧化损伤模型细胞增殖的影响及对损伤HUVEC的保护作用，以进一步研究养心汤对冠心病不稳定型心绞痛的确切作用机制，为中药新药的进一步研发提供客观依据。方法：20只Wistar大鼠随机分为2组，分别为黄芪组和空白组。制备黄芪药液浓度为1.O3g/ml（给药剂量＝临床常用量×动物等效面积系数×5），空白组给予等剂量生理盐水灌胃每日给药2次，早晚各一次，连续给药1周，于末次给药后1h心脏取血离心备用。将冻存HUVEC复苏后,对HUVEC培养、传代。将HUVEC与单味黄芪含药血清不同剂量浓度（2%、4%、6%）一起培养。实验分为5组：空白血清组:在空白血清培养液中连续培养26h；模型对照组组：在基础培养液中连续培养24h后，加入100μmol·L - 1H₂O₂作用2h；（H₂O₂的浓度及作用时间均为预实验结果）；黄芪含药血清2%组：在基础培养液中加入2%黄芪含药血清培养24h后加入H₂O₂作用2h；黄芪含药血清4%组：在基础培养液中加入4%黄芪含药血清培养24h后加入H₂O₂作用2h；黄芪含药血清6%组：在基础培养液中加入6%黄芪含药血清培养24h后加入H₂O₂作用2h；通过MTT法及形态学方法观察不同浓度黄芪含药血清对H 2 O 2损伤HUVEC生长活性变化。结果:黄芪含药血清2%、4%、6%各组细胞OD值均较H₂O₂模型对照组明显升高，与H₂O₂模型组相比较均有统计学意义（p <0.01）。4%浓度组较为明显，而在6%时最为显著。且2%、4%、6%组间比差异有统计学意义（p<0.05）。形态学：2%组：胞体积变小，间隙明显变大，彼此之间联系较少，细胞脱落明显，细胞变形、皱缩的程度有所改善；4%组：细胞体积变小，间隙变大，但彼此之间存在联系，部分细胞脱落；皱缩的程度改善最为明显；6%组：细胞体积变小，间隙变大，但彼此之间存在联系，脱落细胞较少；皱缩的程度明显改善；结论：1黄芪含药血清可以促进H 2 O 2损伤人脐静脉内皮细胞的增殖，增强HUVEC抵制氧化损伤能力，逆转和改善内皮功能障碍，具有一定剂量依赖关系。2对于预防HUVEC氧化损伤具有明显的促进作用，这可能是其防治冠心病不稳定型心绞痛的作用机制之一。

全文目录

缩略语表  4-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-11
文献综述  11-32
  1. 祖国医学对不稳定型心绞痛的认识及研究进展  11-17
    1.1 正气亏虚为胸痹心痛发病之本  11-12
    1.2 瘀血痰浊为胸痹心痛发病之标  12-16
    1.3 痰瘀同病与胸痹心痛的关系  16-17
  2. 现代医学对不稳定型心绞痛的认识及研究进展  17-29
    2.1 不稳定型心绞痛的病因和发病机制  17-27
    2.2 内皮功能障碍与不稳定型心绞痛关系  27-29
    2.3 现代医学预防及治疗不稳定型心绞痛的研究进展  29
  3 人脐静脉内皮细胞培养传代的研究现状  29-30
    3.1 目前常用培养液  30
    3.2 接种密度和传代  30
  4 中药血清药理学在制备含药血清中的优势  30
  5 黄芪的现代药理研究  30-32
实验研究  32-46
  材料与方法  32-37
  结果  37-40
  讨论  40-45
  结论  45-46
致谢  46-47
参考文献  47-53
附图  53-54
工作、硕士学位期间发表的论文  54-55
个人简历  55

黄芪含药血清对H_2O_2诱导人脐静脉内皮细胞氧化损伤模型细胞活性的影响

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