学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

甘蓝与萝卜属间杂种的创建及鉴定

作　者: 扈新民
导　师: 梁燕
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 园艺蔬菜
关键词: 萝卜甘蓝远缘杂交子房培养胚珠培养属间杂种杂种鉴定
分类号: S635.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 26次
引　用: 1次
阅　读: 论文下载

内容摘要

植物属间杂交是建立蔬菜种质资源库的主要途径之一,提高属间杂种结实率是利用属间杂种的前提。甘蓝(Brassica oleracea L.,2n=18,CC)和萝卜(Raphanus sativus L.,2n=18,RR)都是十字花科中的重要栽培作物。为了将甘蓝显性雄性不育基因导入萝卜优异种质,并拓宽萝卜的遗传背景,本试验以甘蓝显性雄性不育材料‘C08-11’与优异萝卜种质‘Q07-12’杂交,通过对不同发育阶段杂交子房和胚珠的离体培养,研究适合甘蓝与萝卜属间远缘杂交胚挽救的关键技术。并采用SSR和SRAP分子标记技术对胚挽救获得的杂种进行分子鉴定。主要研究结果如下:1、在杂交子房离体培养中,授粉后9d为获取子房的最佳时间。水解酪蛋白和活性炭为必须添加物,可以有效地抑制子房愈伤组织分化,促进子房的生长发育,添加适宜的生长调节剂对甘蓝×萝卜离体子房发育有明显影响。2、胚珠培养产生杂种的效率优于子房培养。在胚珠培养中,花期授粉的最佳取样时间为授粉后16d,蕾期授粉的适宜取样时间为授粉后14d。不同培养基的培养效果不同,在未添加激素时,1/2MS的胚珠培养效果明显优于MS培养基。激素对花期授粉和蕾期授粉胚珠的出苗影响不同,在培养基中添加6-BA和NAA有利于花期授粉胚珠的出苗。经过优化筛选的培养基MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.1mg/L,培养花期授粉胚珠杂种获得频率最高,为17.3%。3、SSR和SRAP分子标记对胚挽救所获得的甘蓝×萝卜F1杂种苗进行鉴定显示,F1代植株既有母本的特征带,也有父本的特征带;在SRAP标记中个别F1代出现父母本都没有的特殊条带。初步确定通过子房培养和胚珠培养所获得的F1代杂种苗全部为真杂种。分子标记在杂种的早期鉴定具有操作简单、成本低和实用性较强的特点。4、通过子房培养和胚珠培养获得甘蓝×萝卜杂种苗34株,其中4株在苗期死亡,存活29株性状全部介于父母本之间。5、在田间杂交试验中,属间花期和蕾期人工授粉分别获得角果数282个和283个,得到饱满和半饱满种子数为7和24粒,但是所获得的种子全部没有萌发。说明胚挽救是获得甘蓝与萝卜属间杂交种的有效途径。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
第一章文献综述  10-22
  1.1 远缘杂交生殖隔离  10-11
    1.1.1 种间杂交不亲和  10-11
    1.1.2 杂种不活  11
    1.1.3 杂种不育  11
    1.1.4 杂种衰败  11
  1.2 组织培养在远缘杂交中的应用  11-12
    1.2.1 胚挽救的方法  11-12
    1.2.2 胚挽救在远缘杂交中的应用  12
  1.3 芸薹属与萝卜属间杂交国内外研究现状  12-13
  1.4 雄性不育在十字花科作物杂种优势中的应用  13-16
    1.4.1 十字花科作物雄性不育的来源  15-16
      1.4.1.1 自然突变  15
      1.4.1.2 品种间、种间、属间杂交和回交转育  15
      1.4.1.3 理化诱变  15-16
      1.4.1.4 原生质体融合  16
      1.4.1.5 基因工程  16
  1.5 属间杂种的分子鉴定  16-20
    1.5.1 分子标记  16-17
    1.5.2 DNA 标记  17-18
    1.5.3 分子标记的种类  18
    1.5.4 SRAP 分子标记的原理及其技术应用  18-19
    1.5.5 SSR 分子标记原理及其技术应用  19-20
    1.5.6 杂种后代的分子鉴定  20
  1.6 研究的目的和意义  20
  1.7 研究内容  20-21
  1.8 试验技术路线  21-22
第二章甘蓝与萝卜属间杂种的创建  22-33
  2.1 胚挽救试材与来源  22
  2.2 胚挽救试验方法  22-23
    2.2.1 子房培养  22-23
    2.2.2 胚珠培养  23
  2.3 结果与分析  23-31
    2.3.1 子房培养  23-26
      2.3.1.1 外源添加物对甘蓝×萝卜离体子房发育的影响  23-24
      2.3.1.2 培养基对甘蓝×萝卜离体子房发育的影响  24-25
      2.3.1.3 授粉和取样时间对甘蓝×萝卜离体子房培养的影响  25
      2.3.1.4 生长调节剂对甘蓝×萝卜离体子房发育的影响  25-26
    2.3.2 胚珠培养  26-30
      2.3.2.1 培养基对甘蓝×萝卜的离体胚珠发育的影响  26
      2.3.2.2 授粉材料对甘蓝×萝卜的离体胚珠发育的影响  26
      2.3.2.3 取材时间对甘蓝×萝卜的离体胚珠发育的影响  26-27
      2.3.2.4 花期授粉和蕾期授粉及培养基对甘蓝×萝卜的离体胚珠出苗时间的影响  27-28
      2.3.2.5 花期授粉和蕾期授粉对甘蓝×萝卜的离体胚珠长势影响  28-30
    2.3.3 培养基对属间胚珠培养获得的杂种幼苗生长的影响  30
    2.3.4 胚挽救与田间对照的比较  30-31
  2.4 讨论  31-33
    2.4.1 关于甘蓝与萝卜属间杂种的创建  31
    2.4.2 关于甘蓝与萝卜属间杂种获得的影响因素  31-33
第三章甘蓝与萝卜属间远缘杂交种的鉴定  33-42
  3.1 F1 代杂种鉴定材料  33
  3.2 F1 代杂种形态鉴定  33
  3.3 F1 代杂种分子鉴定  33-34
    3.3.1 分子鉴定主要仪器及试剂  33
    3.3.2 DNA 的提取  33
    3.3.3 基因组DNA 模板的提取步骤  33-34
    3.3.4 SSR 分子标记鉴定  34
    3.3.5 SRAP 分子标记鉴定  34
  3.4 结果与分析  34-41
    3.4.1 杂种F1 形态鉴定  34-38
    3.4.2 F1 代杂种植株的减数分裂观察  38-39
    3.4.3 DNA 纯度和浓度的检测  39
    3.4.4 SSR 分子标记进行鉴定  39
    3.4.5 SRAP 分子标记进行鉴定  39-40
    3.4.6 SRAP 分子标记聚类分析  40-41
  3.5 讨论  41-42
第四章结论  42-44
参考文献  44-49
致谢  49-50
作者简介  50
在校攻读硕士学位期间参与发表的文章  50
参加的科研项目  50

甘蓝与萝卜属间杂种的创建及鉴定

内容摘要

全文目录

相似论文