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植物花粉促干细胞增殖及辐射诱导氧化损伤的防护作用

作　者: 王丽
导　师: 王振宇
学　校: 哈尔滨工业大学
专　业: 生物化工
关键词: 花粉 干细胞 增殖 抗氧化 辐射防护
分类号: Q942
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


花粉是植物的全营养库，富含多种活性物质，具有抗肿瘤、抗辐射、促进淋巴细胞增殖等作用。本文选取花粉作为研究对象，系统的研究了不同花粉体外抗氧化活性、促骨髓干细胞增殖活性，以及荞麦花粉水提物对小鼠和干细胞辐射诱导氧化伤害的防护作用，对研发低毒、有效的辐射防护剂有重要的意义。本研究主要内容如下：选取绿茶花粉、荞麦花粉等12种花粉为原料，经蒸馏水、70%乙醇超声提取，以ABTS及羟基自由基清除率为指标，测定其体外抗氧化能力，筛选出抗氧化能力相对较强的花粉：银杏花粉、荞麦花粉、五味子花粉和荷花花粉。采用MTT法测定12种花粉水提物及70%醇提物对大鼠股骨骨髓干细胞的增殖活性，结果显示，花粉水提取物对干细胞的促进作用高于醇提取物，且荞麦花粉水提物在较高浓度时（1mg/mL）促骨髓干细胞增殖活性最高，可达到74%。本课题采用60Coγ-射线构建辐射模型，对小鼠连续灌胃荞麦花粉水提物（WEPB）21天后发现，荞麦花粉水提物对小鼠白细胞、脾脏和肝脏等免疫器官均具有保护作用，且能显著提高单核-巨噬细胞的吞噬能力、脾淋巴细胞的转化增殖能力、小鼠组织SOD活性、小鼠骨髓DNA含量及骨髓干细胞存活率，降低脂质过氧化的产物MDA含量及小鼠骨髓微核率，说明荞麦花粉水提物主要是通过提高内源性抗氧化物酶活性而增强抗氧化能力、免疫能力以及促进干细胞增殖而降低DNA损伤达到保护小鼠免受辐射损伤的作用。荞麦花粉水提物主要组成成分为糖（75%）及蛋白质（6%）。氨基酸分析发现，荞麦花粉水提物富含多种氨基酸，其中谷氨酸含量最高，其次为天冬氨酸，赖氨酸、苏氨酸、丝氨酸。GS-MS分析，证实荞麦花粉水提物单糖组分主要由核糖、鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖组成，其摩尔比是0.35：0.95：27.78：0.93：1.70：13.19：16.16。

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-10
第1章 绪论  10-28
  1.1 立题背景及研究意义  10-11
  1.2 植物花粉国内外研究现状  11-15
    1.2.1 花粉来源  11
    1.2.2 蜂花粉化学组成  11-12
    1.2.3 花粉的药理作用  12-15
  1.3 骨髓干细胞国内外研究现状  15-20
    1.3.1 骨髓干细胞及其特点  15-17
    1.3.2 骨髓干细胞的分离和鉴定  17-19
    1.3.3 骨髓干细胞增殖研究  19-20
  1.4 辐射防护剂国内外研究现状  20-26
    1.4.1 电离辐射及其伤害  20-21
    1.4.2 辐射防护剂的研究  21-25
    1.4.3 辐射防护机制  25-26
  1.5 课题研究内容  26-28
第2章 材料与方法  28-39
  2.1 实验试剂及材料  28-29
  2.2 实验仪器及设备  29
  2.3 实验原料  29-30
  2.4 花粉的分离提取及体外抗氧化活性分析  30
    2.4.1 花粉提取物的分离提取  30
    2.4.2 花粉提取物体外抗氧化活性的测定  30
  2.5 花粉提取物的活性成分分析  30-33
    2.5.1 总多酚含量测定  30-31
    2.5.2 总黄酮含量测定  31-32
    2.5.3 蛋白质含量测定  32
    2.5.4 总糖含量测定  32-33
  2.6 花粉提取物促骨髓干细胞增殖活性研究  33-34
    2.6.1 骨髓干细胞的提取  33-34
    2.6.2 骨髓干细胞增殖实验  34
    2.6.3 辐射对骨髓干细胞的氧化损伤研究  34
  2.7 荞麦花粉水提物对小鼠的辐射防护作用  34-37
    2.7.1 实验动物的来源及要求  34
    2.7.2 实验动物的饲养  34
    2.7.3 昆明小鼠的给药与辐射模型建立  34-35
    2.7.4 辐射指标的测定  35-37
  2.8 荞麦花粉水提物成分分析  37-39
    2.8.1 荞麦花粉水提物活性成分  37
    2.8.2 氨基酸组成分析  37
    2.8.3 单糖组成分析  37-39
第3章 花粉提取物体外抗氧化活性及活性成分分析  39-49
  3.1 花粉提取物体外抗氧化活性比较  39-43
    3.1.1 不同花粉提取物清除 ABTS 自由基能力比较  39-41
    3.1.2 不同花粉提取物清除羟基自由基能力比较  41-43
  3.2 花粉提取物活性成分分析  43-48
    3.2.1 总多酚含量分析  43-44
    3.2.2 黄酮含量分析  44-45
    3.2.3 总糖含量分析  45-46
    3.2.4 蛋白质含量分析  46-48
  3.3 本章小结  48-49
第4章 花粉提取物促骨髓干细胞增殖活性研究  49-54
  4.1 不同花粉促骨髓干细胞增殖活性研究  49-51
  4.2 不同花粉的活性功能比较  51-52
  4.3 荞麦花粉水提物对辐射后骨髓干细胞存活率的影响  52
  4.4 本章小结  52-54
第5章 荞麦花粉对小鼠辐射诱导氧化伤害的防护  54-67
  5.1 辐射小鼠的体重变化  54-55
  5.2 荞麦花粉水提物对辐射小鼠免疫器官的影响  55-56
  5.3 荞麦花粉水提物对辐射小鼠碳廓清和脾淋巴细胞增殖能力的影响  56-57
  5.4 荞麦花粉水提物对辐射小鼠白细胞的影响  57
  5.5 荞麦花粉水提物对辐射小鼠各组织 SOD 活力的影响  57-59
  5.6 荞麦花粉水提物对辐射小鼠各组织 MDA 含量的影响  59-60
  5.7 荞麦花粉水提物对辐射小鼠骨髓微核抑制率的作用  60-61
  5.8 荞麦花粉水提物对辐射小鼠骨髓 DNA 含量的影响  61-62
  5.9 荞麦花粉水提物对辐射小鼠骨髓干细胞存活率的影响  62-63
  5.10 相关性分析  63-66
    5.10.1 荞麦花粉水提物提高抗氧化活性与辐射诱导小鼠氧化伤害防护作用的相关性  63-64
    5.10.2 荞麦花粉水提物促干细胞增殖活性与辐射诱导小鼠氧化伤害防护作用的相关性  64-66
  5.11 本章小结  66-67
第6章 荞麦花粉水提物活性成分的确定  67-71
  6.1 荞麦花粉水提物活性成分  67
  6.2 氨基酸分析  67-69
  6.3 单糖组成分析  69-70
  6.4 本章小结  70-71
结论  71-72
参考文献  72-83
攻读硕士期间发表的学术论文  83-85
致谢  85-86
个人简历  86

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中图分类: > 生物科学 > 植物学 > 植物细胞学
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