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小半夏加茯苓颗粒体外抑瘤作用的实验研究

作　者: 孟庆华
导　师: 冯泳
学　校: 贵阳中医学院
专　业: 方剂学
关键词: 小半夏加茯苓颗粒 SMMC-7721细胞 SGC-7901细胞抑制增殖 Bcl-2
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

目的:研究小半夏加茯苓颗粒对肝癌SMMC-7721细胞和胃癌SGC-7901细胞增殖与凋亡的影响,探讨其对体外培养肿瘤细胞的抑制作用。方法:用健康SD大鼠制备含药血清,分别为空白组、西药组、小半夏加茯苓汤组、小半夏加茯苓颗粒大剂量、中剂量、小剂量组。1.取对数生长期细胞与含药血清共孵后,倒置显微镜下观察肝癌SMMC-7721细胞形态变化;2.MTT法检测各含药血清作用后肝癌SMMC-7721细胞、胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制率;3.ELISA法测定不同含药血清作用后两种细胞凋亡相关基因Bcl-2的表达情况;4.流式细胞分析技术测定不同含药血清作用后两种细胞存活率。结果:1.与空白组比较,小半夏加茯苓汤及颗粒各剂量组含药血清作用后的肝癌SMMC-7721细胞形态发生明显改变,呈现出机能不良、生长受阻状态,甚至有些细胞脱落死亡,细胞数目减少。2.MTT检测结果显示:含药血清作用24h、48h、72h后,与空白组比较,西药组、汤剂组、颗粒大、中、小剂组肝癌SMMC-7721细胞和胃癌SGC-7901细胞的光吸收值(OD值)均显著下降(P＜0.01);其中颗粒剂对细胞生长增殖抑制作用表现出剂量依赖性;汤剂及颗粒剂对细胞的抑制作用呈现时间相关性(P＜0.01)。3.ELISA法检测结果显示:与空白组比较,小半夏加茯苓汤及颗粒大剂量含药血清可下调体外培养肿瘤细胞中凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.05),汤剂组与颗粒大剂组比较无显著差异(P＞0.05)。4.流式细胞仪分析结果显示:含药血清作用18h与作用36h后,与空白组比较,西药组、汤剂组、颗粒大剂组肝癌SMMC-7721细胞和胃癌SGC-7901细胞存活率均显著下降(P＜0.01,P＜0.05)。结论:1.小半夏加茯苓汤及颗粒含药血清有破坏肿瘤细胞形态、抑制肿瘤细胞生长增殖的作用。2.小半夏加茯苓汤及颗粒含药血清能够抑制体外培养的SMMC-7721细胞和SGC-7901细胞的增殖,可能与下调凋亡相关基因Bcl-2表达而诱导细胞凋亡,或者影响细胞膜特性而对肿瘤细胞产生直接杀伤作用有关。3.小半夏加茯苓颗粒对体外培养肿瘤细胞的抑制作用呈时间剂量相关性,随着剂量加大,作用时间延长其抑制作用增强。4.改良剂型颗粒剂与原方汤剂相比,抑瘤作用无显著差异。

全文目录

中文摘要  6-7
英文摘要  7-9
前言  9-11
正文  11-50
  1 文献研究  11-27
    1.1 古文献对肿瘤的记载  11
    1.2 肿瘤的病因病机  11-13
    1.3 肿瘤的治疗原则  13
    1.4 从痰饮论治肿瘤的理论探讨  13-22
    1.5 关于小半夏加茯苓颗粒  22-27
  2 实验研究  27-42
    实验1 小半夏加茯苓颗粒含药血清对肝癌SMMC-7721细胞形态的影响  27-33
    实验2 小半夏加茯苓颗粒含药血清对肝癌、胃癌细胞增殖的影响  33-36
    实验3 小半夏加茯苓颗粒含药血清对肝癌、胃癌细胞Bcl-2表达的影响  36-39
    实验4 小半夏加茯苓颗粒含药血清对肝癌、胃癌细胞存活率的影响  39-42
  3 讨论  42-49
    3.1 研究背景  42
    3.2 关于该实验方法学的探讨  42-45
      3.2.1 对中药血清药理学的认识  42-44
      3.2.2 含药血清的制备  44
      3.2.3 给药剂量及阳性药物的选择  44-45
    3.3 实验结果讨论  45-48
      3.3.1 小半夏加茯苓颗粒对肝癌SMMC-7721细胞形态的影响  45-46
      3.3.2 MTT法检测小半夏加茯苓颗粒对肝癌、胃癌细胞增殖的影响  46
      3.3.3 小半夏加茯苓颗粒对肝癌、胃癌细胞Bcl-2表达的影响  46-47
      3.3.4 FCM检测小半夏加茯苓颗粒含药血清对肝癌、胃癌细胞生长的影响  47-48
    3.4 问题与展望  48-49
  4 结论  49-50
结语  50-51
参考文献  51-57
附录1: 缩略词中英文对照表  57-58
附录2:小半夏加茯苓颗粒中单味药抗肿瘤作用的研究概况  58-65
附录3:肿瘤从痰饮论治浅析  65-75
附录4:流式细胞仪分析图谱  75-79
致谢  79-80
个人简历  80-84

小半夏加茯苓颗粒体外抑瘤作用的实验研究

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