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脱氢表雄酮对大鼠类固醇激素代谢的影响

作　者: 宋李杰
导　师: 邹思湘；马海田
学　校: 南京农业大学
专　业: 基础兽医学
关键词: 脱氢表雄酮 大鼠 衰老 D-半乳糖 类固醇代谢
分类号: Q4
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要


脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone, DHEA)是一种C19类固醇激素,主要由肾上腺皮质网状带分泌,在血液循环中主要以硫酸盐形式(DHEAS)存在。DHEA是性激素合成过程的中间产物,经靶器官中相关酶系的作用,能转化为雌激素、雄激素、孕激素、皮质醇和皮质酮等其他激素,因此被誉为多向性“激素缓冲剂”。研究表明,DHEA在促进脂肪代谢、抗氧化、提高机体免疫力、增强细胞活性、防治老年性痴呆等方面均有积极的促进作用。本研究主要目的观察腹腔注射外源性DHEA在24小时内对大鼠类固醇激素代谢的影响,分别在不同时间点测定机体内主要类固醇激素的含量,通过分析类固醇激素动态变化,揭示DHEA与类固醇激素代谢的消长关系及调节机理,并分析了腹腔注射DHEA对D-半乳糖诱导衰老大鼠类固醇激素代谢的影响,从而为DHEA生理机能机制的研究提供理论依据和实验手段。1、DHEA对大鼠类固醇激素代谢的影响研究以大鼠为研究对象,探讨DHEA对大鼠类固醇激素代谢的影响.选用清洁级SD雄性大鼠100只,随机分为3组,对照组,DHEA低剂量组,DHEA高剂量.对照组注射50%无水乙醇和50%1,2-丙二醇,低剂量和高剂量组分别一次性注射DHEA(溶解于50%无水乙醇和50%1.2-丙二醇中)25mg／kg和100mg／kg体重.分别在0h,1.5h,3h,6h,12h,24h宰杀大鼠,采集血清和睾丸组织备用。用放射免疫分析法测定血清总胆固醇(TC)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、皮质醇(Cor)、醛固酮(Ald)和硫脱氢表雄酮(DHEAS)含量。RT-PCR分析睾丸组织中类固醇激素合成关键酶StAR,CYP17α,P450scc,3β-HSD和17β-HSDⅢ的mRNA表达水平.结果表明：高剂量DHEA在3h显著降低血清总胆固醇含量(P<0.05),在12h显著升高大鼠血清总胆固醇含量(P<0.05)。注射低剂量DHEA在1.5h和3h DHEAS含量显著升高,在3h达到最高值,然后随时间降低(P<0.01),高剂量DHEA在1.5h、3h和6h显著升高机体DHEAS含量,1.5h出现最高值(P<0.01)；DHEA对大鼠血清孕酮、睾酮、雌二醇、皮质醇和醛固酮均有显著性影响；睾酮、皮质醇和雌二醇在1.5h到达最高值后逐渐降低,但是皮质醇在24h又显著升高；醛固酮在24小时表现显著,并且到达最高值(P<0.05)。在高剂量和低剂量组,DHEA对CYP17α,P450scc,3β-HSD和17β-HSDⅢ基因的mRNA表达水平在1.5h显著性升高(P<0.01)。在低剂量组,CYP17α,P450scc和3β-HSD基因的mRNA表达水平在3h显著性升高,但是在3h高剂量没有差异。StAR, CYP17α,P450scc和17β-HSDⅢ基因的mRNA表达水平在12h显著性降低,但是低剂量组StAR的mRNA表达水平显著性升高。以上结果表明,腹腔注射不同剂量DHEA能在不同的时间显著升高机体各种活性类固醇激素的含量,DHEA能通过影响类固醇激素合成关键酶mRNA表达调节大鼠类固醇激素的代谢,详细机理还有待进一步研究。2、DHEA对D半乳糖诱导衰老大鼠类固醇激素代谢的影响选用清洁级SD雄性大鼠108只,随机分为4组,阴性对照组,阳性对照组,DHEA低剂量组和DHEA高剂量组。阴性对照组注射无菌生理盐水,其余颈背部皮下注射150mg／kg／d的D-半乳糖溶液,共8周。然后,低剂量和高剂量组分别一次性注射DHEA(溶解于50%无水乙醇和50%1.2-丙二醇中)25mg／kg、100mg／kg体重,其余各组注射等量的溶剂。分别在0h,3h,6h,12h,24h宰杀大鼠,采集大脑、血清—20℃保存。测定血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、孕酮(P)、皮质醇(Cor)、醛固酮(Aid)。大鼠大脑超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量。结果表明,阳性大鼠大脑MDA含量显著升高,SOD活性显著下降,GSH-Px活力单位下降趋势；高剂量DHEA在24h能显著降低大鼠血清TC含量(P<0.05)。注射低剂量DHEA后3h显著降低HDL-C含量(P<0.05),24h显著升高HDL-C的含量(P<0.05)；而注射高剂量的DHEA则在则在3h、6h、24h均显著降低HDL-C的含量(P<0.05)。对于大鼠血清睾酮T、雌二醇和孕酮的水平,无论高和低剂量的DHEA均在注射后3h达到最大值,而后随着时间的延长逐渐降低。皮质醇和醛固酮在24小时达到最高值。由上述结果可知,D-半乳糖诱导大鼠出现亚急性衰老；DHEA能显著影响D-半乳糖诱导衰老的大鼠类固醇的代谢。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-11
引言  11-13
第一篇 文献综述  13-36
  第一章 动物体内类固醇代谢的基本过程  13-28
    1.类固醇合成的基本过程  13-15
    2.类固醇合成的关键酶  15-20
    3.类固醇激素分解代谢  20-23
    参考文献  23-28
  第二章 DHEA生物学功能研究进展  28-36
    1.DHEA的合成、代谢与分布  28-29
    2.DHEA对代谢的影响  29-30
    3.DHEA与抗衰老  30-31
    4.DHEA其他生物学功能  31-32
    5.DHEA研究方向  32-33
    参考文献  33-36
第二篇 试验研究  36-66
  第一章 DHEA对大鼠类固醇激素代谢的影响研究  36-55
    1.材料与方法  37-40
    2.结果与分析  40-48
    3.讨论与小结  48-52
    参考文献  52-55
  第二章 DHEA对D-半乳糖诱导衰老大鼠类固醇激素代谢的影响  55-66
    1.材料与方法  56-58
    2.结果与分析  58-62
    3.讨论与小结  62-65
    参考文献  65-66
全文结论  66-67
致谢  67-68
硕士期间发表的论文  68

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中图分类: > 生物科学 > 生理学
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