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枯草芽孢杆菌对菌群失调小鼠肠道肠三叶因子表达的影响

作　者: 马冬梅
导　师: 赵京杨；操继跃
学　校: 华中农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 肠三叶因子枯草芽孢杆菌菌群失调小鼠
分类号: S852.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

本试验旨在通过研究枯草芽孢杆菌对菌群失调小鼠肠道肠三叶因子(TFF3)表达的影响,来探讨枯草芽孢杆菌对肠道的益生机制。SPF级KM小鼠分为正常对照组和菌群失调组,菌群失调制模成功后,菌群失调组分为菌群失调自然恢复组、菌群失调芽孢杆菌恢复组,分别对菌群失调组、菌群失调组自然恢复组和菌群失调芽孢杆菌恢复组第14,21d采集结肠、回肠黏膜样品,采用RT-PCR分析肠三叶因子TFF3表达。试验结果显示：(1)菌群失调时,小鼠肠道肠三叶因子表达明显上调,在回肠可达到正常值的近三倍,达到显著差异水平(P<0.05)；结肠的肠三叶因子异常表达倍数更高,呈现近十几倍于正常结肠TFF3的表达,达到显著差异水平(P<0.05)。(2)菌群失调恢复期第7d,菌群失调自然恢复组与菌群失调枯草芽孢杆菌组在回肠的TFF3表达量有明显的表达差异,菌群失调自然恢复组TFF3的表达量明显低于菌群失调枯草芽孢杆菌组,菌群失调枯草芽孢杆菌组的TFF3表达量达到菌群失调自然恢复组的近5倍(P<0.05)；在结肠,菌群失调枯草芽孢杆菌组TFF3的表达量达到菌群失调自然恢复组的近20倍(P<0.05)。(3)菌群失调恢复的第14d,回肠和结肠TFF3的表达量,菌群失调枯草芽孢杆菌组和菌群失调自然恢复组两组均无显著差异,且TFF3表达量与正常对照组接近。结论：三叶因子是一种肠道内的快速反应肽,对肠道的黏膜损伤表现出了快速有效的修复效果。枯草芽孢杆菌不仅对肠道微生态有着良好的调整作用,起到肠黏膜屏障中的生物屏障功能,还能在肠黏膜受到损伤的时候,促进对肠黏膜具有修复作用的因子TFF3的表达,使肠黏膜在受损后短期内就可恢复正常。

全文目录

摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-26
  1 肠三叶因子  9-15
    1.1 TFF3分子结构及基因特点  9-10
      1.1.1 TFF3的分子结构  9-10
      1.1.2 TFF3的基因特点  10
    1.2 TFF3分布表达及其调节  10-12
      1.2.1 正常状态表达情况  10-11
      1.2.2 异常状态表达情况  11-12
        1.2.2.1 在肿瘤组织中表达  11
        1.2.2.2 在溃疡组织中的表达  11-12
      1.2.3 对TFF3表达的调节  12
    1.3 三叶因子的作用  12-13
      1.3.1 对肠黏膜的保护和修复作用  12-13
      1.3.2 抗粘液细胞凋亡  13
    1.4 TFF3的肠黏膜保护作用机制  13-15
      1.4.1 与粘液糖蛋白的相互作用  13
      1.4.2 TFF3诱导上皮细胞的迁移  13-14
      1.4.3 TFF3的细胞保护功能  14
        1.4.3.1 TFF3保护上皮细胞免受补体的损害  14
        1.4.3.2 TF3通过NF-κB信号途径介导的抗凋亡作用  14
      1.4.4 细胞内信号转导机制  14-15
    1.5 研究进展  15
  2 枯草芽孢杆菌  15-18
    2.1 生物学特点  15-16
    2.2 芽孢杆菌的作用机理  16-18
      2.2.1 夺氧抑菌  16
      2.2.2 拮抗作用  16
      2.2.3 产生有益代谢物  16-17
      2.2.4 增强免疫力  17
      2.2.5 促器官机能成熟  17
      2.2.6 环境净化  17-18
    2.3 枯草芽孢杆菌应用及其研究前景  18
  3 肠黏膜屏障  18-26
    3.1 肠黏膜屏障的定义及研究意义  18
    3.2 肠黏膜屏障组成  18-19
    3.3 肠黏膜屏障功能  19-22
      3.3.1 机械屏障  19-21
      3.3.2 化学屏障  21
      3.3.3 免疫屏障  21
      3.3.4 生物屏障  21-22
    3.4 肠黏膜屏障功能的调节  22-24
      3.4.1 饮食  22-23
      3.4.2 应激  23
      3.4.3 药物  23-24
      3.4.4 肥大细胞  24
      3.4.5 NO  24
      3.4.6 肠道菌群  24
    3.5 肠黏膜屏障紊乱及调节  24-25
    3.6 抗肠黏膜屏障损伤的研究  25-26
问题的提出  26
研究目的及意义  26-27
试验  27-39
  1 材料  27-29
    1.1 实验动物  27
    1.2 药品及试剂  27-28
    1.3 试验菌株  28
    1.4 主要仪器  28-29
  2 方法  29-31
    2.1 试验分组和试验设计  29-30
    2.2 试验动物管理  30
    2.3 菌群失调模型建立及评价  30-31
    2.7 TFF3的PCR扩增  31
      2.7.1 引物的设计  31
      2.7.2 荧光定量PCR扩增  31
  3 统计学处理  31-32
  4 结果与分析  32-36
    4.1 菌群失调模型建立及评价  32-33
    4.2 肠黏膜RNA提取及其检测  33
    4.3 逆转录cDNA检测  33-34
    4.4 菌群失调对小鼠回肠和结肠TFF3基因表达水平的影响  34
    4.5 枯草芽孢杆菌对正常小鼠回肠和结肠TFF3表达的影响  34-35
    4.6 枯草芽孢杆菌对菌群失调小鼠回肠和结肠TFF3表达的影响  35-36
  5 讨论  36-38
    5.1 菌群失调模型的建立与评价  36-37
    5.2 菌群失调对小鼠TFF3的影响  37
    5.3 枯草芽孢杆菌对菌群失调恢复状态下TFF3表达的影响  37-38
  6 结论  38-39
参考文献  39-46
致谢  46

枯草芽孢杆菌对菌群失调小鼠肠道肠三叶因子表达的影响

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