学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

叶酸在肝癌发生发展过程中的防护作用及其分子机制研究

作　者: 朱晓婷
导　师: 孙树汉
学　校: 第二军医大学
专　业: 遗传学
关键词: 表观遗传学叶酸肝细胞癌组蛋白甲基化上皮钙粘着蛋白上皮间质转化赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 26次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

原发性肝癌是世界五大常见肿瘤之一，其死亡率在恶性肿瘤中居第三位。全球范围内肝癌的发生率和致死率居高不下，而在中国尤甚。尽管过去的几十年里，临床对肝癌的诊断和治疗已经取得了显著进展，但是还存在一定的局限性。由于肝癌的恶性程度高、预后差、五年生存率仍然很低，因此仅依靠治疗并不能从根本上消除肝癌给人类带来的威胁，在肿瘤预防已成为全球性趋势的情况下，研究如何预防肝癌的发生成为当前亟待解决的重要临床问题。近年来的研究表明，DNA甲基化、组蛋白甲基化、组蛋白乙酰化修饰等表观遗传学修饰对基因的表达调控起着重要作用，上述表观遗传学修饰的紊乱在肿瘤发生发展过程中的作用正日益引起人们的重视。而叶酸作为饮食中必需的营养成分，和上述表观遗传修饰之间有着复杂的相互作用，能够通过影响表观遗传修饰来调控基因的表达，进而对肿瘤的发生发展产生显著影响。近年来流行病学调查及动物模型研究皆表明，叶酸缺乏可与多种肿瘤相关，例如食管癌、结直肠癌、乳腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌等。临床流行病学研究资料表明，体内叶酸水平降低与肝癌的发生发展密切相关，但缺少后续实验数据支持且作用机制不清。因此进一步探讨补充叶酸对肝癌发生是否有防护作用及其作用的分子机制，可将其作为一种重要的肝癌化学预防的候选分子，为肝癌的早期预防提供扎实的理论与实验基础。为了探讨补充叶酸对肝癌发生是否有防护作用及其作用的分子机制，我们构建了DEN诱发肝癌小鼠模型，从其断奶后即给予不同叶酸浓度的饲料喂养，并于不同时期观察。结果发现，补充叶酸可减轻DEN诱发的肝损伤，并减少肝癌的发生。而近年来有众多研究报道称，EMT和肝损伤、肝硬化及肝癌的发生发展密切相关，因此我们拟研究叶酸是否通过调控EMT进而调控了肝损伤、肝硬化及肝癌的发生。我们通过体内、体外实验，探讨叶酸对EMT是否有调控作用。我们首先检测了DEN模型小鼠肝组织EMT相关标志分子的表达情况，结果发现，叶酸可以抑制小鼠肝脏EMT。随后我们在体外实验中，用不同叶酸浓度的培养基连续培养人肝细胞12个月，结果证实叶酸可以抑制人肝细胞EMT发生，提示叶酸可通过抑制EMT抑制肝癌的发生发展。与此同时我们发现，在肝癌的发生发展及EMT进程中有染色质修饰的改变。赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶1（LSD1）在染色质修饰改变过程中起着重要作用。有文献报道称， LSD1是叶酸的结合蛋白。因此，为研究叶酸是否通过调控LSD1进而调控EMT，我们开展了一系列实验。体外实验结果证实，叶酸确实可下调LSD1。之后，我们利用LSD1特异性抗体，组蛋白H3K4Me2特异性抗体，进行染色质免疫共沉淀实验，证实叶酸通过下调LSD1，降低LSD1在EMT关键上皮钙粘着蛋白基因（E-cadherin, CDH1）启动子区域的结合水平，上调该基因启动子区域组蛋白H3K4Me2水平，进而上调其表达。最后，我们通过干扰和过表达实验，证实了叶酸对上皮基因的调控作用依赖于LSD1。综上所述，本研究证实了叶酸可下调LSD1，减少LSD1于CDH1启动子区域的结合，增加CDH1启动子区域组蛋白H3K4Me2水平，从而上调了CDH1的表达，抑制EMT的发生，进而抑制了肝癌的发生发展。可将叶酸作为重要的肝癌化学预防的候选分子，为肝癌的早期预防提供扎实的理论与实验基础。

叶酸在肝癌发生发展过程中的防护作用及其分子机制研究

内容摘要

全文目录

相似论文