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益气活血方对大鼠心肌缺血及闰盘相关蛋白表达的影响

作　者: 王馨
导　师: 李叶双
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中医内科学
关键词: 益气活血方心肌缺血心功能闰盘
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

目的：采用结扎冠状动脉左前降支致大鼠急性心肌缺血模型,筛选益气活血方的组方配伍,确认最佳组方的抗心肌缺血作用,初步探讨益气活血方可能的作用机制。方法：一、益气活血方组方优化实验大鼠随机分为8组,益气活血方处方1、2、3各设低、高剂量组,另设模型对照组和合心爽组(HXS),连续给药7次,结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌缺血模型；模型建立4h后处死动物,摘取心脏,切片后于1%TTC染液中染色,分离梗死区和非梗死区并称重,计算心肌梗死面积比。二、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血作用大鼠按体重随机分为6组,YQHX低、中、高剂量组,另设模型对照组、假手术和HXS对照组,连续给药7次。结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死模型,4h后经右颈总动脉行左心室插管,测定心梗面积和左心室收缩压力峰值(LVP)等指标；摘取心脏,进行光镜、电镜检测,观察心肌形态学改变；颈动脉取血,按试剂盒要求测定血清cTnT、cTnI的含量三、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用机制研究大鼠随机分为6组,假手术组、模型对照组、阳性对照组和YQHX低、中、高剂量组,连续7次给药后,结扎冠状动脉左前降支复制急性心肌梗死模型,4h后颈动脉取血,按试剂盒要求检测SOD、MDA、GSH的含量；取心肌组织,采取免疫组化法、Western-blot、RT-PCR法分别检测N-钙粘蛋白(N-cadherin)、桥粒斑蛋白(Desmoplakin)和心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)的mRNA及蛋白表达结果：一、益气活血方组方优化实验结果显示：与模型组比较,处方1、处方2均有降低心肌梗死面积的作用,HXS组降低心肌梗死面积幅度为42.4%,处方1低、高剂量组降低心肌梗死面积的幅度则分别为24.5%、31.8%,相比较,处方2高剂量组降低心肌梗死面积的趋势更明显,降低幅度达到54.8%；二、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用实验结果显示：与模型对照组比较,HXS组降低心肌梗死面积幅度为44.4%,YQHX低、中、高剂量组均可明显使心肌梗死面积降低(P<0.05,P<0.01)；与模型组比较YQHX中、高剂量能明显提高模型动物左心室压力LVP(P<0.05),高剂量组对+LVdp/dtmax、-LVdp/dtmax有明显升高作用(P<0.05),提示受试物对急性心肌缺血大鼠心功能有明显的改善作用；光镜检测结果,模型对照组梗死区可见出血,炎细胞聚集、心肌大量坏死、坏死心肌结构紊乱；与模型对照组比较,YQHX中、高剂量组坏死心肌减少。电镜检测结果,模型对照组成纤维细胞质一部分有轻微扩张,粗面内质网一侧有大量胶原纤维及毛细血管的片段,与模型对照组比较,YQHX低、中、高剂量组超微结构均有一定的改善。冠脉结扎后,血清中cTnT、cTnI含量明显升高(P<0.05,P<0.01),提示心肌细胞受到损伤,YQHX可明显降低cTnT(P<0.05);三、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用机制研究结果显示：与模型对照组比较,YQHX高剂量组可明显使降低的GSH、SOD活性升高(P<0.05),YQHX中、高剂量均可明显使升高的MDA含量降低(P<0.05),该结果提示YQHX有一定的抗氧化作用；与模型对照组比较,中剂量组和高剂量组Cx43、Desmoplakin、N-cadherin mRNA表达水平明显升高,且随剂量增加而表达增加,Western-blot检测随剂量增加Cx43、 N-cadherin蛋白表达均有所升高。免疫组化检测Cx43、N-cadherin发现,与模型对照组比较,YQHX低、中、高剂量组染色较深,分布较规则,部分区域界限较为清晰,提示该蛋白的表达量有所增多,组织形态学改善。结论：通过益气活血方组方优化实验、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用实验、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用机制三部分实验研究发现,益气活血方可显著减小缺血后大鼠心肌梗死面积,改善大鼠心功能,其作用机制可能与抗自由基损伤,升高心肌闰盘Cx43、 Desmoplakin、N-cadherin mRNA表达和蛋白表达,改善缺血心肌的细胞间信息传递等有关

全文目录

缩略语表  4-6
中文摘要  6-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-13
文献综述  13-31
  一、现代医学对心肌缺血的认识及研究进展  13-24
    (一) 心肌缺血损的发生机制  13-21
    (二) 现代医学对心肌缺血的治疗  21-24
  二、祖国医学对心肌缺血的认识及研究进展  24-31
    (一) 关于病名  24
    (二) 对心肌缺血的病因病机的认识  24-25
    (三) 中药对心肌缺血的治疗的研究  25-31
材料与方法  31-44
  一、第一部分益气活血方组方优化实验  31-32
    (一) 实验材料  31
    (二) 实验方法  31-32
    (三) 统计方法  32
    (四) 实验结果  32
  二、第二部分益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用  32-35
    (一) 实验材料  32-33
    (二) 实验方法  33-34
    (三) 统计方法  34
    (四) 实验结果  34-35
  三、第三部分益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用机制研究  35-44
    (一) 实验材料  35-37
    (二) 实验方法  37-42
    (三) 统计方法  42
    (四) 实验结果  42-44
讨论  44-49
  一、益气活血方组方优化实验  44
    (一) 模型制造  44
    (二) 动物选择  44
    (三) 麻醉药物选择  44
  二、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用  44-45
  三、益气活血方对冠脉结扎致大鼠心肌缺血的作用机制  45-49
结论  49-50
致谢  50-51
参考文献  51-62
附表  62-65
附图  65-71
攻读硕士学位期间发表的论文  71-73
个人简历  73

益气活血方对大鼠心肌缺血及闰盘相关蛋白表达的影响

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