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端粒保护蛋白TPP1及POT1在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞表达的研究
作 者: 青玉凤
导 师: 周京国
学 校: 川北医学院
专 业: 内科学
关键词: 端粒保护蛋白 TPP1 POT1 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞
分类号: R593.22
类 型: 硕士论文
年 份: 2010年
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内容摘要
目的:检测端粒保护蛋白TPP1及POT1在类风湿关节炎(RA)、骨关节炎(OA)及正常人滑膜成纤维细胞(synovial fibroblasts, SFs)中的表达水平并比较其差异性,探讨端粒保护蛋白在RA发病中可能的作用。方法:1、详细收集42例RA和23例OA患者的临床资料,体外分离、纯化及培养RA及OA患者的膝关节腔积液中的SFs(正常SFs对照来自3例外伤截肢者的膝滑膜组织)。2、实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)检测端粒保护蛋白TPP1、POT1在RA、OA及正常对照组SFs的基因水平,单因素方差分析比较TPP1及POT1基因在三组SFs中的表达差异性;分析TPP1、POT1基因与RA临床指标的相关性。3、激光共聚焦定性定位检测TPP1、POT1蛋白在三组SFs的表达。4、蛋白免疫印迹法定量检测TPP1、POT1蛋白在三组SFs的表达情况并比较差异性,分析TPP1、POT1蛋白表达水平与RA临床指标的相关性。结果:TPP1及POT1基因在RA组SFs的表达显著低于OA组和正常对照组(TPP1:0.006±0.003 vs 0.179±0.077 vs 0.195±0.054, F= 115.9,P<0.05;POT1:0.008±0.003 vs 0.063±0.027 vs 0.073±0.011, F=107.3,P<0.05); TPP1及POT1蛋白在三组SFs均有表达,表达主要位于细胞核。TPP1在RA组的表达显著低于OA组和正常对照组(0.225±0.018 vs 0.632±0.030 vs 0.657±0.046,F=499.9,P<0.05),POT1在三组的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。RA组TPP1基因水平与RA患者RF、抗CCP抗体滴度呈负相关(P均<0.05),与疾病活动评分(DAS)、血沉(SR)、C-反应蛋白(CRP)无相关性;POT1基因、TPP1及POT1蛋白与RF、CCP、DAS、SR、CRP均无相关性(P均>0.05)。结论:端粒保护蛋白TPP1、POT1在RA SFs表达的降低可能与RA SFs呈无限制侵袭性生长、甚至出现转化细胞特性有关;通过调整RA SFs端粒保护蛋白TPP1、POT1在RA SFs的水平,有望为RA的治疗寻找新的靶点。
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全文目录
摘要 4-6 ABSTRACT 6-8 前言 8-11 1. 材料与方法 11-25 1.1 材料 11-16 1.2 方法 16-25 2 结果 25-28 2.1 RA 患者的临床指标及实验室结果 25 2.2 SFs 的培养 25 2.3 总RNA 质量鉴定 25 2.4 RT-qPCR 结果 25-27 2.5 LSCM 观察端粒保护蛋白在三组 SFs 的表达情况 27 2.6 Western blot 结果 27-28 3 讨论 28-33 4 结论 33-34 附图 34-42 参考文献 42-45 综述:端粒保护蛋白在端粒形成和功能维护中的作用 45-54 参考文献 52-54 综述:端粒在自身免疫性疾病的研究进展 54-66 参考文献 62-66 附录:英汉缩略语名词对照 66-68 攻读学位期间发表文章情况 68-70 致谢 70-71 个人简历 71
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 全身性疾病 > 免疫性疾病 > 自身免疫性疾病、结缔组织疾病 > 类风湿性关节炎
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