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人精胺氧化酶单克隆抗体的制备、鉴定及应用
作 者: 李春红
导 师: 王艳林; 韩钰
学 校: 三峡大学
专 业: 生物化学与分子生物学
关键词: SMO 重组蛋白 单克隆抗体
分类号: R392.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
下 载: 35次
引 用: 0次
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内容摘要
目的:制备鼠抗人的精胺氧化酶(Spermine oxidase, SMO)单克隆抗体,分析该抗体的效价、抗原特异性、种属特异性及在Western blot,免疫组织化学,免疫沉淀,免疫荧光,流式细胞术等分析技术中的可用性。方法:在BL21(DE3)中原核表达带6×His标签的SMO重组蛋白,并用Ni-NTA树脂亲和层析纯化。用SMO重组蛋白免疫Balb/C小鼠,通过杂交瘤技术制备抗SMO单克隆抗体,所得抗体的特异性及效价用ELISA和Western blot以及免疫组织化学等技术检测。结果:成功建立了一株稳定分泌抗人SMO的单克隆抗体杂交瘤细胞株,该单克隆抗体可用于ELISA,Western blot,免疫组织化学,免疫荧光,免疫沉淀,流式细胞术等分析技术。结论:成功制备了高效价的SMO单克隆抗体,为SMO相关的分子、病理及抗肿瘤研究奠定了基础。
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全文目录
内容摘要 4-5 Abstract 5-7 英文缩略词表 7-8 引言 8-10 材料与方法 10-34 1.1 材料 10-17 1.2 方法 17-34 结果 34-42 第一部分 SMO 的原核表达与蛋白纯化 34-36 第二部分 SMO 单克隆抗体的制备 36-42 讨论 42-44 小结 44-45 参考文献 45-47 综述 47-53 参考文献 50-53 后记 53-54 附录:攻读硕士学位期间发表的部分学术论著 54
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医学免疫学 > 免疫生物学
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