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低氧预适应小鼠海马中DNA甲基化转移酶、Reelin和蛋白磷酸酶-1的表达

作　者: 张姝
导　师: 邵国
学　校: 内蒙古科技大学包头医学院
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 低氧预适应甲基化转移酶 Reelin 蛋白磷酸酶-1 小鼠海马
分类号: Q42
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的利用小鼠低氧预适应模型，观察小鼠海马中Reelin和pp1的表达以及3种DNA甲基转移酶（DNMT1、DNMT3A和DNMT3B）的表达，从而了解DNA甲基化是否参与低氧预适应小鼠的脑保护作用。方法复制动物模型：选择6-8周龄，体重18-22克昆明雄性小鼠，随机分为3组。按以往的方法复制模型，即将小鼠置于含有新鲜空气、经过标定的125ml广口瓶内，以橡皮塞密闭，记时。动物一旦出现躁动，张口喘息，立即取出，转移到另一广口瓶内，密闭，记时，此次类推4次。实验分H0、H1、H4三组，H0为正常对照组，Hl为缺氧1次组，H4为重复缺氧4次组。各组取出后立即断头，迅速取出海马并置于低温冰箱中保存。用Real-time PCR法检测各组海马中三种甲基化转移酶（DNMT1、DNMT3A和DNMT3B）、Reelin和PP1在mRNA水平的表达。用Western blot分析法检测各组海马中三种甲基化转移酶（DNMT1、DNMT3A和DNMT3B）、Reelin和PP1蛋白水平的表达。结果Real-time PCR和Western blot结果分别以β-actin为内参得到各组相对值，经实验组和对照组比较得出：（1）与H0相比，H1和H4组中DNMT1mRNA和蛋白表达无明显变化，无统计学意义（P>0.05）；（2）与H0组相比，H1和H4组DNMT3AmRNA和蛋白表达明显减少，有统计学意义(P<0.05)；（3）与H0组相比，H4组DNMT3BmRNA和蛋白表达明显减少，有统计学意义(P<0.05)；（4）与H0组相比，H4组PP1mRNA和蛋白表达水平显著减少，有统计学意义(P<0.05)；（5）与H0组相比，H4组Reelin mRNA和蛋白水平的表达增加，有统计学意义(P<0.05)。结论低氧预适应小鼠大脑海马组织中DNMT3A、DNMT3B的表达降低，PP1表达增加，Reelin表达降低。这些分子的表达改变可能在低氧预适应的脑保护作用中扮演重要角色。

低氧预适应小鼠海马中DNA甲基化转移酶、Reelin和蛋白磷酸酶-1的表达

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