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枯草芽孢杆菌的抗逆特性及其对仔猪生化指标和氨气排放的影响

作　者: 杨锋
导　师: 章亭洲
学　校: 浙江工商大学
专　业: 环境工程
关键词: 枯草芽孢杆菌抗逆特性仔猪生化指标猪舍氨气
分类号: S828.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

在养猪业中,仔猪在断奶过程中由于应激、饲料和环境条件的突然改变等原因,容易出现体差、腹泻、生长发育停滞等现象,严重者甚至导致死亡。长期以来,人们使用抗生素和抗菌类药物来解决这一问题。然而抗生素的大量使用,给人类健康带来了严重危害。抗生素的残留和耐药性等问题日益引起人们的重视。欧盟已于2006开始全面禁止抗生素作为饲料添加剂。同时,养猪过程中产生的大量氨气不仅严重影响了猪的生长发育,也使猪场附近居民受到危害。空气中的氨气污染是酸雨形成的重要原因之一,而畜禽生产已经成为全球最大的氨气污染来源。益生菌作为一种无毒、无残留、无抗药性的饲料添加剂,成为抗生素有效的替代产品之一。芽孢杆菌由于其抗逆性强、易贮存等优良特性,且具有调节肠道菌群平衡、增强动物免疫力、提高生长性能、降低排泄物氨气散发量等诸多功能,被认为是最理想的益生菌。枯草芽孢杆菌是我国农业部公布的16中饲料级微生物之一。本试验从新产品开发的角度出发,研究了一株枯草芽孢杆菌的抗逆特性,并通过固液联合发酵工艺制备出枯草芽孢杆菌制剂,研究了枯草芽孢杆菌对仔猪生化指标和氨气散发的影响。主要研究结论如下：(1)枯草芽孢杆菌抗逆特性试验表明：①在90℃水浴中处理10min后其存活率接近80%。②在pH值为2的人工胃液中处理6h后存活率超过83%,在初始pH值为4.0的培养基中生长旺盛。③在0.3%猪胆盐溶液中处理4h后存活率均超过90%,在含0.3%猪胆盐培养基中其生长受到抑制,但仍可以增殖。④药敏试验结果表明,枯草芽孢杆菌对试验所用大部分抗生素均表现为高敏,对林可霉素低敏。以上结果表明,从饲料应用角度看,枯草芽孢杆菌是一种具有良好抗逆性的益生菌。(2)枯草芽孢杆菌制剂的制备试验表明：①枯草芽孢杆菌进行液体发酵的最佳培养基为YPD培养基,进行固体发酵的最佳底物为麸皮。②采用液固联合发酵生产枯草芽孢杆菌制剂的工艺为：将种子培养液按5%集中到YPD培养基,摇床培养30h后按10%的量接种至麸皮进行固体发酵30h,再经干燥、粉碎处理后即获得成品。获得的产品性能为：有效活菌数>1.0×1010cfu/g,芽孢率>98%,水分<12%。(3)仔猪日粮中加入0.1%、0.3%和0.5%的枯草芽孢杆菌制剂,考察其对仔猪生化指标和氨气散发的影响,结果表明：①添加0.3%和0.5%制剂可使仔猪增重显著提高(P<0.05),分别比对照组高出了33.7%和36.8%,仔猪头均耗料显著增加(P<0.05)。添加0.3%和0.5%制剂可使仔猪每增加lkg活重比分别少消耗0.38kg和0.37kg饲料。仔猪腹泻率分别比对照组降低6.4%、14.2%和15.6%。②添加0.3%和0.5%制剂可使仔猪血清中IgA含量显著增加(P<0.05),IgG含量极显著增加(P<0.01),IgM含量有一定的提高,但无显著差异(P>0.05)。③添加0.3%和0.5%制剂使猪尿液中总氮、氨氮显著降低(P<0.05),试验组的粪中总氮与对照组相比略有增加,而氨氮略有降低,但均没有显著差异(P>0.05)。④添加制剂使粪便脲酶活性降低,且差异显著(P<0.05),随着添加量的增加其粪便脲酶活性呈梯度降低,但差异不显著(P>0.05)。⑤第36d时,添加0.1%、0.3%和0.5%制剂可使猪舍氨气浓度分别降低34.1%、48.6%和50.3%。⑥猪粪pH值随着枯草芽孢杆菌制剂添加量的增加而降低。当添加量为0.5%时,猪粪pH值由7.56降为7.03。⑦粪尿混合物发酵试验中,添加枯草芽孢杆菌制剂后,发酵产生的氨气浓度明显降低,发酵混合物pH值逐渐降低。

全文目录

摘要  3-6
ABSTRACT  6-14
第1章前言  14-28
  1.1 益生菌简述  14-18
    1.1.1 益生菌的定义  14-15
    1.1.2 益生菌种类  15-16
    1.1.3 益生菌的作用机理  16-18
  1.2 益生枯草芽孢杆菌应用研究进展  18-23
    1.2.1 益生芽孢杆菌简述  18-20
    1.2.2 益生枯草芽孢杆菌的研究进展  20-23
  1.3 畜舍内氨气产生、危害及减排方法  23-26
    1.3.1 氨气的产生  23
    1.3.2 氨气的危害  23-24
    1.3.3 氨气的减排方法  24-26
  1.4 本课题的研究意义与内容  26-28
    1.4.1 研究意义  26-27
    1.4.2 研究内容  27-28
第2章枯草芽孢杆菌的抗逆特性  28-37
  2.1 试验材料与仪器  28-29
    2.1.1 材料与试剂  28
    2.1.2 仪器与设备  28-29
  2.2 试验方法  29-31
    2.2.1 菌落计数方法  29
    2.2.2 种子培养液的制备  29
    2.2.3 存活率计算方法  29-30
    2.2.4 耐高温试验  30
    2.2.5 耐酸性试验  30
    2.2.6 耐猪胆盐试验  30
    2.2.7 药敏试验  30-31
  2.3 结果与讨论  31-35
    2.3.1 耐高温能力  31-32
    2.3.2 耐酸能力  32-33
    2.3.3 耐猪胆盐能力  33-35
    2.3.4 药敏试验结果  35
  2.4 小结  35-37
第3章枯草芽孢杆菌制剂的制备  37-42
  3.1 试验材料与仪器  37
    3.1.1 试验材料  37
    3.1.2 仪器设备  37
  3.2 试验方法  37-39
    3.2.1 菌落计数方法  37-38
    3.2.2 含水率测定  38
    3.2.3 液体培养基的筛选  38
    3.2.4 固体发酵生长曲线的测定和发酵底物的选择  38-39
    3.2.5 枯草芽孢杆菌制剂的制备  39
  3.3 结果与讨论  39-41
    3.3.1 液体培养基的筛选  39
    3.3.2 固体发酵生长曲线的测定和发酵底物的选择  39-41
    3.3.3 枯草芽孢杆菌制剂的制备  41
  3.4 小结  41-42
第4章枯草芽孢杆菌对仔猪生长性能和氨气散发量的影响  42-56
  4.1 试验材料与仪器  42-44
    4.1.1 试验材料  42-43
    4.1.2 仪器设备  43-44
  4.2 试验方法  44-46
    4.2.1 仔猪日增重的测定  44
    4.2.2 料重比的测定  44
    4.2.3 仔猪腹泻率  44
    4.2.4 氨气浓度测定  44-45
    4.2.5 免疫蛋白测定  45
    4.2.6 粪中脲酶活性的测定  45-46
    4.2.7 猪粪、尿中总氮的测定  46
    4.2.8 猪粪中氨氮的测定  46
    4.2.9 粪便pH值的测定  46
    4.2.10 粪尿混合物发酵试验  46
  4.3 结果与讨论  46-54
    4.3.1 对仔猪生长性能的影响  46-48
    4.3.2 对仔猪血清中免疫球蛋白含量的影响  48-49
    4.3.3 对排泄物中总氮、氨氮的影响  49
    4.3.4 对粪便中脲酶活性的影响  49-51
    4.3.5 对猪舍中氨气浓度的影响  51
    4.3.6 对排泄物pH值的影响  51-52
    4.3.7 粪尿混合物发酵试验结果  52-54
  4.4 小结  54-56
第5章结论与建议  56-58
  5.1 主要研究结论  56-57
  5.2 建议  57-58
参考文献  58-71
附录一硕士期间研究成果  71-73
致谢  73

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