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2，3’，4，4’-四甲氧基联苯体外诱导MGC-803细胞凋亡机制的初步研究

作　者: 隋新
导　师: 龚显峰
学　校: 黑龙江大学
专　业: 有机化学
关键词: 2,3’,4,4’-四甲氧基联苯细胞凋亡 MGC-803细胞线粒体
分类号: R735.2
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

本文研究了2,3’,4,4’-四甲氧基联苯对人胃腺癌MGC-803细胞的作用。在合成原苏木素A的过程中,合成了12种联苯类化合物。通过MTT法测定了12种化合物的细胞毒作用,并且发现了2,3’,4,4’-四甲氧基联苯的IC50值最小。因此,用细胞克隆,荧光染色,DNA片段化,蛋白印迹及流式分析测定2,3’,4,4’-四甲氧基联苯诱导肿瘤细胞死亡的机制。研究结果表明,2,3’,4,4’-四甲氧基联苯以时间和剂量依赖性抑制MGC-803细胞增殖。在细胞凋亡过程中,线粒体膜电位降低,导致细胞色素c的释放,触发caspase级联反应,同时caspase-3的特定底物PARP的降解。另外,NAC可以抑制2,3’,4,4’-四甲氧基联苯诱导MGC-803细胞凋亡,结果表明细胞发生氧化损伤,激活ROS释放。从而得出结论:这些结果表明2,3’,4,4’-四甲氧基联苯通过线粒体途径诱导细胞凋亡,2,3’,4,4’-四甲氧基联苯可能用于肿瘤疾病的治疗。

全文目录

中文摘要  3-4
Abstract  4-7
符号说明  7-8
第1章绪论  8-17
  1.1 肿瘤药物研究进展  8-9
  1.2 细胞凋亡  9-17
    1.2.1 概念  9-10
    1.2.2 细胞发生凋亡的形态学特征  10-11
    1.2.3 细胞凋亡调控因素  11-15
    1.2.4 细胞凋亡的信号转导(线粒体途径)  15-17
第2章联苯类化合物及相关实验方法的研究  17-24
  2.1 联苯类化合物研究进展  17-18
  2.2 肿瘤细胞培养方法  18-20
    2.2.1 细胞复苏  19
    2.2.2 细胞冻存  19-20
  2.3 细胞凋亡的常用检测方法  20-23
    2.3.1 细胞活力的检测方法  20-21
    2.3.2 形态学鉴定  21
    2.3.3 细胞凋亡的生化学特征检测方法  21-22
    2.3.4 Western blot  22
    2.3.5 流式细胞术  22-23
  2.4 本章小结  23-24
第3章 2,3',4,4'-四甲氧基联苯体外诱导MGC-803 细胞凋亡机制的研究  24-59
  3.1 实验部分  24-38
    3.1.1 实验材料  24-28
    3.1.2 实验方法  28-38
  3.2 实验结果  38-55
    3.2.1 联苯类化合物的细胞增殖抑制活性筛选结果  38-39
    3.2.2 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对 MGC-803 细胞生长的抑制作用  39-40
    3.2.3 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对 MGC-803 细胞集落形成的影响  40-41
    3.2.4 2,3',4,4'-四甲氧基联苯诱导MGC-803 细胞凋亡的形态学变化  41
    3.2.5 DNA 电泳观察  41-42
    3.2.6 酶联免疫吸附法检测2,3',4,4'-四甲氧基联苯诱导 MGC-803 细胞的凋亡率  42-44
    3.2.7 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对 MGC-803 细胞线粒体膜电位的影响  44-45
    3.2.8 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对 Cyt c 分布的影响  45-46
    3.2.9 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对 Bcl-2 表达的影响  46-47
    3.2.10 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对Caspase-3,-9 及PARP 蛋白表达的影响  47
    3.2.11 2,3',4,4'-四甲氧基联苯对Caspase 活性的影响  47-50
    3.2.12 Capase-3,9 抑制剂提高MGC-803 细胞的生存率  50-51
    3.2.13 抗氧化剂，抗氧化酶，抑制剂对2,3',4,4'-四甲氧基联苯细胞毒作用的影响  51-55
  3.3 讨论  55-58
  3.4 本章小结  58-59
结论  59-60
展望  60-61
参考文献  61-69
致谢  69-70
攻读硕士学位期间发表的学术论文  70

2，3’，4，4’-四甲氧基联苯体外诱导MGC-803细胞凋亡机制的初步研究

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