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葡萄根际高效无机磷细菌的筛选、鉴定及促生效应研究

作　者: 程宝森
导　师: 刘延琳；房玉林
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 葡萄与葡萄酒学
关键词: 溶磷细菌鉴定溶磷能力葡萄促生效应
分类号: S663.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 65次
引　用: 1次
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内容摘要

磷是生物生长所必需的营养元素,施用磷素一直是保证农业生产增产的重要手段之一,但是磷素的大量应用也产生了许多环境问题。溶磷微生物可将土壤中难溶性的磷酸盐转化为可溶性盐供作物生长利用,提高磷肥的利用率,减少土壤对磷酸盐的吸附固定,避免磷肥过量使用造成环境污染。因此从土壤中筛选高效溶磷微生物并生产应用微生物肥料,以减少磷肥施用量和农业的可持续发展,具有重要的生态和社会意义。试验以陕西省、山西省、甘肃省、宁夏所采集的葡萄根际土壤为材料,从中分离出具有溶磷能力的细菌,并对其进行了鉴定,对其溶磷特性及对葡萄的促生效应进行了系统研究,研究结果如下:1.从溶磷细菌的分离、筛选入手,采用NBRIP平板,从葡萄根际土壤中分离得到73株溶磷细菌,进一步通过NBRIP液体摇瓶试验,筛选得到2株溶磷效果较好的细菌,结合生理生化和16SrDNA序列分析对菌株进行鉴定,鉴定结果:菌株JYR-7为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),菌株JYR-12为蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)。2.在液体摇瓶条件下对溶磷细菌JYR-7和JYR-12在不同氮源、不同碳源及不同时间下溶磷能力进行了系统研究。研究发现溶磷细菌JYR-7最佳氮源为硫酸铵,最佳碳源为葡萄糖;溶磷细菌JYR-12最佳氮源为尿素,最佳碳源为葡萄糖。菌株JYR-7和JYR-12从磷酸钙中释放出有效磷量都随着培养时间的延长而增加。3.在盆栽条件下,研究溶磷细菌JYR-7和JYR-12对酿酒葡萄赤霞珠扦插苗生长及光合能力的影响。盆栽试验的结果表明,接种溶磷细菌处理的赤霞珠扦插苗株高、茎粗、地下干重和地上干重等生长指标均显著高于对照;根冠比小于对照;光合指标显著高于对照。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
第一章文献综述  10-30
  1.1 土壤中的磷  11-14
    1.1.1 土壤中磷的组成  11
    1.1.2 土壤中磷的形态  11
    1.1.3 磷在土壤中的转化（吸附、固定）  11-12
    1.1.4 植物对难溶性磷的活化  12-14
  1.2 土壤微生物磷的研究  14-17
    1.2.1 土壤微生物量磷研究方法  14-15
    1.2.2 土壤微生物对磷的利用和转化作用  15
    1.2.3 施肥对土壤微生物量磷的影响  15-16
    1.2.4 土壤微生物量磷与土壤磷的关系  16-17
  1.3 溶磷微生物的研究和应用  17-26
    1.3.1 历史回顾  17
    1.3.2 溶磷微生物的分离筛选  17-18
    1.3.3 溶磷微生物提高作物产量机制研究  18-19
    1.3.4 溶磷微生物的室内溶磷效果研究  19-20
    1.3.5 根际溶磷微生物种群分布与数量研究  20-21
    1.3.6 溶磷能力及测定方法  21-22
    1.3.7 根际溶磷微生物的溶磷机制  22-24
    1.3.8 根际溶磷微生物和根系分泌关系的研究  24-25
    1.3.9 溶磷微生物对植物生长的影响  25-26
  1.4 研究展望  26
  1.5 细菌种群的现代鉴定技术  26-27
    1.5.1 基于16SrRNA 序列分析方法  26-27
  1.6 研究的目的、意义及研究内容  27-29
    1.6.1 研究的目的和意义  27-28
    1.6.2 研究的内容  28-29
  1.7 研究路线  29-30
第二章溶磷菌的分离和筛选  30-35
  2.1 材料  30-31
    2.1.1 土壤采集与处理  30
    2.1.2 培养基  30-31
    2.1.3 试剂  31
  2.2 方法  31-32
    2.2.1 溶磷细菌的分离  31
    2.2.2 溶磷细菌的筛选  31-32
    2.2.3 溶磷能力的测定方法  32
  2.3 结果与分析  32-34
    2.3.1 溶磷细菌的平板筛选结果  32
    2.3.2 溶磷细菌的摇瓶复筛结果  32-34
  2.4 讨论  34-35
第三章高效溶磷菌株的鉴定  35-43
  3.1 材料与方法  35-39
    3.1.1 供试菌株的形态观察与革兰氏染色  35
    3.1.2 细菌运动性  35
    3.1.3 生理生化试验测定项目及鉴定方法  35-38
    3.1.4 16SrDNA 序列分析  38-39
  3.2 结果与分析  39-41
    3.2.1 平板菌落特征  39
    3.2.2 细菌运动性  39
    3.2.3 菌株生理生化特征  39-40
    3.2.4 16SrDNA 序列分析结果  40-41
    3.2.5 溶磷菌株鉴定结果  41
  3.3 讨论  41-43
第四章高效溶磷菌株室内溶磷条件研究  43-48
  4.1 材料与方法  43-44
    4.1.1 培养基与供试菌株  43
    4.1.2 供试氮源、碳源  43
    4.1.3 菌液制备  43
    4.1.4 不同氮源对溶磷菌株溶磷能力的影响  43
    4.1.5 不同碳源对溶磷菌株溶磷能力的影响  43
    4.1.6 不同培养时间对溶磷菌株溶磷能力的影响  43-44
    4.1.7 测定方法与数据分析方法  44
  4.2 结果与分析  44-47
    4.2.1 不同碳源对溶磷菌株溶磷能力的影响  44
    4.2.2 不同氮源对溶磷菌株溶磷能力的影响  44-45
    4.2.3 不同培养时间对溶磷菌株溶磷能力的影响  45-47
  4.3 讨论  47-48
第五章溶磷菌对葡萄的促生效应研究  48-56
  5.1 材料与方法  49-50
    5.1.1 供试菌株与培养基  49
    5.1.2 供试土壤和苗木  49
    5.1.3 苗木处理  49
    5.1.4 溶磷菌剂的制备  49
    5.1.5 接种处理  49
    5.1.6 指标测定方法  49-50
  5.2 数据分析  50
  5.3 结果与分析  50-56
    5.3.1 溶磷细菌对赤霞珠扦插苗生长指标的影响  50
    5.3.2 溶磷细菌对葡萄叶片叶绿素含量的影响  50-52
    5.3.3 溶磷细菌对葡萄净光合速率(Pn)的影响  52
    5.3.4 溶磷细菌对葡萄叶片气孔导度(Gs)的影响  52-53
    5.3.5 溶磷细菌对葡萄叶片胞间二氧化碳浓度(Ci)的影响  53-54
    5.3.6 溶磷细菌对赤霞珠叶片蒸腾速率(Tr)的影响  54-56
第六章全文结论  56-57
参考文献  57-64
附录  64-66
致谢  66-67
作者简介  67
发表论文情况  67

葡萄根际高效无机磷细菌的筛选、鉴定及促生效应研究

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