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蛹虫草、云芝发酵条件优化及其复方多糖降血糖作用的研究

作　者: 徐恩彪
导　师: 滕利荣
学　校: 吉林大学
专　业: 生物工程
关键词: 蛹虫草 云芝 发酵条件优化 多糖 降血糖 Ⅱ型糖尿病
分类号: TQ461
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


糖尿病,这种危害人类健康的第三大疾病,如今正以越来越快的速度席卷全球,中国也已经超过印度,成为世界上糖尿病患者最多的国家。多年来,随着化学分析方法和药理实验技术的长足发展,有关天然药物降血糖作用的研究不断深入,人们从中草药中提取了很多种活性成分,并研究了它们对各种类型糖尿病的的治疗作用。如何找到一种更有效的治疗糖尿病的方法,是目前人们最热切关注的问题。本文中,以蛹虫草和云芝菌丝体胞内多糖为研究对象,首先探讨了蛹虫草和云芝菌丝体发酵的最佳培养基和最佳培养条件,再以多糖提取率为指标,在单因素实验的基础上,采用响应面法分别优化两种菌株胞内多糖的提取条件。最后探讨了蛹虫草多糖和云芝多糖复方后对STZ诱导产生的Ⅱ型糖尿病的降血糖作用。

全文目录


内容提要  5-9
第1章 前言  9-19
  1.1 引言  9
  1.2 糖尿病研究进展  9-16
    1.2.1 糖尿病概述  9-10
    1.2.2 糖尿病的诊断及症状  10-11
    1.2.3 糖尿病并发症  11
    1.2.4 糖尿病的分类  11
    1.2.5 Ⅱ型糖尿病致病原因  11-13
      1.2.5.1 遗传因素  12
      1.2.5.2 后天因素  12-13
    1.2.6 Ⅱ型糖尿病药物治疗现状  13-16
      1.2.6.1 可以治疗糖尿病的西药  13-15
      1.2.6.2 可以治疗糖尿病的中药  15-16
  1.3 多糖的提取  16
  1.4 糖尿病动物模型建立方法  16-18
  1.5 本课题研究主要内容  18-19
第2章 云芝、蛹虫草的发酵条件优化和多糖的提取条件优化  19-48
  2.1 实验材料  19-20
  2.2 实验方法和步骤  20-24
    2.2.1 菌种培养方法  20
    2.2.2 菌种菌丝体样品的制备  20-21
    2.2.3 蒽酮－硫酸法测定菌丝体中总糖含量  21
    2.2.4 菌丝体胞内多糖得率的测定  21
    2.2.5 菌株发酵条件优化  21-23
      2.2.5.1 碳源种类的筛选  21
      2.2.5.2 氮源种类的筛选  21
      2.2.5.3 无机盐种类的筛选  21-22
      2.2.5.4 起始PH 值对菌株多糖产率的影响  22
      2.2.5.5 转速对菌株多糖产率的影响  22
      2.2.5.6 温度对菌株多糖产率的影响  22
      2.2.5.7 培养时间对多糖产率的影响  22
      2.2.5.8 接种量对多糖产率的影响  22-23
    2.2.6 菌丝体中多糖提取条件的优化  23
      2.2.6.1 液料比对蛹虫草和云芝菌丝体多糖提取率的影响  23
      2.2.6.2 提取时间对多糖提取率的影响  23
      2.2.6.3 温度对多糖提取率的影响  23
      2.2.6.4 响应面法对蛹虫草和云芝多糖提取条件进行优化  23
      2.2.6.5 验证实验  23
    2.2.7 粗多糖的纯化  23-24
      2.2.7.1 Sevage 法除蛋白  23
      2.2.7.2 多糖乙醇分级沉淀  23-24
      2.2.7.3 透析  24
      2.2.7.4 浓缩和干燥  24
  2.3 实验结果与讨论  24-46
    2.3.1 多糖含量测定的标准曲线  24
    2.3.2 蛹虫草发酵培养基优化  24-29
      2.3.2.1 蛹虫草培养碳源种类的筛选  24-25
      2.3.2.2 蛹虫草培养氮源种类的筛选  25-26
      2.3.2.3 蛹虫草培养无机盐种类的筛选  26-27
      2.3.2.4 发酵起始pH 对蛹虫草菌丝体多糖产率的影响  27
      2.3.2.5 转速对蛹虫草菌丝体多糖产率的影响  27-28
      2.3.2.6 培养温度对蛹虫草菌丝体多糖产率的影响  28
      2.3.2.7 培养时间对蛹虫草菌丝体多糖产率的影响  28-29
      2.3.2.8 接种量对蛹虫草菌丝体多糖产率的影响  29
    2.3.3 云芝发酵培养基的优化  29-34
      2.3.3.1 云芝培养碳源种类的筛选  29-30
      2.3.3.2 云芝培养氮源种类的筛选  30-31
      2.3.3.3 云芝培养无机盐种类的筛选  31
      2.3.3.4 发酵起始pH 对云芝多糖产率的影响  31-32
      2.3.3.5 转速对云芝菌丝体多糖产率的影响  32
      2.3.3.6 培养温度对云芝菌丝体多糖产率的影响  32-33
      2.3.3.7 培养时间对云芝菌丝体多糖产率的影响  33
      2.3.3.8 接种量对云芝菌丝体多糖产率的影响  33-34
    2.3.4 蛹虫草菌丝体多糖提取条件的优化  34-40
      2.3.4.1 液料比对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响  34-35
      2.3.4.2 提取时间对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响  35
      2.3.4.3 温度对蛹虫草菌丝体多糖提取率的影响  35-36
      2.3.4.4 响应面法优化蛹虫草菌丝体多糖提取  36-40
      2.3.4.5 验证实验  40
    2.3.5 云芝菌丝体多糖提取条件的优化  40-45
      2.3.5.1 液料比对云芝菌丝体多糖提取率的影响  40
      2.3.5.2 提取时间对云芝菌丝体多糖提取率的影响  40-41
      2.3.5.3 温度对云芝菌丝体多糖提取率的影响  41
      2.3.5.4 响应面法优化云芝菌丝体多糖提取  41-45
      2.3.5.5 验证实验  45
    2.3.6 粗多糖分离纯化  45-46
  2.4 本章小结  46-48
第3章 云芝、蛹虫草多糖复方降血糖作用的研究  48-57
  3.1 实验材料  48-49
    3.1.1 实验动物  48
    3.1.2 主要试剂  48
    3.1.3 主要仪器  48-49
  3.2 实验步骤和方法  49-50
    3.2.1 云芝、蛹虫草多糖急性毒性实验  49
    3.2.2 STZ 诱导小鼠糖尿病模型的制备  49-50
    3.2.3 血糖测定方法  50
    3.2.4 云芝、蛹虫草多糖复方体内降血糖作用的研究  50
      3.2.4.1 云芝、蛹虫草多糖复方样品的制备  50
      3.2.4.2 复方样品降糖作用的研究  50
      3.2.4.3 一般情况观察  50
      3.2.4.4 统计分析  50
  3.3 实验结果与讨论  50-55
    3.3.1 云芝、蛹虫草多糖复合物急性毒性实验  50-51
      3.3.1.1 受试小鼠形态观察  50-51
      3.3.1.2 受试小鼠体重观察结果  51
      3.3.1.3 急性毒性实验过程中小鼠死亡情况  51
    3.3.2 STZ 诱导Ⅱ型糖尿病小鼠模型的建立  51-53
      3.3.2.1 对STZ 所致糖尿病小鼠的一般状况的影响  51-52
      3.3.2.2 建模期间小鼠空腹血糖的变化  52
      3.3.2.3 建模期间小鼠体重变化  52
      3.3.2.4 STZ 给药前后小鼠死亡情况  52-53
    3.3.3 蛹虫草、云芝多糖复方对糖尿病小鼠降血糖的作用  53-55
      3.3.3.1 一般情况  53
      3.3.3.2 复方给药后各组小鼠空腹血糖变化  53-54
      3.3.3.3 复方给药后各组小鼠体重变化  54
      3.3.3.4 复方给药后各组小鼠死亡情况  54-55
  3.4 本章小结  55-57
第4章 全文总结和展望  57-60
  4.1 全文总结  57-58
    4.1.1 蛹虫草菌丝体培养基优化及发酵条件优化  57
    4.1.2 云芝菌丝体培养基优化及发酵条件优化  57
    4.1.3 蛹虫草和云芝菌丝体多糖提取工艺的研究  57-58
    4.1.4 粗多糖的初步纯化  58
    4.1.5 多糖复方后急性毒性实验  58
    4.1.6 STZ 诱导Ⅱ型糖尿病小鼠模型的建立  58
    4.1.7 蛹虫草、云芝多糖复方对小鼠降血糖的作用  58
  4.2 展望  58-60
参考文献  60-65
致谢  65-66
中文摘要  66-67
Abstract  67-68

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 制药化学工业 > 中草药制剂的生产
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