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槲皮素对结肠癌LOVO细胞增殖、侵袭及癌胚抗原CEA表达的影响

作　者: 安昌勇
导　师: 张才全
学　校: 重庆医科大学
专　业: 外科学
关键词: 槲皮素 结肠癌 TGF-β1 CEA smad3
分类号: R735.35
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


背景和目的：TGF-β(Transforming growth factor β, TGF-β)信号通路在细胞生物学功能方面有着重要作用，它的功能失常常导致肿瘤的发生。TGF-β信号通路是通过调节肿瘤细胞的增殖、侵袭转移、免疫及细胞间微环境来促进肿瘤的恶性发展。结肠癌标志物癌胚抗原CEA（Carcinoembryonic antigen，CEA)作为细胞间的粘附分子，在多种肿瘤中出现过表达，具有潜在增强肿瘤侵袭转移能力的作用。CEA的表达量对肿瘤预后的评估和肿瘤疗效的监测及评估有着重要的价值。研究发现，TGF-β信号通路不仅具有调节肿瘤增殖、侵袭能力的功能，还具有刺激结肠肿瘤过量分泌表达CEA的作用。槲皮素（Quercetin）是一类天然类黄酮物质，广泛存在于各类蔬菜水果，比如茶叶、苹果、洋葱及赶黄草等，具有抗炎、抗氧化和扩张血管等功能。在欧美等国家，槲皮素已经被推荐为天然的潜力抗癌药物。本实验致力于通过一种新的治疗性药物槲皮素来抑制结肠癌LOVO细胞的增殖、侵袭能力及CEA的表达的研究，为更好地理解TGF-β信号通路在肿瘤中的作用和槲皮素的潜在抗结肠癌作用提供理论基础。方法：一、槲皮素（Quercetin）通过TGF-β1/smad3/c-myc信号通路抑制LOVO细胞增殖1、实验以5ng/ml的TGF-β1诱导刺激1周的LOVO细胞为细胞模型，共分四组：对照组(C组)、TGF-β1组（T组）、TGF-β1+Quercetin组（TQ组）、Quercetin组（Q组）。C组为正常的LOVO细胞；T组为用5ng/ml的TGF-β1刺激细胞1周的LOVO细胞；TQ组为以5ng/ml的TGF-β1刺激细胞1周后，再使用20umol/L Quercetin处理的LOVO细胞；Q组为只使用20umol/L Quercetin处理的LOVO细胞。2、采用MTT法、平板克隆等检测方法分析槲皮素和TGF-β1对LOVO细胞增殖能力、克隆形成能力。3、采用免疫组化、逆转录PCR、免疫印迹法等检测方法分析槲皮素和TGF-β1对LOVO细胞smad3及c-myc基因表达的影响。二、槲皮素对结肠癌LOVO细胞侵袭能力及癌胚抗原CEA表达的影响1、实验分两组：对照组和槲皮素组。对照组为正常LOVO细胞；槲皮素组为以不同药物浓度处理的LOVO细胞。2、采用内皮细胞粘附实验和小室侵袭实验检测槲皮素对LOVO细胞侵袭能力的影响。3、采用细胞免疫荧光、逆转录PCR及免疫印迹法检测槲皮素对LOVO细胞癌胚抗原CEA表达的影响。结果：一、槲皮素通过TGF-β1/smad3/c-myc信号通路抑制LOVO细胞增殖1、与对照组相比，T组LOVO细胞增殖能力、smad3及c-myc的表达强于对照组（P＜0.05）；Q组和TQ组LOVO细胞增殖能力、smad3及c-myc的表达较对照组减弱（P＜0.05）。2、TQ组与Q组相比较，TQ组增殖能力和c-myc的表达弱于Q组（P＜0.05），而smad3的表达两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。二、槲皮素对结肠癌LOVO细胞侵袭能力及癌胚抗原CEA表达的影响1、与对照组相比，槲皮素组的LOVO细胞粘附能力增强和侵袭能力减弱（P＜0.05）。2、与对照组相比，槲皮素组的LOVO细胞的癌胚抗原CEA mRNA表达水平和蛋白表达水平减弱（P＜0.05）。结论：1、TGF-β1能促进LOVO细胞增殖、smad3及c-myc的表达。2、槲皮素通过抑制TGF-β1/smad3/c-myc信号通路下调靶基因c-myc的表达，并且具有抑制细胞增殖的作用。3、槲皮素能增强LOVO细胞与内皮细胞间的粘附能力，减弱其侵袭能力。4、槲皮素能以剂量依赖方式抑制癌胚抗原CEA基因的表达。

全文目录


摘要  5-8
ABSTRACT  8-13
前言  13-14
第一部分 Quercetin 通过 TGF-β1/smad3/c-myc 信号通路抑制 LOVO 细胞增殖  14-23
  1 材料与方法  14-16
  2 结果  16-19
  3 讨论  19-21
  参考文献  21-23
第二部分 槲皮素对结肠癌 LOVO 细胞侵袭能力及癌胚抗原 CEA 表达的影响  23-31
  1 材料与方法  23-25
  2 结果  25-27
  3 讨论  27-29
  参考文献  29-31
全文结论  31-32
附图  32-36
文献综述  36-45
  参考文献  41-45
致谢  45-46
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录及荣誉  46-47

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤 > 结肠肿瘤
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