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高产抗真菌抗生素Ustilago esculenta菌株的选育

作　者: 李芹
导　师: 周礼红
学　校: 贵州大学
专　业: 微生物学
关键词: Ustilago esculenta 抗真菌抗生素鉴定 ITS1-5.8S rDNA-ITS2 60Co-γ射线诱变育种
分类号: Q933
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 29次
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内容摘要

传统食用担子菌Ustilago eseulenta菌株可代谢产生一种对部分人体病原真菌、部分植物病原真菌等具有较强拮抗作用的抗真菌抗生素。该抗生素具有安全、稳定、抗菌谱广等特点,为开发和生产新型农用抗真菌抗生素提供了可能。自茭白分离38株菌株。综合形态学和分子生物学方法,共鉴定了33株菌株为U. esculenta菌株。以Aspergilles niger sp.为拮抗菌,琼脂块法测定分离菌株的抑菌活性,筛选到抑菌活性较强的分离菌株UEZC。为筛选高产抗真菌抗生素菌株,以UEZC作为出发菌株,经60Co-γ射线辐射诱变,以拮抗菌对峙法初筛,琼脂块法、管碟法复筛,筛选到较高产抗真菌抗生素突变株MUE-4,其抑菌活性较UEZC菌株提高了近1倍,遗传稳定性良好。经ITS1-5.8S rDNA-ITS2基因序列分析,高产突变株MUE-4较其出发菌株UEZC在ITS1-5.8S rDNA-ITS2区段发生了较为明显的变异。采用响应面(RSA)法对诱变选育得到的高产菌株MUE-4进行发酵工艺的初步研究,在所获得的最优发酵条件下,抑菌活性较优化前提高了46%,较诱变出发菌株UEZC提高了194%。

全文目录

摘要  4-5
Abstract  5-6
第一章前言  6-14
  1.1 生物农药概述  6-9
  1.2 农用抗生素研究进展  9-12
    1.2.1 农用抗生素研究现状  9-11
    1.2.2 国内农用抗生素研究的现存问题  11
    1.2.3 农用抗生素研究展望  11-12
  1.3 立题依据及意义  12-13
  1.4 研究内容  13-14
第二章 Ustilago esculenta菌株的分离、鉴定及其抑菌活性  14-24
  2.1 材料与方法  14-18
    2.1.1 材料  14-15
    2.1.2 方法  15-18
  2.2 结果与分析  18-23
    2.2.1 菌株的分离、纯化  18
    2.2.2 分离菌株的培养特性  18-20
    2.2.3 分离菌株的分子鉴定、ITS序列分子系统学分析  20-21
    2.2.4 分离菌株的抑菌活性  21-23
  2.3 小结  23-24
第三章高产抗真菌抗生素Ustilago esculenta菌株的诱变育种  24-32
  3.1 材料与方法  24-26
    3.1.1 材料  24-25
    3.1.2 方法  25-26
  3.2 结果与分析  26-31
    3.2.1 ~(60)Co-γ射线诱变剂量与UEZC菌株致死率的关系  26-27
    3.2.2 高产抗真菌抗生素菌株的筛选  27-29
    3.2.3 发酵培养时间对菌株MUE-4发酵代谢合成抗真菌抗生素合成的影响  29-30
    3.2.4 出发菌株UEZC与菌株MUE-4 ITS序列比较分析  30-31
  3.3 小结  31-32
第四章高产菌株MUE-4的发酵工艺条件研究  32-47
  4.1 材料与方法  32-36
    4.1.1 材料  32-34
    4.1.2 方法  34-36
  4.2 结果与分析  36-46
    4.2.1 菌株MUE-4液体发酵工艺条件的单因素试验结果  36-42
    4.2.2 菌株MUE-4发酵代谢合成抗真菌抗生素响应面法优化试验结果  42-46
    4.2.3 最佳条件的验证性试验  46
  4.3 小结  46-47
第五章主要研究结论及展望  47-49
  5.1 主要研究结论  47
  5.2 展望  47-49
主要参考文献  49-52
致谢  52-53
附录Ⅰ  53-54
附录Ⅱ  54-64

高产抗真菌抗生素Ustilago esculenta菌株的选育

内容摘要

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