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营养剥夺促进上皮间质转化介导的肝癌细胞自噬依赖性侵袭

作　者: 杨斌
导　师: 郑启昌
学　校: 华中科技大学
专　业: 肝胆外科
关键词: 肝癌细胞 自噬 上皮间质转化 侵袭 营养剥夺
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 20次
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内容摘要


目的：明确营养剥夺对肝癌细胞侵袭性的影响及作用机制方法：以Hank’s平衡盐缓冲液对肝癌细胞系HepG2和BEL7402细胞进行营养剥夺培养，观察营养剥夺对肝癌细胞自噬活性、侵袭能力和上皮间质标志物表达的影响。构建并向肝癌细胞转染针对自噬基因Atg3的siRNA（siRNA-Atg3），比较转染siRNA-Atg3前后肝癌细胞在营养剥夺条件下自噬活性、侵袭能力和上皮间质标志物表达的改变。探讨自噬和上皮间质转化在营养剥夺诱导肝癌细胞侵袭力变化中的作用。结果：营养剥夺明显诱导肝癌细胞内LC3点状荧光的形成，并促使肝癌细胞内LC3-Ⅱ蛋白含量上升，p62蛋白含量下降。HepG2和BEL7402肝癌细胞的侵袭数也因营养剥夺显著增加(52632±5238，p<0.05；45223±3370，p<0.05)，同时尚伴有肝癌细胞上皮标记CK18的表达下降和间质标记fibronectin、基质金属蛋白酶（MMP9）的表达上升。转染siRNA-Atg3抑制肝癌细胞Atg3基因的表达可显著对抗营养剥夺诱导的肝癌细胞LC3-Ⅱ蛋白的含量上升和p62蛋白的含量下降，HepG2和BEL7402肝癌细胞的侵袭数也明显减少(21746±2619，p<0.05；20014±882，p<0.05)，同时还抑制营养剥夺诱导的肝癌细胞上皮标记CK18表达下降和间质标记fibronectin、基质金属蛋白酶（MMP9）表达上升。结论：自噬依赖性上皮间质转化是营养剥夺促进肝癌细胞侵袭的主要机制。

全文目录


英文缩略词表  7-8
摘要  8-9
Abstract  9-11
绪言  11-17
  一、选题背景  11-12
  二、研究目标  12-13
  三、研究内容  13
  参考文献  13-17
前言  17-18
材料与方法  18-23
结果  23-29
讨论  29-31
总结  31
参考文献  31-36
综述  36-48
  参考文献  41-48
致谢  48-49
攻读学位期间发表论文目录  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肝肿瘤
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