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柿单宁抗氧化活性及水解工艺研究

作　者: 陈美红
导　师: 李春美
学　校: 华中农业大学
专　业: 食品科学
关键词: 柿单宁 硫酸-香草醛法 抗氧化活性 分级 水解 间苯三酚体系
分类号: TQ941
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


植物单宁是一类重要的天然活性物质,在植物界分布十分广泛,对植物的生长及利用有着多方面的影响,其在化工、纺织、食品、医药、农林等方面已得到广泛的应用。本文以柿子为原料,建立了适于测定柿单宁的硫酸-香草醛比色方法,比较了柿子各部位提取物的抗氧化活性;采用大孔树脂对柿单宁进行分级,获得了不同的级分并对各级分活性进行了研究分析;建立了以醋酸为介质水解柿子高分子单宁的最佳工艺条件,并对其水解产物的活性进行了分析;同时探索了间苯三酚体系下降解柿子高分子单宁的最佳工艺条件。研究结果如下:1研究了测定柿单宁的硫酸-香草醛法。对酸化香草醛法作了改进,建立了适合于柿单宁的比色测定方法,即以H2SO4作为反应的酸性介质,比色条件为:0.5 mL样品甲醇溶液+2.5 mL 1%香草醛甲醇溶液+2.5 mL 5 mol/mL H2SO4甲醇溶液,于30℃避光反应20 min后测定A500nm。方法评价结果表明,本方法重现性好、回收率高（102%-107%）。2分析比较了柿子各部位提取物的抗氧化活性。结果表明柿子各部位提取物对OH·、DPPH·和ABTS+·均具有较高的清除能力,且呈明显的剂量-效应关系,其清除效果在各个体系中存在一致性:柿肉提取物＞柿皮提取物＞柿核提取物＞柿蒂提取物,且柿子提取物对OH·、DPPH·的清除能力明显高于同浓度的葡萄籽原花青素;而对ABTS+·的清除效果较同浓度的葡萄籽弱。3研究了采用树脂方法将柿单宁进行分级,并比较了各级分间的抗氧化活性。结果表明采用AB-8大孔树脂通过逐步提高乙醇浓度可以将柿单宁按聚合度由低到高的顺序依次洗脱下来。通过比较其在不同抗氧化体系中的抗氧化活性,显示各级分都具有较好的清除自由基效果,且呈明显的剂量-效应关系。在ABTS体系中,各级分的抗氧化效果与分子量没有明显的相关性,在水杨酸水溶液体系中,分子量小的级分的抗氧化效果优于分子量大的级分的抗氧化效果。4研究了柿单宁的水解工艺。结果表明柿单宁醋酸水解的最佳工艺条件为水解温度70℃、水解时间30min、样品浓度2 mg/mL,样品与醋酸的体积比为1:2。柿单宁水解前后的抗氧化活性无明显变化,在DPPH体系中略有提高,在水杨酸体系中略有降低,可以认为醋酸水解不影响柿单宁的抗氧化活性。5研究了柿单宁在间苯三酚体系中的最佳降解条件。结果表明其最佳工艺条件为,在2 mg/mL的柿单宁甲醇溶液中含有0.2 mol/L的HCl、60 mg/mL的间苯三酚和5 mg/mL的抗坏血酸。将此溶液于75℃下反应90 min。

全文目录


摘要  9-11
Abstract  11-13
第一章 前言  13-27
  1 植物单宁及其分类  13-14
  2 柿单宁的组成及分子结构研究  14-17
  3 植物单宁的提取  17-18
    3.1 水提取法  17
    3.2 有机溶剂-水提取法  17-18
    3.3 仪器辅助提取法  18
  4 植物单宁的含量测定  18-23
    4.1 植物单宁含量测定的经典方法  18-22
      4.1.1 皮粉法  18-19
      4.1.2 干酪素法  19
      4.1.3 高锰酸钾法  19
      4.1.4 络合滴定法  19
      4.1.5 比色法  19-22
    4.2 单宁含量测定的新方法  22-23
      4.2.1 高效液相色谱法(HPLC)  22
      4.2.2 原子吸收分光光度法  22-23
      4.2.3 其他测定方法  23
  5 柿单宁的生物活性  23-25
    5.1 柿单宁的抗氧化性  23-24
    5.2 柿单宁的抗微生物性  24
    5.3 柿单宁的止血作用  24
    5.4 其他生理活性  24-25
  6 本研究目的意义及内容  25-27
    6.1 目的意义  25
    6.2 研究内容  25-27
第二章 柿单宁含量的比色法测定  27-37
  1 材料与方法  27-30
    1.1 试验材料和仪器设备  27-28
      1.1.1 试验原料  27-28
      1.1.2 试剂  28
      1.1.3 仪器及设备  28
    1.2 试验方法  28-30
      1.2.1 比色条件的选择  28-29
      1.2.2 硫酸-香草醛比色法的方法评价  29-30
  2 结果与分析  30-35
    2.1 比色条件的选择  30-34
      2.1.1 测定波长的确定  30
      2.1.2 硫酸浓度与反应时间的确定  30-31
      2.1.3 反应温度的确定  31-32
      2.1.4 香草醛浓度的确定  32-33
      2.1.5 含水量对吸光度的影响  33
      2.1.6 光照对吸光度的影响  33-34
    2.2 测定方法的评价  34-35
      2.2.1 标准曲线的绘制  34-35
      2.2.2 测定方法的稳定性  35
      2.2.3 测定方法的回收率  35
  3 小结  35-37
第三章 不同部位柿单宁提取物的抗氧化活性比较  37-48
  1 材料与方法  37-42
    1.1 试验材料和仪器设备  37-39
      1.1.1 试验原料  37
      1.1.2 试剂  37-38
      1.1.3 仪器及设备  38-39
    1.2 试验方法  39-42
      1.2.1 柿子各部位提取物的制备  39
      1.2.2 福林酚法测定总酚含量  39
      1.2.3 柿提取物含量的测定  39-40
      1.2.4 清除羟基自由基能力的测定  40
      1.2.5 清除DPPH·能力的测定  40-41
      1.2.6 清除ABTS~+·能力的测定  41-42
  2 结果与分析  42-46
    2.1 福林酚法测定多酚的没食子酸标准曲线的绘制  42
    2.2 柿子总酚和缩合提取物含量的测定  42-43
    2.3 对羟基自由基的清除作用  43-44
    2.4 对 DPPH·的清除作用  44-45
    2.5 对 ABTS~(+·)的清除作用  45
    2.6 柿子各部位提取物抗氧化活性与总酚和缩合单宁含量的关系  45-46
  3 小结  46-48
第四章 不同级分柿单宁的抗氧化活性比较  48-57
  1 材料与方法  49-50
    1.1 试验材料及仪器设备  49-50
      1.1.1 试验原料  49
      1.1.2 试剂  49
      1.1.3 仪器及设备  49-50
    1.2 试验方法  50
      1.2.1 柿子提取物各级分的制备  50
      1.2.2 清除羟基自由基能力的测定  50
      1.2.3 清除DPPH·能力的测定  50
      1.2.4 清除ABTS~+·能力的测定  50
      1.2.5 柿单宁各级分的HPLC分析  50
  2 结果与分析  50-56
    2.1 对羟自由基的清除作用  51
    2.2 对 DPPH·的清除作用  51-52
    2.3 对 ABTS~+·的清除效果  52-53
    2.4 柿单宁各级分 HPLC分析  53-54
    2.5 不同级分柿单宁抗氧化活性的探讨分析  54-56
  3 小结  56-57
第五章 柿单宁降解工艺研究及其降解产物的抗氧化活性研究  57-70
  1 材料与方法  57-63
    1.1 试验材料及仪器设备  57-58
      1.1.1 试验材料  57
      1.1.2 试剂  57
      1.1.3 仪器及设备  57-58
    1.2 试验方法  58-63
      1.2.1 水解原理  58-59
      1.2.2 柿单宁聚合度的测定  59-60
      1.2.3 原花青素的质量测定方法  60-61
      1.2.4 原花青素的物质的量测定方法  61-62
      1.2.5 柿单宁水解工艺研究  62-63
      1.2.6 柿单宁醋酸水解产物的抗氧化活性研究  63
  2 柿单宁水解结果分析  63-69
    2.1 水解用酸的选择  63-64
    2.2 醋酸水解柿单宁的工艺研究  64-67
      2.2.1 水解时间的确定  64-65
      2.2.2 水解温度的确定  65
      2.2.3 醋酸浓度的确定  65-66
      2.2.4 醋酸水解柿单宁的最佳工艺分析  66-67
    2.3 柿单宁醋酸降解产物的抗氧化活性研究  67-69
      2.3.1 柿单宁醋酸水解产物在 DPPH体系中的清除效果研究  67-68
      2.3.2 柿单宁醋酸水解产物在水杨酸体系清除效果研究  68
      2.3.3 柿单宁醋酸水解产物在 ABTS体系清除效果研究  68-69
  3 小结  69-70
第六章 柿单宁在间苯三酚体系中降解条件研究  70-80
  1 材料与方法  70-72
    1.1 试验材料及仪器设备  70-71
      1.1.1 试验材料  70
      1.1.2 试剂  70-71
      1.1.3 仪器及设备  71
    1.2 试验方法  71-72
      1.2.1 柿子高分子单宁的降解及 HPLC分析  71
      1.2.2 试验条件的选择  71-72
      1.2.3 柿单宁的降解程度的确定  72
  2 结果与分析  72-78
    2.1 柿子高分子单宁降解产物的HPLC分析  72-74
    2.2 反应时间的选择  74-75
    2.3 间苯三酚添加量的确定  75-77
    2.4 反应温度的选择  77-78
  3 讨论  78-80
第七章 结论与展望  80-82
  1 结论  80-81
  2 展望  81-82
参考文献  82-89
致谢  89-90
附录  90

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中图分类: > 工业技术 > 化学工业 > 其他化学工业 > 鞣料工业 > 鞣质化学
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