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白血病细胞来源微泡水平传递BCR-ABL1融合基因及其蛋白恶性改造间充质干细胞
作 者: 付芬芬
导 师: 陈智超
学 校: 华中科技大学
专 业: 血液病学
关键词: 白血病 微泡 间充质干细胞 BCR-ABL1 恶性改造
分类号: R733.7
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 11次
引 用: 0次
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内容摘要
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目的：肿瘤细胞与肿瘤微环境组分尤其是间充质干细胞（MSCs）存在丰富的信息交流，在肿瘤疾病进展中具有非常重要的作用。但是，肿瘤细胞与MSCs进行对话（cross-talk）的确切机制尚不清楚。本课题以K562白血病细胞为模型，研究白血病细胞来源微泡（MVs）对MSCs的影响及其分子机制，意在阐明肿瘤相关病理机制并为开发新的肿瘤治疗策略提供思路。方法：应用新型全骨髓贴壁培养法分离培养人MSCs，通过细胞形态特征、表面标记和多向诱导分化等进行鉴定；差异离心法分离K562-MVs，应用激光共聚焦、透射电镜和流式细胞术观察其特征。RT-PCR及Western-blot证实K562-MVs和MSCs内BCR-ABL1mRNA及蛋白的表达。激光共聚焦显微镜观察K562-MVs与MSCs的融合过程。MTT和CCK8检测K562和MSCs增殖；RT-PCR及ELISA观察K562-MVs对MSCs分泌细胞因子的影响；采用RNase酶消化MV中的RNA组分，初步探讨MV改造MSCs的机制。结果：采用新型全骨髓贴壁培养法成功分离培养人MSCs，经鉴定其符合MSCs表型，并具有多向分化能力。体外观察到K562细胞可分泌大小不一、直径约为0.1-1μm的球形MVs，并证实K562-MVs内表达BCR-ABL1mRNA及融合蛋白。激光共聚焦显微镜显示K562-MV能够通过直接融合方式进入MSCs，部分进入细胞核内。K562-MVs与MSCs的融合能够将BCR-ABL1mRNA及其蛋白水平传递至MSCs内，促进MSCs分泌TGF-β1、SCF和MMP-9等细胞因子。同时，K562-MVs改造的MSCs能够通过TGF-β1促进K562细胞增殖。结论：K562-MVs通过水平传递BCR-ABL1融合基因及其蛋白改造MSCs，是白血病细胞与白血病微环境进行交叉对话的新型载体。阻断肿瘤细胞来源MV的释放或干扰MVs内容物的传递可能会成为阻止肿瘤疾病进展的一种新策略。
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全文目录
英文缩略词表 5-6
中文摘要 6-8
Abstract 8-10
前言 10-13
材料与方法 13-32
结果 32-46
讨论 46-50
参考文献 50-55
小结 55-56
综述 56-64
参考文献 61-64
致谢 64
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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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