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板蓝根多糖的提取及其免疫调节作用研究
作 者: 耿婵娟
导 师: 刘志明
学 校: 黑龙江八一农垦大学
专 业: 食品科学
关键词: 板蓝根多糖 水法提取 多糖含量 分子量 免疫调节作用
分类号: R284.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
板蓝根多糖是板蓝根中含量较多的一种活性多糖,约占板蓝根总质量的12%,具有提高机体免疫力、清除体内自由基、抗菌抗病毒等多种生物功效。但目前板蓝根各种药剂生产工艺中,往往把板蓝根制药残渣视为废品,药渣中尚还有大量的板蓝根多糖未有效利用,造成资源的浪费。本文意在从板蓝根制药残渣中提取多糖,得到提取的最佳工艺条件,并以简便方法测定多糖的分子量分布范围,研究板蓝根多糖对免疫抑制小鼠免疫调节作用影响。本研究首先对板蓝根粉末进行石油醚脱脂、95%乙醇多次回流浸提得到模拟板蓝根制药残渣,醚溶和醇溶物质各占1.17%和5.07%。采用单因素和正交试验研究了浸提时间、浸提温度、浸提次数对水提板蓝根多糖的影响,研究结果为:在水浴温度95℃下提取4次,每次2h,该条件下得到的多糖得率为16.43%。实验以醋酸铅作为沉淀剂对多糖水提液进行除杂脱色,再以中空纤维膜对其进行分级分离,用苯酚-硫酸法测定各级分离液中多糖含量,进而求得多糖分子量分布范围。实验测得板蓝根多糖液浓度为37.392mg/mL,分子量在1×10~4g/mol~1×10~5g/mol范围的质量分数为90.8%,板蓝根多糖分子量主要分布在2×10~4g/mol~5×10~4g/mol。用该法测得板蓝根多糖分子量分布数据可靠,避免了反复分离、提纯带来的繁琐操作和实验误差。将试验小鼠分为对照组、模型组和剂量(低、中、高)组,建立免疫抑制模型。对照组、模型组饲喂基础饲料,剂量组分别饲喂含不同板蓝根粗多糖的饲料。6周后测小鼠血常规指标、脏体比、血清中白介素-2及肿瘤坏死因子-α的含量。结果表明,免疫抑制小鼠的白/红细胞数、血小板数和血红蛋白值均随粗多糖剂量的增加而增大;体增重对照组最大,低、中、高剂量组和模型组依次递减;各剂量组脏体比均明显小于对照组;各剂量组小鼠血清中IL-2和TNF-α水平均显著上升。说明板蓝根粗多糖能提升小鼠免疫功能,但对小鼠的发育有一定影响。
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全文目录
摘要 3-4 Abstract 4-11 第一章 文献综述 11-24 1.1 板蓝根概况 11-14 1.1.1 板蓝根简介 11 1.1.2 国内外研究进展 11 1.1.3 板蓝根的化学成分以及相关药理作用研究进展 11-13 1.1.4 大庆地产板蓝根行业发展趋势 13-14 1.2 多糖提取、分离及检测技术进展 14-19 1.2.1 多糖的提取方法 15-17 1.2.2 多糖分离方法 17 1.2.3 纯化方法 17 1.2.4 含量的测定 17-18 1.2.5 分子量的测定 18-19 1.3 板蓝根多糖生理功能研究进展 19-21 1.3.1 提高机体免疫力 19-20 1.3.2 保护肝脏作用 20 1.3.3 抗氧化作用 20 1.3.4 抗病毒作用 20-21 1.3.5 抗炎作用 21 1.3.6 促进肠道发育,改善肠道微环境 21 1.3.7 降血脂作用 21 1.4 植物多糖的开发与应用 21-22 1.4.1 在医药方面的应用 21-22 1.4.2 在食品工业中的应用 22 1.5 立题的目的意义 22 1.6 课题主要研究内容 22-24 1.6.1 板蓝根粗多糖的提取 22 1.6.2 板蓝根粗多糖含量和分子量分布范围测定 22-23 1.6.3 板蓝根多糖免疫调节作用研究 23-24 第二章 板蓝根多糖提取工艺研究 24-35 2.1 材料、试剂和仪器 24-25 2.1.1 实验材料的获得与处理 24 2.1.2 实验试剂 24 2.1.3 实验仪器 24-25 2.2 实验流程 25 2.3 实验方法 25-26 2.3.1 从模拟板蓝根药渣中提取粗多糖 25-26 2.3.2 从板蓝根生药粉中提取板蓝根多糖 26 2.4 结果与分析 26-34 2.4.1 石油醚脱脂 26-27 2.4.2 乙醇浸提 27-28 2.4.3 水提取板蓝根多糖工艺条件的优化 28-33 2.4.4 板蓝根生药粉直接水提多糖 33-34 2.5 讨论 34 2.6 本章小结 34-35 第三章 板蓝根多糖含量及分子量分布范围的测定 35-42 3.1 材料、试剂和仪器 35 3.1.1 实验原料 35 3.1.2 实验试剂 35 3.1.3 实验仪器 35 3.2 实验流程 35-36 3.3 实验方法 36-37 3.3.1 板蓝根多糖提取液多糖含量的测定 36-37 3.3.2 板蓝根多糖分子量分布范围的测定 37 3.4 结果与分析 37-40 3.4.1 板蓝根多糖液多糖含量的测定 37-39 3.4.2 板蓝根多糖分子量分布范围的测定 39-40 3.5 讨论 40 3.6 本章小结 40-42 第四章 板蓝根多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节作用研究 42-51 4.1 材料、试剂和仪器 42-43 4.1.1 实验原料 42 4.1.2 实验动物 42 4.1.3 实验试剂 42 4.1.4 实验仪器 42-43 4.2 实验流程 43 4.3 实验方法 43-46 4.3.1 实验小鼠分组及饲喂 43-44 4.3.2 血常规检测 44 4.3.3 免疫器官的质量测定 44-45 4.3.4 小鼠 IL-2 和 TNF-α水平测定 45-46 4.3.5 实验结果统计方法 46 4.4 结果与分析 46-49 4.4.1 板蓝根多糖对免疫抑制小鼠体重的影响 46 4.4.2 板蓝根多糖对免疫抑制小鼠脏体比的影响 46-47 4.4.3 板蓝根多糖对免疫抑制小鼠血细胞的影响 47-48 4.4.4 板蓝根多糖对免疫抑制小鼠细胞因子的影响 48-49 4.5 讨论 49-50 4.6 本章小结 50-51 第五章 研究总结 51-53 5.1 模拟板蓝根制药残渣提取多糖工艺的优化 51 5.2 板蓝根多糖含量的测定 51 5.3 板蓝根粗多糖的分子量分布范围测定 51 5.4 板蓝根多糖的免疫调节功能的研究 51-53 参考文献 53-58 致谢 58-59 作者简介 59
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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药化学 > 有效成分的分离与提取
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