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甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组种间杂交的研究

作　者: 李利军
导　师: 李成琼；丁云花
学　校: 西南大学
专　业: 蔬菜学
关键词: 甘蓝型油菜附加系芸薹属种间杂交杂种鉴定
分类号: S634
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

选育抗线虫病的蔬菜品种是控制线虫危害的一条重要途径。针对十字花科植物芸薹属内缺乏线虫抗源的现状,利用具有线虫抗性的甘蓝型油菜-萝卜d染色体附加系do、芸薹属A基因组蔬菜A3和A1及附加系do与A1之间的F₁代杂种为材料,通过种间有性杂交及回交途径将具有线虫抗性的萝卜d染色体导入到芸薹属作物中,从而获得含萝卜d染色体的种质材料,主要研究结果如下:1.甘蓝型油菜附加系do与芸薹属A基因组间有性杂交后代的获得甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组间的有性杂交容易实现,仅通过去雄后辅助人工授粉便可成功实现正反交,获得F₁杂种及回交后代。do与菜心A3间正反交的亲和指数分别达到1.79和1.73,平均角粒数为2粒,do与大白菜A1间回交的亲和指数为0.28,平均角粒数不到1粒;正交do×A3和回交dA1×A1得到的种子发育比较饱满,发芽率也比较高,达到85%以上,反交A3×do得到的种子发育情况较差,大约只有一半的种子可以发芽。2.杂种及杂种后代的鉴定经RAPD标记和SSR标记鉴定,正交杂种均含有萝卜d染色体,且均为真杂种,而反交杂种中出现了部分不含萝卜d染色体的假杂种,另外从46份BC₁代回交种中筛选出了7株具有萝卜d染色体的材料;F₁代真杂种生长发育正常,性状表现偏向于附加系do,并可产生花粉,BC₁代杂种生长发育也正常,但其性状表现出现了明显分离,一部分材料开始偏向于A1,另一部分则仍偏向于附加系do;F₁代真杂种细胞中的DNA相对含量介于其双亲之间,但不同杂种细胞的DNA相对含量并不完全一致,部分反交种的细胞DNA相对含量偏高,回交种细胞的DNA相对含量彼此不一致,大都介于A1和dA1之间,但也有材料的细胞DNA相对含量在dA1附近。3.杂种及杂种后代花粉活力的测定大粒花粉为具有活力的花粉,经醋酸洋红染色后变成深红色,而绝大多数小粒花粉则无活力,经醋酸洋红染色后呈现淡红色或无色;亲本的花粉粒以大花粉粒为主,小粒花粉则很少,花粉活力在90%以上,而F₁代杂种及回交后代则具有相对较多的小粒花粉,花粉活力明显低于亲本;正反交杂种的花粉活力存在一定差异,其中正交种的花粉活力比较一致,约为40%,而部分反交种的花粉活力相对偏高,达到65%左右;BC₁代的花粉活力在40%附近变化,但也有材料的花粉活力与dA1相比明显下降,只有26%左右。

全文目录

摘要  6-7
ABSTRACT  7-9
第一章文献综述  9-17
  1.1 芸薹属植物抗线虫病育种的研究意义  9
  1.2 实现芸薹属植物抗线虫病种质资源创新的技术途径  9-10
  1.3 植物远缘杂交障碍及其克服方法  10-11
    1.3.1 受精前的障碍及克服方法  10
    1.3.2 受精后的障碍及克服方法  10-11
  1.4 芸薹属植物远缘杂交研究进展  11-14
    1.4.1 属间远缘杂交  11-13
    1.4.2 种间远缘杂交  13-14
  1.5 远缘杂交后代的鉴定  14-17
    1.5.1 形态学鉴定  14
    1.5.2 细胞学鉴定  14
    1.5.3 原位杂交技术  14-15
    1.5.4 同工酶鉴定  15
    1.5.5 分子标记鉴定  15-17
第二章引言  17-18
第三章试验材料与方法  18-20
  3.1 试验材料  18
  3.2 试验方法  18-20
    3.2.1 授粉杂交  18
    3.2.2 杂种鉴定  18-19
    3.2.3 花粉活力测定  19-20
第四章结果与分析  20-25
  4.1 杂种及杂种后代的获得  20
  4.2 杂种及杂种后代的鉴定  20-25
    4.2.1 分子标记鉴定  20-22
    4.2.2 形态学鉴定  22
    4.2.3 细胞DNA相对含量的测定  22-24
    4.2.4 花粉活力的测定  24-25
第五章讨论  25-27
第六章结论  27-28
参考文献  28-34
致谢  34-35
发表论文及参加课题  35

甘蓝型油菜附加系与芸薹属A基因组种间杂交的研究

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