目的通过检测非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血SOCS1、SOCS3mRNA的表达及IFN-γ、IL-4的水平,观测其与正常对照之间的差异,探讨SOCS1、SOCS3是如何参与调控NAFLD的发生发展,及其与Thl/Th2平衡的关系。材料与方-法1.实验对象:收集60例研究对象,按是否有NAFLD分为两组:30例对照者,30例NAFLD患者。NAFLD诊断标准按2010年中华医学会肝脏病学分会非酒精性脂肪性肝病诊断标准。所有研究对象记录年龄、性别、身高、体重、收缩压、舒张压,采取血标本送实验室检查:肝肾功能、血脂、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白,计算体重指数(BMI,kg/m2)。2.实验试剂:(1)人IFN-γ、IL-4的ELISA检测试剂盒(2)人外周血淋巴而细胞分离液、Trizol试剂、SYBR RealTime RT-PCR KIT(TaKaRa)试剂盒。3.实验方法:采集入院首日患者静脉血,2ml于血常规管中,5ml于生化管中,血常规管分离单个核细胞,加入1mlTrizol,生化管3000r/min离心5min,吸取血清于一干燥EP管中,分别在管上做标记,均置-70度冰箱保存,备批量处理。待标本收集完毕,检测外周血IFN-γ、IL-4的水平及SOCS1、 SOCS3mRNA的表达。以SPSS16.0统计软件包进行统计分析,所有数据均采用平均值±标准差(X±s),计量资料应用t检验来评价试验结果,并进行Pearson相关分析,以P<0.05为判断差异显著性的标准。结果1、NAFLD组外周血IFN-γ的水平较对照组明显升高,差异有显著性,P<0.01,而IL-4的水平则无明显变化,IFN-γ/IL-4的比值升高,NAFLD组的外周血中Thl型细胞因子占优势;2、NAFLD组SOCS1mRNA的表达较对照组降低,P<0.05;SOCS3mRNA的表达较对照组显著升高,差异有显著性,P<0.01;3、NAFLD组BMI、TG、TC、ALT、GGT、LDL均高于对照组(P均<0.01),NAFLD组HDL水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4、SOCS3与BMI、TG、TC、ALT、GGT、IFN-γ呈显著正相关,P<0.01;与LDL呈正相关,P<0.05;与IL-4呈负相关,P<0.05;与HDL不相关,P>0.05,无统计学意义。SOCS1与IFN-γ呈负相关,与IL-4呈正相关,P<0.05。结论1、NAFLD组外周血Thl型细胞因子占优势,Th1/Th2失衡,IFN-γ的大量表达导致炎症反应,进而促进了NAFLD的发生发展;2、NAFLD组SOCS1mRNA的表达降低而SOCS3mRNA的表达显著升高,更证明了SOCS3作为一个引起NAFLD进展的危险因素,进一步导致胰岛素抵抗和瘦素抵抗等,促进了NAFLD的发展;3、NAFLD组可能由于SOCSl的表达的下降,对细胞因子IFN-y的信号传导抑制作用减弱,导致促炎因子IFN-y的大量表达,从而促进NAFLD疾病的进展。
|