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吩嗪-1-羧酸(PCA)和藤黄绿菌素(Plt)的痕量检测和土壤中残留分析
作 者: 高彬
导 师: 张雪洪
学 校: 上海交通大学
专 业: 生物化工
关键词: PCA Plt 电堆积毛细管电泳 固相萃取 农药残留分析
分类号: X833
类 型: 硕士论文
年 份: 2009年
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内容摘要
吩嗪-1-羧酸(Phenazine-1-Carboxylic Acid, PCA)和藤黄绿菌素(Pyoluteorin,Plt)是由假单胞菌分泌产生的具有广谱活性的两种新型抗生素。PCA对甜椒疫病和西瓜枯蒌病的防治具有广谱、高效、低毒、环境相容性好、生产成本低等显著特点,Plt具有抑制细菌、真菌、除草等功能,特别是抑制卵菌属真菌具有很强的活性,具有较为广阔的应用前景。目前农药污染作为一个环境问题,越来越引起人们的关注,因此,对于PCA和Plt两种新型生物农药来说,一方面,我们必须能够实时监测其在土壤中的残留量以确保其对土壤不造成污染,另一方面,在实际应用中,这两种农药在大田使用过程中具有较快的降解速率,降低了其防治效果,所以非常有必要通过化学修饰或改变剂型等方式延长其作用时间,在农药的生物安全性和防治效果之间达到一个最佳平衡。因此,建立一种能够快速准确地检测土壤中农药残留的分析方法是十分必要的。由于之前检测PCA和Plt分析方法的精度无法满足农药痕量和残留检测的需要,本研究分别建立检测痕量PCA和Plt的高精度分析方法,并用于农药残留检测中。本文采用电堆积毛细管电泳的方法,对PCA和Plt两种物质进行在线富集,大大提高了检测的灵敏度,首先对此电泳方法的最优条件进行了摸索,包括工作电压、缓冲液浓度、缓冲液pH值和进样时间等。通过实验,我们得出此方法检测PCA的最低检测限为0.021μg/mL,检测Plt的最低检测限为0.090μg/mL,分别比已报道的方法提高17倍和8倍,可以用于检测土壤中痕量的PCA和Plt。利用有机溶剂提取和固相萃取的方法,我们建立了一种可以高效回收土壤中PCA的提取方法,通过实验证明,此方法在PCA施药浓度为0.02~0.30 mg kg-1之间时回收率可达到92.35% ~107.04%,具有很高的回收效率。运用此方法,结合电堆积毛细管电泳检测,我们测定出了PCA在土壤中残留的动态变化曲线,最终结果证明,PCA在土壤中具有较快的降解速率,具有良好的生物安全性。此外,此残留检测方法可以应用于食品的PCA残留检测中。同时,本研究对Plt的土壤提取方法进行了摸索和研究,建立了利用液-液萃取法的净化方法,通过实验证明具有很高的净化效果和单步回收率,但是在对提取剂和提取方法进行摸索后,目前Plt从土壤中提取的回收率仍不高,在后续的工作中,还需对Plt的提取方法进行进一步的优化和研究,以提高回收率。
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全文目录
摘要 2-4 ABSTRACT 4-8 第一章 绪论 8-32 1.1 生物农药概述 8-13 1.1.1 生物农药的定义和分类 8-9 1.1.2 生物农药的优缺点和发展现状 9-10 1.1.3 生物农药申嗪霉素和藤黄绿菌素 10-13 1.2 农药残留概述 13-16 1.2.1 农药残留的主要相关概念 13-14 1.2.2 农药残留的研究内容 14-15 1.2.3 农药在土壤中的行为 15-16 1.3 农药残留分析技术 16-22 1.3.1 提取 17-19 1.3.2 净化 19-20 1.3.3 检测 20-22 1.4 电堆积毛细管富集电泳 22-28 1.4.1 毛细管电泳技术概述 22-25 1.4.2 毛细管电泳中的样品富集 25-26 1.4.3 电堆积富集技术 26-28 1.5 固相萃取(SPE)技术 28-30 1.5.1 固相萃取(SPE)技术的分离模式及作用机理 28-29 1.5.2 固相萃取的操作程序 29 1.5.3 固相萃取(SPE)装置 29-30 1.5.4 固相萃取(SPE)技术在土壤农药残留分析中的应用 30 1.6 工作背景和意义 30-32 第二章 PCA 的痕量检测和土壤中残留分析 32-50 2.1 实验部分 32-35 2.1.1 仪器与设备 32-33 2.1.2 试剂与标准液配制 33 2.1.3 PCA 样品制备 33-34 2.1.4 样品提取方法 34-35 2.2 结果与讨论 35-48 2.2.1 提取剂的选择 35-36 2.2.2 净化方法的选择 36-37 2.2.3 电堆积毛细管电泳检测 37-45 2.2.4 PCA 在土壤中的残留量检测 45-48 2.3 总结 48-50 第三章 PLT 的痕量检测和土壤中残留分析 50-68 3.1 实验部分 50-52 3.1.1 仪器与设备 50 3.1.2 试剂与标准液配制 50 3.1.3 Plt 样品制备方法 50-51 3.1.4 样品提取方法 51-52 3.2 结果与讨论 52-67 3.2.1 提取步骤的优化 52-54 3.2.2 净化方式效率的验证 54 3.2.3 电堆积毛细管电泳检测 54-67 3.3 总结 67-68 第四章 总结与展望 68-70 参考文献 70-77 致谢 77-79
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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境质量评价与环境监测 > 环境监测 > 土壤监测
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