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白藜芦醇对环境因子致氧化损伤干预作用的生化分析

作　者: 李芳
导　师: 刘选明
学　校: 湖南大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 白藜芦醇 阿霉素 酒精 UVC 氧化损伤
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


机体在遭受各种有害刺激时，体内高活性分子（自由基）如活性氧自由基（ROS）和活性氮自由基（RNS）产生过多，可使机体内部的大分子核酸、脂质、蛋白质等发生氧化损伤，继而诱发各种疾病，如肥胖、糖尿病、皮肤疾病、衰老等。而氧化损伤可以通过多种代谢途径产生，如化学毒物、药物代谢、细胞呼吸、辐射、光照等。近年来，天然产物在保护细胞免受氧化损伤方面的作用受到了越来越多研究者的关注。白藜芦醇就是其中之一，它是从植物体内提取出的天然多酚类物质，研究表明，其对人体具有抗癌、消炎、抗病毒、抗氧化等一系列作用。因此，白藜芦醇成为了研究热点，有望将其开发成一种临床应用的天然药物。本研究则以模式细胞HeLa为研究对象，针对药物代谢、化学毒物及辐射分别选取阿霉素、酒精和UVC三种环境因子作为氧化损伤诱导因子建立氧化损伤的细胞模型，考查白藜芦醇对各因子致氧化损伤的作用研究，并采用细胞水平、生化分析和分子生物学水平的分析手段来阐述白藜芦醇对细胞受到环境因子氧化损伤的最佳干预作用，以期为白藜芦醇的应用提供理论支持。主要结果如下：1、白藜芦醇对阿霉素致氧化损伤的修复作用研究。采用MTT法筛选的阿霉素损伤模型为2μg/mL，12h，白藜芦醇最佳干预效果为50μM，修复24h，存活率提高了25.23%。在细胞水平，生化分析和分子生物学分析的手段均证明白藜芦醇能通过增加细胞内还原物质或减少氧化物质实现对阿霉素致氧化损伤的修复作用，这为白藜芦醇用于特效药物辅药来减少药物毒副作用提供了理论基础和实施建议。2、白藜芦醇对酒精性氧化损伤的修复作用研究。采用MTT法筛选的酒精损伤模型为4.8%，12h，白藜芦醇最佳干预效果为20μM，修复24h，存活率提高了9.6%。在细胞水平，生化分析和分子生物学分析的手段均证明白藜芦醇能通过增加细胞内还原物质和减少氧化物质来修复酒精性氧化损伤，这为白藜芦醇用于减少酒精毒副作用提供了理论基础和实施建议。3、白藜芦醇对UVC致氧化损伤的保护作用研究。采用MTT法筛选的UVC损伤模型为400J·m-2，白藜卢醇最佳干预效果为50jaM，保护30min，存活率提高了59.5%。在细胞水平，生化分析和分子生物学分析的手段均证明白藜芦醇能通过增加细胞内还原物质和减少氧化物质来保护细胞减缓UVC氧化损伤，这为白藜芦醇开发成紫外防晒剂提供了理论基础和实施建议。

全文目录


摘要  5-6
Abstract  6-8
目录  8-10
插图索引  10-11
插表索引  11-12
第1章 绪论  12-22
  1.1 氧化损伤  12-15
    1.1.1 蛋白质氧化损伤  12-14
    1.1.2 脂质氧化损伤  14
    1.1.3 DNA氧化损伤  14-15
  1.2 氧化损伤与疾病  15-17
    1.2.1 氧化损伤与肥胖  15-16
    1.2.2 氧化损伤与糖尿病  16
    1.2.3 氧化损伤与皮肤疾病  16
    1.2.4 氧化损伤与衰老  16-17
  1.3 白藜芦醇的研究进展  17-21
    1.3.1 白藜芦醇的抗癌作用  17-18
    1.3.2 白藜芦醇的抗心血管疾病的作用  18-19
    1.3.3 白藜芦醇的抗菌消炎作用  19-20
    1.3.4 白藜芦醇的抗氧化作用  20-21
  1.4 论文研究思路  21-22
第2章 白藜芦醇对阿霉素致氧化损伤的修复作用研究  22-36
  2.1 前言  22
  2.2 实验部分  22-30
    2.2.1 实验仪器  22-23
    2.2.2 材料与试剂  23-24
    2.2.3 实验方法  24-30
  2.3 实验结果与分析  30-35
    2.3.1 白藜芦醇纯度鉴定  30
    2.3.2 白藜芦醇的毒性实验  30-31
    2.3.3 阿霉素致氧化损伤模型建立  31
    2.3.4 白藜芦醇干预阿霉素致氧化损伤  31-32
    2.3.5 白藜芦醇修复阿霉素致氧化损伤细胞学分析  32-33
    2.3.6 白藜芦醇修复阿霉素致氧化损伤的生化分析  33-34
    2.3.7 白藜芦醇修复阿霉素致氧化损伤分子生物学分析  34-35
  2.4 本章小结  35-36
第3章 白藜芦醇对酒精性氧化损伤的保护作用研究  36-43
  3.1 前言  36
  3.2 实验部分  36-37
    3.2.1 实验仪器  36
    3.2.2 材料与试剂  36-37
    3.2.3 实验方法  37
  3.3 结果与分析  37-41
    3.3.1 酒精性氧化损伤模型建立  37-38
    3.3.2 白藜芦醇干预酒精致氧化损伤  38
    3.3.3 白藜芦醇保护酒精性氧化损伤的细胞学分析  38-40
    3.3.4 白藜芦醇保护酒精性氧化损伤的生化分析  40
    3.3.5 白藜芦醇保护酒精性氧化损伤的分子生物学分析  40-41
  3.4 本章小结  41-43
第4章 白藜芦醇对UVC致氧化损伤的作用研究  43-49
  4.1 前言  43
  4.2 实验部分  43-44
    4.2.1 实验仪器  43
    4.2.2 材料与试剂  43-44
    4.2.3 实验方法  44
  4.3 结果与分析  44-48
    4.3.1 UVC损伤模型的建立  44
    4.3.2 白藜芦醇对UVC损伤的干预作用  44-45
    4.3.3 白藜芦醇保护UVC损伤的细胞学分析  45-47
    4.3.4 白藜芦醇保护UVC损伤的生化分析  47
    4.3.5 白藜芦醇保护UVC氧化损伤的分子生物学分析  47-48
  4.4 本章小结  48-49
结论  49-51
参考文献  51-58
附录A 攻读硕士学位期间发表的论文  58-59
致谢  59

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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