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法舒地尔对LPS刺激小胶质细胞表型演变的影响

作　者: 张海飞
导　师: 马存根
学　校: 山西医科大学
专　业: 神经病学
关键词: 盐酸法舒地尔小胶质细胞脂多糖抗炎作用
分类号: R741
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
下　载: 5次
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内容摘要

目的：小胶质细胞在中枢神经系统炎性病变中的作用具有两面性,本论文采用体外培养BV-2小胶质细胞,探讨盐酸法舒地尔(Fasudil)对小胶质细胞不同亚群的转换以及LPS激活的炎性反应的作用。方法：对BV-2小胶质细胞进行体外常规培养及传代,实验共分为PBS对照组、LPS刺激组及LPS联合Fasudil干预组。采用Griess法测量NO的产生,ELISA法检测TNF-α、IL-1β、TNF-α和IL-10的水平,通过quantichromtm精氨酸酶测定试剂盒测定精氨酸酶Arg-1的活性,Arg-1和iNOS的蛋白定量采用Western blot检测,采用流式细胞技术检测iNOS和Arg-1的平均荧光强度,收集Fasudil-BV-2条件培养液,采用细胞成像分析仪研究其对PC-12神经元的神经保护作用。结果：BV-2经LPS处理后可导致特征性的M1型小胶质细胞炎性反应,而经Fasudil处理可抑制LPS诱导的NO产生以及炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6的释放,并能促进炎性保护细胞因子IL-10和Arg-1的释放。Western blot结果显示BV-2经Fasudil处理后iNOS的含量降低而Arg-1的含量升高,流式细胞分析测得iNOS的平均荧光强度降低而Arg-1的平均荧光强度增高,说明Fasudil可以促使炎性M1型细胞向抗炎的M2型细胞转化。我们观察到凋亡细胞的核密度和核固缩的形态特征,结果表明Fasudil条件培养液显著降低PC12神经元凋亡。结论：Fasudil具有良好的抗炎效果,可以减少炎性细胞因子的释放和氧化应激反应,这可能与炎性的M1型小胶质细胞转化为抗炎的M2型小胶质细胞有关,为进一步临床使用提供了一定的实验依据。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
英文缩略词表  7-8
第一章前言  8-10
第二章材料和方法  10-17
  2.1 材料  10-11
  2.2 方法  11-16
  2.3 统计学处理  16-17
第三章结果  17-21
  3.1 FASUDIL影响BV-2细胞的极性反应  17-18
  3.2 FASUDIL抑制LPS诱导的BV-2细胞炎性反应  18-20
  3.3 FASUDIL保护BV-2介导的PC-12神经元凋亡  20-21
第四章讨论  21-24
第五章结论  24-25
参考文献  25-29
综述  29-44
  参考文献  40-44
个人简历  44-45
致谢  45

法舒地尔对LPS刺激小胶质细胞表型演变的影响

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