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颞叶内侧癫痫患者海马区胶质细胞中GFAP、GLAST及GLT-1的表达

作　者: 罗景华
导　师: 任榕娜；杨朋范
学　校: 福建医科大学
专　业: 儿科学
关键词: 胶质细胞 GFAP GLAST GLT-1 颞叶内侧癫痫海马谷氨酸转运体神经元丢失影响因素
分类号: R742.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

【目的】研究胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸-胱氨酸转运体(GLAST)及神经胶质谷氨酸转运体(GLT-1)在颞叶内侧癫痫患者海马区胶质细胞中的表达情况,探讨难治性癫痫的发病机制;探讨影响颞叶癫痫患者海马组织中神经元丢失的相关因素。【方法】第一、二部分:取40例难治性颞叶内侧癫痫患者在手术中切除的海马组织,根据在光镜下观察到的神经元丢失情况,分为海马硬化组(A组)23例和海马非硬化组(B组)17例。通过免疫组化法检测两组中GFAP、GLAST、GLT-1蛋白阳性表达的情况;通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测两组中GLASTmRNA及GLT-1mRNA的表达情况。利用quantity one凝胶成像管理系统进行图像分析,检测GLAST基因,GLT-1基因,β-actin条带的灰度值,结果以GLAST/β-actin,GLT-1/β-actin条带的灰度值比进行半定量分析。第三部分:对55例颞叶癫痫患儿临床资料进行回顾性病例对照研究,运用单因素及多因素方法分析其海马组织中神经元丢失的发生与临床病理因素间的关系。【结果】1、硬化组(A组)与非硬化组(B组)相比,A组中胶质细胞明显增生、肥大,突起增多,有些胶质细胞突起交错成网状。2、A组中海马总区域、CA1区、CA2区及齿状回中GFAP蛋白的表达量O.D.值为别为:(55.70±26.92)、(102.52±23.55)、(34.46±8.69)、(48.01±6.24 );B组中相应区域中GFAP的表达量为别为: (26.54±7.85)、(36.05±3.71)、(17.03±1.87)、(24.44±2.98)。两组间比较,各区之间差别有统计学意义(P<0.01)。3、A组中海马总区域、齿状回中GLAST蛋白的表达量O.D.值分别为:(40.50±6.02)、(36.73±6.50);B组中相应区域中GLAST蛋白的表达量分别为:(41.09±5.92)、(43.29±10.61)。两组间比较差别无统计学意义(P>0.05)。A组中CA1区、CA2区中GLAST蛋白的表达量O.D.值分别为:(45.84±7.23)、(52.67±11.51);B组中相应区域中GLAST蛋白的表达量分别为:(48.56±10.62)、(39.39±9.48)。两组间比较差别有统计学意义(P<0.05)。4、A组中海马总区域、CA1区、CA2区中GLT-1蛋白的表达量O.D.值分别为:(102.54±3.78 )、(50.57±28.60)、(114.53±3.84);B组中海马总区域、CA1区、CA2区中GLT-1蛋白的表达量O.D.值分别为:(178.17±61.23)、(123.40±3.58)、(109.27±4.14)。两组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。A组B组与中齿状回中GLT-1蛋白的表达量分别为:( 107.41±3.97)、(107.44±4.21)。两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。5、A组中GLASTmRNA的相对表达量为(0.665±0.22),与B组(0.703±0.16)比较,两组间差别无显著性(P>0.05)。6、A组中GLT-1mRNA的相对表达量为(1.025±0.18),与B组(1.032±0.21)比较,两组间差别无显著性(P>0.05)。7、55例颞叶癫痫患儿中,海马神经元丢失47例,总发生率85.45%(47/55) ,单因素分析发现性别、癫痫家族史、有无先兆、有无损伤因子、用药的种类(单药或联合用药)与癫痫患者海马神经元的丢失程度无关,而发病年龄(≤3岁)、发病病程(>2年)、发作频率(≥1次/月)、发作持续时间(≥60s)、发作的类型(全身性发作)等为其影响因素。8、多因素Logistic回归结果显示发作频率、发作持续时间、发作的类型为海马神经元丢失发生的独立影响因素。【结论】1、难治性颞叶内侧癫痫患者海马各区中GFAP表达增加,提示癫痫反复发作后胶质细胞反应性增生。2、GLAST、GLT-1在海马CA1区表达减少、CA2区表达量反而增加,提示癫痫反复发作后海马区谷氨酸转运体的重新分布可能是难治性颞叶癫痫发病机制之一。3、谷氨酸转运体GLASTmRNA及GLT-1mRNA没有变化,而其蛋白表达减少,提示谷氨酸转运体转录后机制异常可能是难治性颞叶癫痫的发病机制之一。4、多因素分析结果证实癫痫患者海马神经元丢失的发生与发病年龄、发病病程、发作频率、发作持续时间、发作的类型等有关,对癫痫患者早期干预治疗十分重要。

全文目录

英文缩略词表  4-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-10
前言  10-12
第一部分 GFAP、GLAST、GLT-1 蛋白在颞叶癫痫海马胶质细胞中的表达  12-22
  引言  12
  试验材料  12-14
  实验方法  14-16
  结果  16-18
  讨论  18-21
  小结  21-22
第二部分 GLASTmRNA 及 GLT-1mRNA 在颞叶癫痫海马胶质细胞中的表达  22-30
  引言  22
  试验材料  22-23
  实验方法  23-26
  结果  26-27
  讨论  27-29
  小结  29-30
第三部分影响颞叶癫痫海马区神经元丢失的相关因素分析  30-35
  引言  30
  研究对象  30
  方法  30-32
  结果  32-33
  讨论  33-34
  小结  34-35
结论  35-36
附图  36-42
参考文献  42-48
致谢  48-49
综述  49-56
  参考文献  53-56
研究生期间发表论文目录  56

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