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茶多酚与羊毛角蛋白相互作用的研究

作　者: 田鹏
导　师: 赵春贵
学　校: 山西大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 茶多酚 α-角蛋白 荧光光谱法 试纸
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


第一章：简述了茶多酚和羊毛角蛋白的研究现状及发展趋势,重点阐述了多酚与蛋白作用的理论和机制。根据多酚具有同时与蛋白、金属离子结合的重要特性,在分析多酚-蛋白相互作用机理的同时,提出本文立题的意义和研究内容。第二章：利用荧光光谱法,探索了茶多酚与角蛋白的反应条件,在不同温度及pH条件下,研究了两种茶多酚(EGCG、ECG)与羊毛角蛋白的相互作用,EGCG和ECG对角蛋白的荧光都有猝灭作用且都是生成1：1配合物的静态猝灭过程,并计算求得了EGCG和ECG与角蛋白结合的表观结合常数KA和结合位点数n,经热力学参数分析,EGCG和ECG与角蛋白结合过程的AG<0、△H>0、△S>0,表明两种茶多酚与角蛋白作用力主要是疏水作用。而且EGCG、ECG通过疏水作用与角蛋白结合靠近后,再进行静电作用或形成氢键。第三章：通过研究EGCG、ECG与Keratin相互作用的共振光散射,发现角蛋白与ECG作用后聚集形成复合物悬浮于溶液中,且这些复合物可离心除去。角蛋白与EGCG作用后形成可溶性复合物。说明不同茶多酚与角蛋白发生聚集的行为也不同。第四章：研究一种快速测定茶多酚含量的试纸的制备方法。以铁盐为显色剂,以酒石酸、柠檬酸、草酸、氟化物、磺基水扬酸等无机和有机酸及可溶性金属盐为络合剂,以淀粉、聚乙烯醇、琼脂、聚丙烯酰胺凝胶和明胶等高分子材料为粘合剂制备茶多酚检测试纸,并结合现代计算机图像处理和分析技术制作茶多酚标准比色卡。根据待测样品对此检测试纸的显色与标准比色卡对比,可快速目测茶多酚含量,也可通过扫描成像精确测定茶多酚含量。该试纸适用于茶叶及食品中多酚含量的快速测定,并主要应用于茶叶茶多酚含量的测定。本发明具有简便、快捷、成本低、适用广、实用性强、安全无毒、无污染等优点。

全文目录


摘要  10-11
ABSTRACT  11-13
第一章 绪论  13-31
  1 植物多酚概述  13-15
    1.1 植物多酚的概念  13
    1.2 茶多酚的概念  13-14
    1.3 茶多酚的化学特性  14
    1.4 茶多酚的应用  14-15
  2 毛纤维概述  15-16
    2.1 毛纤维的概念  15
    2.2 角蛋白概述  15-16
  3 多酚与蛋白作用机理概述  16-23
    3.1 多酚与蛋白作用的理论模型及规律  16-19
    3.2 多酚-蛋白质反应的作用力  19-23
  4 多酚与染料  23
  5 多酚与金属离子的相互作用  23-24
  6 本文研究内容及其意义  24-25
  参考文献  25-31
第二章 茶多酚与角蛋白相互作用的研究  31-45
  1 实验部分  32
    1.1 主要仪器与试剂  32
    1.2 实验方法  32
  2 结果与分析  32-43
    2.1 pH值对EGCG和ECG溶液荧光强度的影响  32-33
    2.2 盐对EGCG和ECG溶液荧光强度的影响  33
    2.3 pH对反应体系的影响  33-35
    2.4 离心对反应体系的影响  35
    2.5 反应时间对EGCG、ECG与Keratin作用的影响  35-36
    2.6 EGCG、ECG分别对角蛋白的荧光猝灭作用  36-37
    2.7 EGCG、ECG对角蛋白荧光猝灭的机理  37-39
    2.8 EGCG、ECG与Keratin结合常数及结合位点数的计算  39-41
    2.9 EGCG、ECG与Keratin作用的热力学分析  41-43
  3 讨论  43-44
  参考文献  44-45
第三章 茶多酚与角蛋白作用的共振光散射光谱  45-51
  1 实验部分  45-46
    1.1 主要仪器与试剂  45-46
    1.2 实验方法  46
  2 结果与分析  46-48
    2.1 EGCG与Keratin作用的共振光散射光谱  46-47
    2.2 ECG与Keratin作用的共振光散射  47-48
  3 讨论  48-49
  参考文献  49-51
第四章 测定茶叶中茶多酚含量的方法及其应用  51-61
  1 实验部分  52-54
    1.1 仪器  52
    1.2 材料与试剂  52
    1.3 茶多酚试纸的检测原理  52-53
    1.4 试纸的制作  53
    1.5 标准比色卡的制备  53-54
    1.6 茶叶中茶多酚含量的测定  54
  2 结果与分析  54-59
    2.1 铁盐的选择  55
    2.2 铁盐浓度的选择  55
    2.3 络合剂的选择  55-56
    2.4 络合剂浓度的选择  56
    2.5 交联剂的选择  56
    2.6 交联剂浓度的选择  56
    2.7 试纸的选择  56-57
    2.8 浸泡时间  57
    2.9 干燥条件  57
    2.10 试纸存放时间及存放方式  57
    2.11 试纸的显色时间  57-58
    2.12 茶叶中茶多酚含量的测定  58-59
    2.13 试纸测定茶叶中茶多酚含量  59
  3 讨论  59-61
第五章 图版  61-63
参考文献  63-64
缩略语  64-65
附录  65-66
致谢  66-67

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学
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