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矽肺发生发展过程中PDGF、TGF-β变化规律的研究
作 者: 刘红军
导 师: 王瑞
学 校: 济南大学
专 业: 劳动卫生与环境卫生学
关键词: 矽肺 病理 TGF-β PDGF 大鼠 早期炎症
分类号: R135.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2012年
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内容摘要
【研究目的】分析炎性细胞和PDGF、TGF-β在矽肺发生发展过程中的变化规律,探讨PDGF、TGF-β在矽肺不同阶段诱导痰、BALF和血清中的含量及意义。【研究方法】动物实验:选择雄性Wistar大鼠84只,随机分为实验组和对照组,每组42只。采用非气管暴露法一次性气管内注入矽尘给大鼠染毒,每组分6个时间点(3,7,14,21,28,60d),各时间点分别取5只大鼠进行在体支气管肺泡灌洗,另外两只用多聚甲醛进行肺部在体灌注,并用多聚甲醛进行外固定。采用酶联免疫吸附法测定其中TGF-β,PDGF含量,多聚甲醛固定后的肺组织石蜡包埋,切片,HE染色,普通光镜下观察肺组织病理变化,探讨TGF-β,PDGF与矽肺炎症反应的关系。人群研究:240名金矿工人,其中Ⅰ期矽肺患者80人,Ⅱ期矽肺患者40人,接尘组80人,对照组40人。应用痰液诱导技术取得研究对象的痰液样本并应用酶联免疫吸附法测定TGF-β,PDGF含量,进行痰液涂片,用光学显微镜观察诱导痰中炎症细胞(中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、尘细胞)数量变化;同时通过调查问卷和安环保的资料调查各组工人的一般情况并计算出各组工人的累积总粉尘接触量,分析接尘组和病例组中累积总粉尘接触量与TGF-β,PDGF含量之间的相关性关系。【研究结果】一、矽肺早期TGF-β、PDGF变化的实验研究1大鼠肺组织病理学改变对照组肺组织结构基本正常,炎症反应轻微;染尘组第3d后,肺泡壁和肺泡间隔毛细血管旁中性粒细胞轻度浸润,靠近终末气道的肺泡壁和肺泡间隔有少量巨噬细胞浸润;在7d时,部分支气管上皮细胞及肺泡上皮细胞脱落,肺泡间隔增宽且出现了水肿,可见较多的中性粒细胞、巨噬细胞在肺泡腔内聚集,;第14天时,肺泡间隔进一步增厚,肺泡结构开始遭到破坏,淋巴细胞开始渗出,浆细胞渗出增多,仍然有大量巨噬细胞增生、聚集。第21和28天时,肺泡腔大部分消失,肺泡间隔断裂,细胞结节数量多,炎性细胞主要是淋巴细胞和浆细胞,偶尔可以见到成纤维细胞。第60d时,肺组织结构遭到严重破坏,成纤维细胞大量出现。2大鼠BALF、血清中TGF-β、PDGF含量变化BALF中的TGF-β,PDGF含量在各时间点较对照组均有不同程度的增高,差异有统计学意义(P<0.05)。血清中的TGF-β,PDGF含量在各时间点较对照组均有不同程度的增高,差异有统计学意义(P<0.05)。3大鼠血清和BALF中TGF-β,PDGF的相关性分析血清中PDGF和TGF-β存在正相关关系(r=0.238,P<0.05),BALF中PDGF和TGF-β存在正相关关系(r=0.357,P<0.05)。二、矽肺不同发展阶段TGF-β、PDGF变化的现场研究1诱导痰细胞学研究接尘组、矽肺I期组和矽肺II期组中性粒细胞比例均明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。矽肺I期和矽肺II期组巨噬细胞比例明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);矽肺I期和矽肺II期组巨噬细胞比例明显低于接尘组,差异具有统计学意义(P<0.05);接尘组、矽肺I期组和矽肺II期组尘细胞比例明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);矽肺I期组和矽肺II期组尘细胞比例明显高于接尘组,差异具有统计学意义(P<0.05);接尘组、矽肺I期组淋巴细胞比例明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);接尘组、矽肺I期组淋巴细胞比例显著低于矽肺II期组,差异具有统计学意义(P<0.05)。2诱导痰中TGF-β,PDGF含量比较与对照组相比,矽肺I期组、矽肺II期组的PDGF,TGF-β水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05),与接尘组相比,矽肺I期组、矽肺II期组的PDGF,TGF-β水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。3按累积总粉尘接触量分组,接尘工人诱导痰中PDGF水平与接尘量存在正相关关系,r值为0.264(P<0.05),病例组诱导痰中PDGF水平与接尘量不存在相关关系,r值为-1.96(P=0.081);TGF-β水平与接尘量也存在正相关关系,r值为0.186(P<0.05),病例组诱导痰中TGF-β水平与接尘量不存在相关关系,r值为0.074(P=0.513)【研究结论】1大鼠染矽尘后3~60内,肺组织病理学改变为早期炎症反应,表现为炎性细胞浸润聚集,后期肺泡间隔增厚,成纤维细胞出现,纤维组织开始增生,肺泡正常组织发生变化,TGF-β,PDGF在炎症反应过程中发挥作用。2染矽尘大鼠BALF和血清中的TGF-β,PDGF含量随染尘时间的延长先升高后降低,并与肺组织病理变化一致,可作为反应矽肺肺纤维化程度的敏感指标。3诱导痰中TGF-β,PDGF含量变化能较好地反应矽肺进展中肺部炎症反应程度的变化,且TGF-β和PDGF含量与接尘量存在弱正相关关系,可以作为矽肺早期炎症无损伤检测的生物标志物。4接尘工人和矽肺患者诱导痰中中性粒细胞、尘细胞数量显著高于对照组,巨噬细胞显著低于对照组,可用作粉尘导致炎症与其他因素导致炎症的鉴别。
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全文目录
研究生导师及课题指导小组成员简介 5-7 摘要 7-10 ABSTRACT 10-14 主要符号表 14-15 前言 15-18 第一部分 矽肺早期 TGF-β、PDGF 变化的实验研究 18-29 材料与方法 18-21 1 材料 18-19 2 方法 19-21 结果 21-26 1 肺组织病理变化 21-22 2 BALF 中 TGF-β浓度变化 22-23 3 血清中 TGF-β浓度变化 23-24 4 BALF 中 PDGF 浓度变化 24-25 5 血清中 PDGF 浓度变化 25-26 6 BALF 和血清中 PDGF、TGF-β浓度相关性分析 26 讨论 26-28 小结 28-29 第二部分 矽肺不同发展阶段 TGF-β、PDGF变化的现场研究 29-41 对象与方法 29-33 1 研究对象 29 2 主要试剂与仪器设备 29-30 3 方法 30-33 结果 33-38 1 各组研究对象的一般情况 33 2 诱导痰细胞学研究 33-35 3 诱导痰中 PDGF 水平比较 35-36 4 诱导痰中 TGF-β水平比较 36 5 诱导痰中 PDGF 水平与接尘量的相关分析 36-37 6 诱导痰中 TGF-β水平与接尘量的相关分析 37-38 讨论 38-40 小结 40-41 参考文献 41-45 附表 45-46 综述 46-53 参考文献 51-53 攻读硕士期间已(待)发表论文 53-54 致谢 54
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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 劳动卫生 > 职业性疾病预防 > 生产性粉尘及尘肺
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