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TNF-α促进HepG2肝细胞脂质积聚及其机制初探

作　者: 陈书梅
导　师: 汪志红
学　校: 重庆医科大学
专　业: 内科学
关键词: 肿瘤坏死因子-α 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白固醇调节元件结合蛋白-1 HepG2肝细胞脂质积聚
分类号: R575.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的探讨肿瘤坏死因子-α是否能够促进HepG2肝细胞脂质积聚，并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组（TNF-α2ng/mL或20ng/mL）、软脂酸组（PA0.08mM或0.2mM）及联合组（TNF-α2ng/mL联合PA0.08mM、TNF-α2ng/mL联合PA0.2mM、TNF-α20ng/mL联合PA0.08mM或TNF-α20ng/mL联合PA0.2mM），处理24h，应用化学酶促-比色法定量检测细胞内TG含量。进一步选取TNF-α20ng/mL和软脂酸0.08mM，通过油红O染色观察HepG2细胞内脂质积聚情况；荧光定量PCR检测HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA表达水平；Western blot检测mTOR、S6K磷酸化水平以及SREBP-1、FAS、ACCα的蛋白表达水平。结果①单纯TNF-α刺激（2ng/ml、20ng/ml）增加HepG2细胞内脂质积聚（P＜0.05）；TNF-α与软脂酸联合处理显著增加胞内TG含量（P＜0.05）；0.2mM软脂酸处理也使胞内TG含量轻度增加（P＜0.05），而0.08mM软脂酸对肝细胞内的TG水平没有影响。②油红O染色进一步显示，TNF-α促进肝细胞内脂质积聚。③定量PCR和Western blot结果显示，单纯TNF-α组与空白对照组相比，HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA和蛋白表达均增加（P＜0.05）；联合组与软脂酸组相比，肝细胞内SREBP-1、FAS、ACCα的mRNA和蛋白表达水平明显上调（P＜0.05）。④W estern blot显示，单纯TNF-α组与空白对照组相比，HepG2细胞mTOR、S6K磷酸化水平升高（P＜0.05）；联合组与软脂酸组相比，mTOR、S6K磷酸化水平明显上调（P＜0.05）。结论TNF-α促进HepG2肝细胞内脂质积聚，上调mTOR、S6K磷酸化水平以及SREBP-1、FAS、ACCα的表达。

全文目录

符号说明  5-7
摘要  7-9
ABSTRACT  9-11
前言  11-13
材料与方法  13-25
结果  25-30
讨论  30-33
全文总结  33-34
参考文献  34-37
文献综述  37-44
  参考文献  41-44
致谢  44-45
攻读硕士学位期间发表论文  45-46

TNF-α促进HepG2肝细胞脂质积聚及其机制初探

内容摘要

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