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铅对仔鼠学习记忆及其海马中SNAP-25基因表达的影响

作　者: 贾金霞
导　师: 李文杰
学　校: 郑州大学
专　业: 营养与食品卫生学
关键词: 铅学习记忆海马 SNAP-25
分类号: R114
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

铅是一种具有神经毒性的重金属,在环境中可长期积蓄造成污染,通过食物链、水、土壤和空气进入人体。近年来,随着我国城市化、工业化的发展,环境污染日益加重,环境中铅浓度不断升高。由于胎儿及婴幼儿的血脑屏障发育不完善,铅很容易进入脑组织,使发育中的神经系统受到铅的损害,在儿童主要表现为学习记忆能力降低及行为发育异常。突触体相关蛋白(Synaptosomal-associated Protein,即SNAP-25),在成年动物的海马中主要分布于苔状纤维末梢以及齿状回的分子层。以往的研究表明,SNAP-25与树突与轴突的生长、神经递质的释放以及中枢神经损伤后突触的可塑性有关,并且当海马诱导长时期增强(Long-term potentiation,即LTP)后,SNAP-25的表达量增多。SNAP-25在铅对智力影响中所起的作用,目前尚无明确结论。目的本研究拟探讨不同水平铅暴露对仔鼠学习记忆能力的影响及SNAP-25在铅中毒机制中的作用。方法1.研究对象清洁级昆明小鼠受孕后随机分为4组,每组10只,3个铅暴露组孕鼠自怀孕第1d起至仔鼠断乳期(出生后21d),分别给予醋酸铅含量为0.3g/L、1.0g/L和3.0g／L的饮水,对照组给予无铅双蒸水。仔鼠出生后由母鼠喂养至断乳。2.研究方法2.1血铅和组织铅浓度的测定采用Z-5000石墨炉原子吸收光谱仪测仔鼠血铅和组织铅浓度。2.2学习记忆能力的测定利用水迷宫来观察仔鼠的学习记忆能力。2.3目的基因mRNA表达水平的测定采用RT-PCR法扩增SNAP-25mRNA片段。2.4目的蛋白质表达的细胞学定位采用过氧化物标记的链霉素卵白素免疫组化染色,检测SNAP-25在海马组织中的表达情况。2.5统计学分析所有实验数据均用SPSS 12.0统计软件进行处理,采用单因素方差和Pearson相关对数据进行分析,检验水准α=0.05。结果1铅暴露对小鼠血液和海马组织中铅浓度的影响各年龄段铅暴露仔鼠血铅和脑铅水平均明显高于对照组(P<0.01),铅暴露各组之间差异也有统计学意义。各铅暴露组仔鼠血铅水平随日龄变化而呈现规律性变化,即第7天较高,第14天有所下降,第21天则明显增加。各铅暴露组仔鼠海马组织中铅水平随日龄变化也呈一定的规律,与血铅的变化规律有所不同,即第7天较高,第14天最高,第21天最低。2水迷宫试验21d仔鼠错误次数有随母鼠铅暴露剂量增加而增加的趋势；低剂量组与对照组相比无统计学意义(P>0.05)；中、高剂量组与对照组比较有统计学意义(P<0.05)；高剂量组平均逃避潜伏期与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。3母体铅暴露对21d仔鼠海马组织中SNAP-25mRNA表达的影响SNAP-25 mRNA在对照组海马中的表达量较高,随着母鼠铅暴露剂量的增加,其表达有降低的趋势,低、中和高剂量组与对照组相比较有统计学意义(P<0.05)。4 21d仔鼠海马组织免疫组织化学结果铅暴露组仔鼠海马的CA1和CA4区域SNAP-25蛋白的表达明显低于对照组(P<0.05),但是随着剂量的增加,不同的铅暴露组在海马的不同区域SNAP-25蛋白的表达也有所不同。结论1母体铅暴露使铅在仔鼠体内蓄积,引起仔鼠学习记忆功能损害；2铅所引起的神经毒性可能通过铅下调SNAP-25 mRNA的表达,引起一些信号传导通路的改变,造成神经损害。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
图表索引  10-11
英文缩写词索引  11-12
引言  12-14
1 材料与方法  14-26
2 结果  26-32
3 讨论  32-36
4 结论  36-37
参考文献  37-41
综述  41-58
  参考文献  54-58
个人简介及硕士期间发表文章  58-59
致谢  59

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