学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

艾灸健脾作用及其与肠上皮细胞线粒体结构和功能相关性的实验研究

作　者: 彭艳
导　师: 易受乡
学　校: 湖南中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 艾灸 足三里 脾虚 线粒体 线粒体酶 能量代谢 四君子汤
分类号: R285.5
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
下　载: 122次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的：通过观察艾灸对脾虚大鼠的症状、小肠消化吸收功能、肠上皮细胞膜蛋白物质转运能力及线粒体结构和功能的影响,探讨艾灸健脾作用及其与脾虚大鼠肠上皮能量代谢各环节的相关性,阐明艾灸健脾的分子生物学机制,为艾灸温补脾胃理论提供实验依据。方法：本研究分为三个部分。第一部分：40只健康SD大鼠随机分为4组,即A空白对照组,B脾虚模型组,C艾灸穴位组(脾虚+艾条温和灸组),D中药对照组(脾虚+四君子汤组),每组10只。以大黄水浸剂灌胃建立大鼠脾虚模型,记录造模前后食量、体重、拉尾抵抗时间及脾虚症状总积分,直尺测量小肠推进率,间苯三酚法测定血清D-木糖含量。第二部分：动物分组及处理方法同第一部分。取大鼠空肠上皮细胞,比色法测定空肠上皮细胞三磷酸腺苷(ATP)含量及Na+—K+—ATP酶(Na+—K+—ATPase)和Ca2+—Mg2+—ATP酶(Ca2+—Mg2+—ATPase)活性,免疫组织化学方法测定空肠上皮细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT-1)的表达。第三部分：动物分组及处理方法同第一部分。电镜观察大鼠空肠上皮细胞线粒体超微结构,酶联免疫法(ELISA)测定空肠上皮琥珀酸脱氢酶(SDH)和细胞色素氧化酶(CC0或COX)含量,免疫印记(Western—Blot)方法测定空肠上皮细胞内细胞色素氧化酶亚基I (COX I)蛋白表达。1、大黄水浸剂灌胃14天后,与A组比较,B组脾虚模型大鼠体重增长速度减慢,食量下降,拉尾抵抗时间减少(P<0.01),脾虚症状积分显著增加(P<0.01),造模成功。C组艾灸穴位组和D组中药对照组大鼠脾虚症状不明显,食量增长率、体重增长率及拉尾抵抗时间差均显著优于B组(P<0.01),脾虚症状积分显著低于B组(P<0.01),与A组比较无显著差异,D组略优于C组,两组比较无显著性差异。2、B组大鼠小肠推进率和血清D-木糖含量较A组显著降低(P<0.05或P<0.01)；C组和D组大鼠小肠推进率及血清D-木糖含量显著高于B组(P<0.05或P<0.01),与A组比较无显著差异。C组血清D-木糖含量略高于D组,D组小肠推进率略优于C组,C、D两组比较无显著性差异。3、B组大鼠空肠上皮组织ATP含量、Na+-K+-ATPase和Ca2+—Mg2+—ATPa s e活性,及GLUT—1表达较A组显著降低(P<0.05)；C组大鼠空肠上皮细胞ATP含量、Na+—K+—ATPase和Ca2+—Mg2+—ATPase活性显著高于B组(P<0.05或P<0.01)。D组略优于C组,两组比较无显著性差异。C组大鼠空肠上皮细胞GLUT-1表达显著高于B组(P<0.01),而D组与B组比较无显著性差异4、B组空肠上皮细胞线粒体超微结构严重破坏,空肠上皮细胞SDH和CCO含量及COX I表达较A组显著降低(P<0.05或P<0.01)；C、D两组空肠上皮细胞线粒体超微结构轻微损伤,空肠上皮细胞SDH和CCO含量显著高于B组(P<0.05或P<0.01),C组略高于D组,C、D两组比较无显著性差异。C组和D组大鼠空肠上皮细胞COX I表达量显著高于B组(P<0.01),D组略高于C组,C、D两组比较无显著性差异。1、艾灸能显著降低大鼠脾虚症状积分,促进脾虚大鼠体重、食量及体力恢复,提示艾灸具有健脾效应,可改善大鼠脾虚证。2、艾灸能显著增加脾虚大鼠小肠推进率及血清D-木糖含量,提示艾灸可通过改善脾虚模型大鼠小肠运动及消化吸收功能,促进脾虚症状恢复3、艾灸能显著增加脾虚大鼠小肠上皮细胞ATP含量、ATP酶活性及GLUT-1表达,提示艾灸可促进脾虚模型大鼠小肠上皮细胞ATP的生成,增加细胞膜蛋白的含量,改善物质跨膜转运。4、艾灸能促进脾虚大鼠小肠上皮细胞线粒体结构恢复,增加呼吸链酶含量及其亚基蛋白的表达,提示艾灸可通过促进线粒体结构和功能的恢复,改善能量代谢。5、鉴于“脾主运化”功能与线粒体和能量代谢存在相关性,艾灸温补脾胃的效应可能与其修复线粒体结构,改善线粒体氧化酶活性,增强细胞能量代谢,从而加强小肠上皮细胞物质转运能力,促进小肠运动及吸收功能恢复有关。6、艾灸与四君子汤均有健脾作用,能够改善脾虚证,但对能量代谢各环节的调节作用略有差异。四君子汤在促进脾虚大鼠食量、体重及体力恢复,改善小肠运动功能,增加小肠上皮细胞ATPase活性及线粒体COX I蛋白表达等方面优于艾灸；而艾灸在降低大鼠脾虚症状总积分,改善小肠吸收功能,促进小肠上皮细胞ATP生成,增加膜蛋白GLUT-1含量,及提高线粒体酶活性等方面优于四君子汤。

全文目录


中文摘要  8-12
Abstract  12-16
中英文对照表  16-17
引言  17-20
第一部分 艾灸对脾虚大鼠小肠消化吸收功能的影响  20-35
  材料与方法  20-26
    1. 材料  20-21
      1.1 实验动物  20
      1.2 主要材料  20-21
      1.3 主要试剂  21
      1.4 主要仪器设备  21
    2. 方法  21-26
      2.1 动物分组  21-22
      2.2 动物造模  22
      2.3 穴位定位  22
      2.4 艾灸方法  22-23
      2.5 实验步骤  23
      2.6 标本提取及处理方法  23
      2.7 一般症状观察  23-24
      2.8 小肠推进率测定  24-25
      2.9 血清D-木糖含量测定  25
      2.10 统计方法  25-26
  结果与分析  26-35
    1. 艾灸对脾虚大鼠一般症状的影响  26-29
    2. 艾灸对脾虚大鼠小肠推进率的影响  29-30
    3. 艾灸对脾虚大鼠血清D-木糖含量的影响  30-31
    4. 讨论  31-35
      4.1 脾虚模型的选择与制备  31-32
      4.2 脾虚与胃肠道功能改变  32-33
      4.3 艾灸对脾虚大鼠小肠消化吸收功能的  33-35
第二部分 艾灸对脾虚大鼠胃肠组织ATP、ATP酶及Glut1的影响  35-47
  材料与方法  35
  1. 材料  35-36
    1.1 实验动物  35
    1.2 主要材料  35
    1.3 主要试剂  35-36
    1.4 主要仪器设备  36
  2. 方法  36-40
    2.1 动物分组  36
    2.2 动物造模  36
    2.3 穴位定位  36
    2.4 艾灸方法  36
    2.5 实验步骤  36
    2.6 标本提取及处理方法  36
    2.7 空肠上皮细胞ATP含量测定  36-37
    2.8 空肠上皮细胞Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性测定  37-38
    2.9 空肠上皮细胞Glut1表达  38-39
    2.10 统计学方法  39-40
  结果与分析  40-47
    1. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞ATP含量测定的影响  40-41
    2. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性的影响  41-42
    3. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞Glut1表达的影响  42-43
    4. 讨论  43-47
      4.1 物质跨膜转运与ATP供能  43-44
      4.2 ATP酶与ATP供能  44-45
      4.3 Glut与物质转运功能  45
      4.4 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞ATP、ATP酶及Glut-1的影响  45-47
第三部分 艾灸对脾虚大鼠小肠上皮细胞线粒体结构及呼吸链酶含量的影响  47-60
  材料与方法  47
  1. 材料  47-48
    1.1 实验动物  47
    1.2 主要材料  47
    1.3 主要试剂  47-48
    1.4 主要仪器设备  48
  2. 方法  48-54
    2.1 动物分组  48
    2.2 动物造模  48
    2.3 穴位定位  48
    2.4 艾灸方法  48
    2.5 实验步骤  48
    2.6 标本提取及处理方法  48-49
    2.7 空肠上皮细胞线粒体超微结构观察  49
    2.8 空肠上皮细胞SDH和CCO活性测定  49-50
    2.9 空肠上皮细胞COX Ⅰ蛋白含量测定  50-53
    2.10 统计学方法  53-54
  结果与分析  54-60
    1. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞线粒体超微结构的影响  54-55
    2. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞SDH和CCO活性的影响  55-56
    3. 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞COXⅠ蛋白含量的影响  56-57
    4. 讨论  57-60
      4.1 线粒体结构  57
      4.2 线粒体功能  57-58
      4.3 生物氧化产能过程与呼吸链酶复合体  58-59
      4.4 艾灸对脾虚大鼠空肠上皮细胞线粒体结构及呼吸链酶含量的影响  59-60
第四部分 全文讨论  60-77
  1. 艾灸温补脾胃作用  60-64
    1.1 中医学对艾灸温补作用的论述  60-61
    1.2 艾灸温补脾胃作用的临床研究概况  61-62
    1.3 现代医学对艾灸作用机制的认识  62-64
  2. 中医学对"脾"及脾虚的认识  64-66
    2.1 中医学关于脾的生理功能的论述  64
    2.2 中医学对脾虚证病因病机的认识  64-65
    2.3 中医学防治脾虚证的原则及方药  65-66
  3. 现代医学对"脾"及脾虚证研究的报道  66-73
    3.1 现代医学对中医"脾"的认识  66-67
    3.2 "脾主运化"与胃肠消化吸收功能  67
    3.3 "脾主运化"与物质转运  67-69
    3.4 "脾主运化"与线粒体能量代谢  69-71
    3.5 中药健脾作用机制研究概况  71-73
  4. 艾灸改善脾虚证的作用机制的探讨  73-76
    4.1 艾灸促进消化吸收,改善"脾主运化"功能  73
    4.2 艾灸增加ATP供能,促进肠上皮细胞膜转运,促进"脾主运化"功能  73-74
    4.3 艾灸促进线粒体结构恢复,提高氧化酶活性,加速线粒体氧化磷酸化,提高"脾主运化"功能  74-75
    4.4 艾灸与四君子汤均有健脾作用,但对能量代谢各环节的调节有所差异  75-76
  5. 本项目特色及创新之处  76
  6. 本研究存在的问题与展望  76-77
结论  77-79
参考文献  79-85
致谢  85-86
附录  86-92
  参考文献  89-92
在读期间参与的课题及发表的论文  92

相似论文

  1. 西施舌精子冷冻保存及其冷冻损伤机理研究,S968.3
  2. 蛋白磷酸酶2A Cα亚基敲除所致心脏能量代谢重塑的研究,Q78
  3. 危北海学术思想与临床经验总结及应用胃肠复元法对脓毒症肠功能障碍治疗作用的探讨,R249.2
  4. 南京地区西花蓟马Frankliniella occidentalis （Pergande）的发生调查及其线粒体基因组研究,S433
  5. 一水肌酸对肉鸭胴体组成、肉品质及宰后肌肉能量代谢的影响研究,S834.5
  6. 寄主型和迁飞型棉蚜在交配行为、mtDNA与共生菌相关基因上的分化,S433
  7. 一个芥菜型油菜品种资源的线粒体基因组序列分析,S565.4
  8. MCFP对肝癌细胞生物行为学影响初步研究,R735.7
  9. 18氟—氟代脱氧葡萄糖诱导Eca-109食管癌细胞凋亡的初步研究,R735.1
  10. 陆地棉细胞质雄性不育及其恢复机制的研究,S562
  11. 脱氧雪腐镰刀菌烯醇诱导人结肠癌细胞凋亡线粒体信号转导机制的研究,R735.35
  12. 不同电压击昏对宰后鸡肉品质的影响,S831
  13. 薯蓣皂苷诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡及作用机制研究,R285.5
  14. 营养组合物对再生障碍性贫血小鼠线粒体损伤恢复作用的研究,R556.5
  15. 二氮嗪后处理在大鼠心肌线粒体比较蛋白质组学的研究,R965
  16. 2，3’，4，4’-四甲氧基联苯体外诱导MGC-803细胞凋亡机制的初步研究,R735.2
  17. 过度训练及丹参注射液对大鼠心肌细胞凋亡的影响研究,G804.2
  18. 蚜虫代表物种的线粒体基因组研究,Q953
  19. 乌苏里拟鲿（Pseudobagrus ussuriensis）不同群体间的遗传多样性比较研究,S917.4
  20. 不同时间段中低强度运动对能量代谢的影响,G804.2
  21. 以酿酒酵母为替代宿主研究嗜肺军团菌效应蛋白的功能,R378

中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
© 2012 www.xueweilunwen.com